Diagnostic et exploration des déficits immunitaires héréditaires

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Diagnostic et exploration
des déficits immunitaires
héréditaires
C. Picard
Centre d’étude des déficits immunitaires,
Hôpital Necker-Enfants Malades
[email protected]r
Déficits immunitaires héréditaires
•Déficits immunitaires « classiques » :
> 200 déficits décrits
> 150 gènes identifiés
1/5000 naissances
Infections sévères
à germes « opportunistes »
à germes « communs » multiples
(Notarangelo et al. J Allergy Clin Immunol,2009)
BILAN DE DEPISTAGE de DIH
1) NFS Plaquettes
•Hb (anémie), plaquettes
•Nombre de PN
•Nombre de Lymphocytes (interprétation en fonction de l’age)
2) EPP (adulte) - Dosage pondéral Ig G, A, M (enfant)
→
→→
→évaluation de la production d’anticorps
3) Sérologies vaccinales et/ou post-infectieuses
→
→→
→évaluation de la production d’anticorps spécifiques
•EPP (adulte)
•Dosage pondérale des Immunoglobulines (en fonction de l ’âge)
•Sous classes d’Immunoglobulines (IgG1,2, 3 et 4) (après 24 mois)
Explorations: Immunité humorale (1)
IgMIgE
IgDIgAIgG
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
0 1 2 3 4 5 6 7 8 910 1 3 5 7 9 1 113 17
Age
Mois Ans
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
012345678910 1 3 5 7 9 1 113 17
Age
Mois Ans
//
//
//
0.0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
2.4
//
//
//
//
//
//
IgM
IgA
IgG
Explorations: Immunité humorale (2)
•Fonction anticorps
Anti antigènes protidiques
(vaccinaux et/ou post-infectieux) :
vaccin conjugué (pentacoq, prévenar…)
Anti antigènes polysaccharidiques (après 24 mois) :
vaccin non-conjuqué : Pneumo23
Allohémaglutinines de groupe sanguin
Explorations: Immunité humorale (3)

2
•Phénotypage lymphocytaire (quantitatif)
–Lymphocytes T (CD3, CD4, CD8)
- Lymphocytes B (CD19, CD20)
–Cellules NK (CD16 CD56)
•Fonctions lymphocytaires T (qualitatif)
- Proliférations mitogènes (PHA, anti-CD3)
- Proliférations antigènes
vaccinaux (tétanos, polio, tuberculine..)
infectieux (candidine, VZV, HSV, etc….)
Explorations immunitaires:
immunité cellulaire
Explorations immunitaires:
phagocytes et Complément
–Fonction des phagocytes (PN, monocytes)
•Chimiotactisme (mouvement)
•Explosion oxydative: Nitro Blue Tetrazolium (NBT), DHR,
chemoluminescence
–Complément :
•CH50
•AP50
–Corps de Jolly (asplénie)
–Autres…
Classification des déficits
immunitaires héréditaires (DIH)
•Déficits immunitaires combinés (T et B)
•Déficits immunitaires humoraux (B)
•Déficits immunitaires phagocytaires
•Déficits du complément
•Déficits de l’immunité innée
•Déficits de l’homéostasie du système immunitaire
•Pathologies auto-inflammatoires
(Notarangelo et al. J Allergy Clin Immunol,2009)
Déficit complet de l'immunité adaptative:
Déficit Immunitaire Combiné Sévère
CD8+ T cell
CD4+ T cell
NK cell
B cell
Common lymphoid
progenitor
Hematopoietic
stem cell
Common myeloid
progenitor
macrophage
dendritic cell
PMN
Déficit immunitaire combiné sévère (DICS)
Fréquence et transmission : 1/100 000, AR ou XR
Premiers signes< 3 mois
Signes Cliniques = Infections
- opportunistes (Pneumocystose…)
-fongiques (Candidose…)
-virales (Parainfluenzae, Adv, CMV,VRS…)
-bactériennes, BCGite
•Numération Formule
Sanguine
lymphocytes +++
< 1500/mm
3
•Absence de thymus
•Phénotypage lymphocytaire
absence de lymphocyte T
•Hypogammaglobulinémie
(hypoIgG, IgA et IgM)
Déficit immunitaire combiné sévère :
Explorations

3
DICS (diagnostic)
Formule leucocytaire à interpréter en fonction de l’age
Déficit Immunitaire Combiné Sévère
CD8+ T cell
CD4+ T cell
NK cell
B cell
Common lymphoid
progenitor
Hematopoietic
stem cell
Common myeloid
progenitor macrophage
dendritic cell
PMN
Reticular
dysgenesia
ADA
deficiency
SCID T-B+
(γ
γγ
γc,Jak3)
SCID T-B+NK+
IL7RA
SCID T-B-NK+
Rag1, Rag2, Artemis
CID T+/-B+NK+
CD3D,E,G,Z
Déficits immunitaires combinés
(immunités cellulaire et humorale touchées)
Nombreuses entités clinico-biologiques:
3 exemples :
-Déficit en CD40L (syndrome HyperIgM de type 1, XL)
-Déficit en CD40 (syndrome HyperIgM de type 3, AR)
-Défaut d’expression des molécules HLA de classe II Lymphocyte T
activé
Lymphocyte B
CD40L CD40
TCR MHC
Switch
IgG,A, E
Cµ
µµ
µ> γ
γγ
γα
αα
αε
εε
ε
Mutations
somatiques
IgM
Coopération T/B au sein des organes lymphoïdes
Déficits en CD40L, CD40 et HLA II
D
Dé éficits en CD40L et CD40 ficits en CD40L et CD40
•Mode de transmission
•Liée au chromosome X (CD40-ligand) : 95 %
•Transmission autosomique récessive (CD40) : 5 %
•Défaut de coopération T-B/monocytes
–Défaut de l’immunité cellulaire : infections à germes
opportunistes (pneumocystose et cryptosporidies)
–Infections bactériennes
–Défaut humoral :
–taux élevé ou normal d’IgM,
–absence d’IgG et d’IgA
–neutropénie
Déficit en CD40L (Syndrome hyperIgM lié à l’X)
Absence d’expression de CD40L sur les Blastes T J7 (conA+IL-2)
activés par la PMA+Ionomycine
CD69 CD40 CD40L
CD69 CD40LCD40
Patient
Contrôle

