ETUDE DE L`EFFET ANTIMICROBIEN DE TROIS ECHENTILLONS

ETUDE DE L’EFFET ANTIMICROBIEN DE TROIS ECHENTILLONS DU MIEL NATUREL RECOLTES DU TERRITOIRE
ALGERIEN
MERAH M., BENSACI BACHAGHA M. et BOUDERHEM A.
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ETUDE DE L’EFFET ANTIMICROBIEN DE TROIS ECHENTILLONS DU
MIEL NATUREL RECOLTES DU TERRITOIRE ALGERIEN
Mostefa MERAH*, Messaoud BENSACI BACHAGHA et Amel BOUDERHEM
Laboratoire de Bioressources Sahariennes : Préservation et Valorisation,
Département des Sciences de la Nature et de la Vie,
Université Kasdi Merbah Ouargla, BP 511, Ouargla 30000 (Algérie)
* E-mail : [e-mail]
RÉSUMÉ : Le présent travail est une contribution à l'évaluation de l’effet antimicrobien de trois échantillons de miel
naturel récoltés de trois sites du territoire Algérien. Il s’agit de Tizi-Ouzou, Sidi Bel Abbès et Jijel et un échantillon de
miel importé de l’Arabie Saoudite (Alshifa). Les quatre échantillons sont testés sur cinq souches microbiennes à
caractère pathogène (quatre souches bactériennes et un champignon).
Nous avons choisi pour cette étude trois catégories de germes, selon leur degré de sensibilité aux antibiotiques, à
savoir : des souches très sensibles, moyennement sensibles et des souches résistantes.
Notre travail est basé sur l'évaluation de l’effet antimicrobien par la technique de diffusion en gélose.
Les résultats obtenus montrent clairement l'impact du miel naturel sur la sensibilité microbienne. Cet effet inhibiteur
a été constaté pour les trois échantillons testés, avec des différences d’un échantillon à un autre et d’une souche
microbienne à une autre.
Nous avons constaté que les trois échantillons de miel naturel ont montré deux types d’effets antimicrobiens : un
effet bactéricide et un effet bactériostatique et fongistatique vis-à-vis des souches testées (le miel manifeste un effet
bactéricide ou bactériostatique ou les deux à la fois). Alors que le 4ème échantillon (Alshifa) n’a aucun effet
antimicrobien.
MOTS-CLÉS : effet antimicrobien, miel naturel, bactéries à Gram+, bactéries à Gram-, Candida albicans, miel Alshifa.
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1- Introduction
La connaissance et l'utilisation du miel par l'homme remonte aux temps les plus reculés de son
histoire et il fait partie indubitablement des aliments les plus anciens de l'humanité. Le Saint Coran
et le Hadith du prophète présentent le miel en tant que guérisseur des maladies (Sourate «El-Nahl»
verset 68-69) et comme a dit le prophète (bénédiction et paix sur lui) : "Le miel est un remède pour
chaque maladie et le Coran est un remède pour toutes les maladies d'esprit, c'est pourquoi je vous
recommande les deux remèdes : le Coran et le miel" (RAPPORTE PAR L'IMAM BUKHARI).
L'impact des maladies infectieuses ne cesse de croître dans le monde. Cela est du généralement
au phénomène de l'antibio-résistance. Pour cette raison, des études récentes s'intéressent aux vertus
thérapeutiques de certains produits naturels, sachant que ces derniers ne présentent pas
généralement des effets secondaires. Le miel compte parmi ces produits les plus convoités. En
raison de ses propriétés inhibitrices et thérapeutiques, de nombreuses études se sont intéressées aux
propriétés thérapeutiques du miel [1-3].

