Imagerie moléculaire et adaptation thérapeutique 14 Décembre 2012

Imagerie moléculaire et adaptation
thérapeutique
14 Décembre 2012
Étude in vitro et in vivo d’un nouveau traceur
SPECT de l’apoptose
F. Mouchard, A. de Boisgrolliers, P. Vera, P. Bohn
Rappel sur l’apoptose
Apoptose = mort cellulaire programmée, processus non
inflammatoire
2 voies cellulaires entraînent l’apoptose
Voie extrinsèque : récepteurs
Voie intrinsèque : mitochondrie
Apoptose : augmentée lors des traitements par chimiothérapie
La Caspase-3
Traceurs de l’apoptose actuels
 [99mTc]Annexine V
-se lie aux phosphatidylsérines
-capté par les cellules en apoptose et en nécrose
 [18F]-ML10
-spécifique des cellules en apoptose
-nécessite un cyclotron
Radio-marquage du [99mTc]FGCDEVD
TcO4- + Na2HPO4
+ SnCl2 + tartrate
Marquage: 20 µg du peptide sont
ajoutés à un tampon phosphate (0.5
mL; pH9) et à une solution de
tartrate (1 mL; 20 mg/mL), puis 30
mCi de 99mTcO4- sont ajoutés. Une
solution de SnCl2 (0.1 mL; 1 mg/mL)
est ajoutée avant chauffage (10
min).
(TcO)-tartrate + peptide
NMe-7-D (FGCDEVD)
Pureté radio-chimique et stabilité du peptide
Time after
radiolabeling
Radiochemical
purity (%)
T=0
87,84
T = 1h
96,21
T = 2h
96,40
T = 3h
95,82
T = 4h
94,77
Captation in vitro
Captation du traceur [99mTc](Me)FGCDEVD dans deux lignées cellulaires de cancer du poumon
(H441 et A549). Cellules traitées (apoptose) : barres noires, cellules non traitées (saines) : barres
blanches. Moyenne +/- écart-type ; *** : p<0.001
Captation in vitro
Captation du traceur [99mTc](Me)FGCDEVD dans A549 traitée par cisplatine (apoptose) en présence ou
non d’anticorps anti-caspase-3. Témoin non spécifique : [99mTc]pertechnétate. Moyenne +/- écart-type ;
*** : p<0.001
Captation in vivo
Traitement par cisplatine à J0, étude de la captation in
vivo sur 3 animaux (moyenne + écart-type).
On observe un rapport de captation de 1,6 à J3.
Flèches blanches : tumeur traitée
Flèches rouges : digestif
Conclusion
•Le radio-marquage est stable dans le temps et la
pureté radio-chimique est comprise entre 90% et 95%.
•In vitro, nous observons une meilleur captation du
traceur par les cellules en apoptose que par les cellules
contrôles.
•L’anticorps anti-caspase 3 activée interfère avec la
captation du traceur, nous pouvons donc penser que
l’anticorps bloque le traceur dans l’enzyme.
•In vivo, les résultats nous encouragent à continuer
l’étude.
Perspectives
•Amélioration de la biodistribution du traceur (modulation
chimique) ex. augmentation de la lipophilie
•Mise en place d’une bimodalité (Fluo-Nucléaire) par
comarquage avec la fluorescéine (C-term)
Centre Henri-Becquerel
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