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Défaut d’expression des molécules HLA Classe II
•Autosomique récessif
•Anomalie génétique d’un des facteurs de
transcription (CIITA, RFX-ANK, RFXC ou RFXAP)
•Défaut de coopération T-B/monocytes
•Lymphopénie CD4
•Hypogammaglobulinémie, parfois IgM ↑
↑↑
↑
•Réponse spécifiques = absentes
–proliférations aux Ags, IDR,
–fonctions anticorps
CD19
DR
CD19
DR
septembre 2004 - PRATIQUE
PEDIATRIQUE ET DI 20
Déficits immunitaires avec manifestations
associées
Dysplasie osseuse Cartilage
Cartilage Hair Hair
hypoplasia
hypoplasia
Certains d
Certains dé éficits T ficits T
Microcéphalie
"Traits grossiers" Syndrome Syndrome hyperIgE hyperIgE- -AD AD
Anomalie neurologique Ataxie
Ataxie t té él lé éngiectasie ngiectasie
Eczema et microplaq. Syndrome de
Syndrome de Wiskott Wiskott- -
Aldrich
Aldrich
Syndrome dysmorphique Syndrome de Di George
Syndrome de Di George
Déficit Immunitaire Combiné : en pratique
•NFS avec formule leucocytaire
•Phénotypage lymphocytaire
–Lymphocytes T CD3+, CD4+, CD8+
CD45RA, CD45RO, (CD31)
–Lymphocytes B CD19+
–Cellules NK CD56 CD16, NKp46
•Proliférations lymphocytaires T mitogènes et Ags
•Explorations immunité humorale (Ig et sérologies)
•Bilan d’auto-immunité (DIC)
•Examens spécifiques en fonction du DIC suspecté
Déficits l'immunité humorale
CD8+ T cell
CD4+ T cell
NK cell
B cell
Common lymphoid
progenitor
Hematopoietic
stem cell
Common myeloid
progenitor
macrophage
dendritic cell
PMN
Déficits de l’immunité humorale
Les PLUS fréquents
Premiers signes > 6 mois
Germes : Bactéries PYOGENES
Signes associés : PULMONAIRES, ORL,
articulaire, retard de croissance +/-
→
→→
→Diagnostic :
Ig G, A et M +/- sous classes IgG (>2 ans)
Sérologies vaccinales et/ou post-infectieuses
•Agammaglobulinémie liée à l’X (M. Bruton)
•Déficit immunitaire commun variable
•Syndrome hyper IgM (AID, UNG)
•Déficit en sous-classes d’IgG
•Déficit en IgA (1/600) : isolé ou associé
Déficits Humoraux

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Agammaglobulinémie
•1/ 380 000
•X- Récessif (BRUTON) , AR (rare)
•Age de révélation 12 mois
•Otites 70%
•Sinusites 59%
•Pneumopathies 62%
•Inf. gastro-intestinales 23%
•Abcès 18%
•Méningo-encéphalites 12%
•Arthrites, Ostéomyélites 10%
•Infections bactériennes+++, Giardiase,
entérovirus
Agammaglobulinémie
•Absence de cellule B au phénotypage
lymphocytaire (CD19~0)
•Agammaglobulinémie :
–IgG< 2-3g/l, IgA et IgM basses
–Sérologies vaccinales et infectieuses négatives
ProB PréB Lymphoïde
T, NK
CD19+
CD34+
CD19+
CD34-
Cµ
µµ
µcyto
BTK
•Syndrome hétérogène avec défaut de production d’Ig
–Défaut de production d’Ig (IgG ↓
↓↓
↓+ une autre Ig (IgA))
–Présence de lymphocytes B (>1%)
•Exclusion des déficits connus
–XLA (Bruton)
–Thymome (Good)
–Hyper-IgM (CD40L, CD40, AID, UNG …)
–XLP (Purtilo)
•Fréquence 1 / 30-50 000 , M = F , 15 - 30 ans,
formes familiales: 20-25%
Déficit Immunitaire commun variable Déficits de production en Ig
CSH
T
B commutés,
mémoires
Pro B Pre B
CLP
B
plasmocytes
IgG
IgA
IgE
IgM
Déficits en
CD40L et CD40
Déficits en
AID et UNG
Agammaglobulinémie
DICV
Déficit Immunitaire humaral : en pratique
•NFS avec formule leucocytaire
•Phénotypage lymphocytaire B: CD19, CD20, CD27
•Populations B naïves : CD27-IgM+D+ (~60%)
•Populations B mémoires : CD27+IgM-D- (~20%)
•Phénotypage lymphocytaire T
•Lymphocytes T CD3+, CD4+, CD8+, CD45RA, CD45RO, (CD31)
•Explorations immunité humorale (Ig et sérologies)
•Bilan d’auto-immunité
•Examens spécifiques en fonction du DIH suspecté
Déficits phagocytaires
CD8+ T cell
CD4+ T cell
NK cell
B cell
Common lymphoid
progenitor
Hematopoietic
stem cell
Common myeloid
progenitor
macrophage
dendritic cell
PMN