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Dans cette optique, le présent travail a pour principal objectif l'évaluation du pouvoir
antimicrobien du miel, vis-à-vis de certains micro-organismes pathogènes.
On peut classer les miels, selon l'origine locale, le mode d'obtention [4-7], le mode de
traitement et la source alimentaire. De ce fait, tous les miels ont des propriétés communes, mais
chaque miel, se caractérise par des propriétés thérapeutiques propres à lui [8-10].
La composition chimique du miel varie selon la qualité du nectar et du miellat récoltés, la
nature du sol et l'état physiologique de la colonie [11]. Cane (1980), cité par Philippe (1999) [12],
rapporte que 181 substances ont été identifiées et qu'il est évident qu'en réalité cette composition est
beaucoup plus complexe. L’HMF (hydroxyméthylfurfural) est présent dans les miels vieux ou qui
ont subi un chauffage. La teneur en HMF augmente progressivement par l'élévation de la
température et la durée de stockage. Cette progression serait plus rapide dans les miels à pH faible
(compris entre 3 et 3,5). L’augmentation de HMF est un signe de la mauvaise qualité du miel. Le
dosage d' HMF permet d'ailleurs de détecter si le miel a été chauffé et donc dénaturé. On peut ainsi
détecter certaines fraudes.
Les importants composés responsables de l’activité antibactérienne sont les composés
phénoliques (généralement les tanins et les flavonoïdes), les inhibines dites « non peroxydes » telles
que des lysozymes et les substances volatiles et aromatiques du miel [13].
Produit phare de la ruche, le miel est utilisé depuis toujours pour ses vertus nutritives,
curatives et spirituelles. Par sa composition très variée (sucres, vitamines, polyphénols...) ses
applications sont innombrables. Les miels ont une action thérapeutique variable, selon leur origine
florale, sur tous les systèmes du corps humain : croissance, système immunitaire, système
respiratoire, système digestif. Ils agissent aussi sur la peau comme cicatrisants des plaies normales,
surinfectées ou des brûlures.
Le miel naturel montre une activité cicatrisante importante. Outre son activité
antibactérienne, il jouit d'une propriété nettoyante et désinfectante.
En plus, son action énergétique profite aux cellules jeunes, en favorisant notamment la
multiplication cellulaire. Des études comparatives ont montré des résultats très intéressants dans la
cicatrisation de brûlures ou de plaies nécrosées.
En plus de leurs propriétés thérapeutiques intrinsèques, les miels présentent également un
intérêt comme vecteur d'autres agents thérapeutiques. Cela signifie que, grâce à leur pression
osmotique favorable, ils constituent de bons véhicules permettant d'améliorer le degré d'assimilation
par l'organisme d'autres produits à action thérapeutique [http://www.docteur-abeille.com cité par
[14].
Le miel présente donc une forte bioactivité, les enzymes de miel assurent un effet
antimicrobien grâce à l'acide gluconique qu'il contient et leur faible pH qui est d’environ 3.0 à 4.5.
Beaucoup des bactéries sont inhibées à ce pH. De plus, les flavonoïdes qu’il contient ont un fort
effet antioxydant et emprisonnent donc les radicaux oxygénés néfastes [15-17].
2- Matériels et méthodes
Le présent travail consiste en l'évaluation de l’effet antimicrobien de trois échantillons de miel
naturel, récoltés dans trois sites du territoire algérien ; il s’agit de Tizi-Ouzou, Sidi Bel Abbès et
Jijel, et un échantillon de miel importé de l’Arabie Saoudite (Alshifa) (Tableau 3). Selon nos
connaissances, les trois échantillons 1, 2, et 3 sont de type multi floral. Les échantillons ont été
utilisés tels qu’ils ont été achetés des agriculteurs sans l’extraction de leurs composés. Les dates de
récolte des trois échantillons sont déterminées également d’après les agriculteurs.
Les quatre échantillons sont testés sur cinq souches microbiennes (quatre souches bactériennes
et un champignon).
Nous avons choisi pour cette étude trois catégories de germes, selon leur degré de sensibilité
aux antibiotiques, à savoir : des souches très sensibles, moyennement sensibles et des souches
résistantes.
Les souches microbiennes testées ont été fournies par le laboratoire de l’Hôpital «Mohamed
Boudiaf de Ouargla».

