Progrès dans nos connaissances des substrats neuronaux

Actualités diverses en neurosciences
et en neuropharmacologie
Vincent Seutin

Plan
•Nouvelles méthodes d’étude des relations
entre activité électrique cérébrale au niveau
cellulaire et comportement
–Optogénétique
–Chémogénétique
•Actualités sur l’utilisation de la kétamine en
psychiatrie

Etapes d’une expérience d’optogénétique

Précision
temporelle ++

Optogénétique: principe
•Utilisation d’opsines excitatrices (channelrhodopsine-2, ChR2) ou
inhibitrices (halorhodopsine, eNpHR), éventuellement couplées à une
protéine fluorescente pour visualiser les neurones transfectés
(transfection par virus de type AAV [adeno-associated virus] ou lentivirus)
•Plusieurs méthodes disponibles pour s’assurer d’une sélectivité neuronale
de la transfection
–animaux transgéniques dans lesquels la « Cre recombinase » est présente
uniquement dans certains types neurochimiques de neurones: p.e. souris
« TH-Cre »
–« construction plasmidique » qui permet que seuls certains neurones
expriment la protéine de l’opsine (p.e. dans le cortex, la mise de la
transcription du gène de ChR2 sous le contrôle du promoteur d’une kinase, la
CaMKIIa, assure que la protéine ne sera synthétisée que par les neurones
pyramidaux (et pas les interneurones)
•Illumination à la longueur d’onde appropriée (473 nm pour ChR2 et 589
nm pour NpHR); fréquence d’illumination variable