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Il s'agit d'isolats cliniques responsables d'infections nosocomiales. Ainsi, nous avons retenu les
espèces suivantes : Bactéries (E. coli, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Pseudomonas
aeroginosa) ; levure (Candida. albicans)
Les bactéries à Gram- (Serratia marcescens, E. coli et pseudomonas aeroginosa) sont isolés sur
le milieu Hektoen qui inhibe la croissance de la flore Gram+.
La bactérie à Gram+ (Staphylococcus aureus) est isolée sur le milieu Chapman, caractérisé par
sa forte teneur en NaCl et qui inhibe les bactéries Gram–.
Les bactéries à Gram- sont identifiées et distinguées par le test de la galerie API 20E.
Staphylococcus aureus est identifiée par test de Coagulase par la technique de Latex.
L’ensemencement des microorganismes est effectué, selon la technique de la culture en nappe
sur le milieu Muller Hinton gélosé dans des boites de Pétri.
La sensibilité aux antibiotiques est étudiée par l'antibiogramme. Les disques d'antibiotiques
nous ont été donnés par le laboratoire de Microbiologie de l’Hôpital «Mohamed Boudiaf de
Ouargla» (BIO RAD4SUSCEPTIBILITE DISKS). Les antibiotiques utilisés sont illustrés dans le
tableau. 1. Les disques d'antibiotiques sont déposés dans chaque boite, en contact avec la culture.
Les boites sont incubées 24 h à 37C°.
L'évaluation du pouvoir antimicrobien du miel est réalisée par la technique de diffusion en gélose.
L’expérimentation s’est déroulée dans le laboratoire de Bioressources Sahariennes de
l’Université Kasdi Merbah de Ouargla et le laboratoire de Microbiologie de l’Hôpital «Mohamed
Boudiaf de Ouargla».
Des disques stériles imprégnés jusqu'à la saturation dans des dilutions différentes sont déposés
dans chaque boite. Les boites sont incubées 24 h à 37C°.
Les dilutions utilisées sont : A (0%), B (25%), C (50%), D (75%).
Le profil de sensibilité des bactéries aux antibiotiques ou au miel peut être déterminé par la
mesure des diamètres des zones d'inhibition autour des disques sur boites.
Vu l'absence d'une référence de lecture qui détermine le seuil de sensibilité nous avons
considéré une souche sensible si le diamètre de la zone d'inhibition est supérieur à 10 mm ;
résistante si le diamètre de la zone d'inhibition est inférieur à 10 mm. La sensibilité est intermédiaire
si le diamètre est égal à 10 mm.
Tableau 1 : Antibiotiques utilisés dans l’antibiogramme.
Acide
Fusidique Ampic
iline
Amoxicilline
Amikacine
Clindamycine
Imiperem
Penicilline
Spiramycine
AM
AF
AMC
AN
CM
IPM
P
SP
Céfaloxine Céfa
lozoline Colisti
ne Erythromyci
ne Gentamicine
Sulfamide
Vanomycine
CN
CZ
CS
E
GM
SXT
VA

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3- Résultats et discussion
3.1- Résultats
La photo d’une boîte de l’antibiogramme d’E. coli (Photo 1) est présentée pour une
comparaison avec les tests de miel.
L’évaluation de l'activité antimicrobienne du miel est basée sur les mesures des diamètres en
(mm) des halos d’inhibition de différentes dilutions des différents échantillons de miel. Ces mesures
permettent de déterminer l’activité antimicrobienne du miel in vitro (Photos 2, 3, 4, 5 et 6). Les
résultats des antibiogrammes sont résumés dans le tableau 2.
Tableau 2 : Antibiogramme des bactéries à Gram- etGram+. Les chiffres représentent les diamètres
des halos d'inhibition en mm.
Antibiotiques (Gram-) AMC AN CN CZ CS IPM GM P SXT
E. coli 20 22 4.0 14 20 32 24 00 24
S. marcescens 20 24 00 6 00 28 30 00 20
P. aeroginosa 20 24 00 6 00 28 30 00 20
Antibiotiques (Gram+) AMC P CZ AM SP E GM CM AF SXT
Staph. aureus 08 00 00 00 00 00 10 10 10 24
Photo 2 : Effet de miel sur E. Coli
A
B
D
C
C
A
D
B
C
Echantillon 1 Echantillon 3
D
C
A
A
B
B
D
C
Echantillon 2 Echantillon 4
SXT
IPM
AMC
GM
AN
P
Photo 1 : Antibiogramme
d’E. coli

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A
B
C
D
D
C
A
B
A
B
D
C
D
B
C
A
Echanntillon 2
Photo 3 : Effet de miel sur Serratia marcescens
Echanntillon 1
B
C
Echanntillon 3
Echanntillon 4
Photo 4 : Effet de miel sur Pseudomonas aeroginosa
B
A
D
C
A
D
C
B
C
D
B
A
B
C
D
Echantillon 3
Echantillon 1
A
Echantillon 2
Echantillon 4