TP4 La traduction de l’ARNm CORRECTION L’ARNm contient donc les informations nécessaires à la synthèse d’une protéine, mais quelle est la correspondance entre la séquence de nucléotides de l’ARNm et la séquence d’acides aminés de la protéine. Partie 1 : établir la correspondance : le code génétique. Ø Parmi les hypothèses suivantes, lesquelles sont à invalider et laquelle peut-on théoriquement retenir? Justifier la réponse. Hypothèse1 : un nucléotide de l’ARN code pour un acide aminé. Non, il y a 4 nucléotides et 20 AA 2 Hypothèse 2 : deux nucléotides de l’ARN codent pour un acide aminé. NON : 4 combinaisons de nucléotides (16) possibles (2 parmi 4) pour 20 AA 3 Hypothèse 3 : trois nucléotides de l’ARN codent pour un acide aminé : 4 combinaisons (64) de nucléotides possibles pour 20 AA : je valide cette hypothèse Voir Aide 1 8 Vérifions : AVEC ANAGÈNE (extrait des séquences) Brin non trans. Brin trans. ARN Prot. 3 nucléotides à 1AA Brin non trans. ARN Comparaison Brin non trans. ARN - Un seul des brins de l’ADN est transcrit, l’ARN formé contient la séquence COMPLEMENTAIRE de ce brin grâce à la complémentarité des nucléotides : A-U ; C-G - L’autre bin, non transcrit porte la même séquence que le brin transcrit mais avec U à la place de T - La conversion en protéine montre que notre hypothèse est vérifiée : 3 nucléotides = 1 CODON (ou triplet) codent pour 1 AA ARN AA Exemple de correspondance AUG GUG CAC Met Val His CUG Leu ACU Thr CCU Pro GAG Glu AAG Lys En fait, c’est en 1961 que deux biologistes, Niremberg et Matthéi ont validé l’hypothèse qu’une combinaison de 3 nucléotides code pour un acide aminé. Pour cela, ils ont synthétisé in-vitro, un ARNm uniquement composé de nucléotides U (le poly U). Ils ont mélangé des molécules de poly U en présence de tous les acteurs cellulaires de la synthèse protéique ainsi qu’un seul type d’acide aminé. Dans leurs expériences, seul le mélange contenant la phénylalanine comme acide aminé a permis la synthèse d’un polypeptide uniquement constitué d’une séquence de plusieurs phénylanines. Ils ont ainsi démontré que le triplet UUU de l’ARNm code pour l’acide aminé phénylalanine. Quatre ans plus tard, la signification des 63 autres triplets ou codons de nucléotides était élucidée. Elle constitue aujourd’hui ce que l’on nomme le code génétique. (Voir aide 2) 8 Sélectionner les gènes de la ßglobine et αglobine –codant, donner le brin non codant, l’ARN puis effectuer la traduction en utilisant le code génétique: - Que constatez-vous ? plusieurs codons peuvent coder pour le même acide aminé = redondance du code génétique - Comment commence et finit chaque séquence ? chaque séquence d’ARN commence par AUG, codant pour la méthionine (« majuscule »), et finit par un codon qui ne code pour aucun acide aminé = codon « STOP », il en existe 3. (« points ») - Avec les documents suivants et l’aide sur l’hémoglobine, expliquez les différences observées. Hème Hélice Les parties de la protéine repliées en « hélice » ne sont pas situées au même endroit : ces 2 protéines présentent des séquences différentes à leur forme est différente et leur fonction également Cet exemple confirme que les protéines sont caractérisées par leur séquence qui détermine leur forme et leur fonction NB Attention, les protéines α et ß sont codées par 2 gènes différents, situés à 2 locus différents - α : chromosome 16 - ß : chromosome 11 Rappel : le % élevé de similitudes entre ces molécules indique qu’elle partage un gène ancestral commun : ces gènes constituent une famille multigénique. Partie 2 : la localisation précise de la synthèse des protéines dans le cytoplasme. On réalise une expérience de marquage radioactif dans une cellule de pancréas qui produit des protéines (enzymes digestives) en grande quantité et les exporte. ON injecte des acides aminés radioactifs, à 0 minute puis on suit l’évolution de la radioactivité. Radioactivité au niveau du réticulum endoplasmique granulaireàvésicules à exportation par exocytose Agrandissement = voir page suivante En gris : les zones radioactives (= protéines) 1. Analyser les résultats : la radioactivité apparaît au niveau du cytoplasme et plus particulièrement au niveau de réticulum endoplasmique granulaire (REG), puis se déplace vers l’extérieur de la cellule grâce aux vésicules. L’agrandissement montre que la radioactivité représente bien les protéines synthétisées à partir des acides aminés radioactifs au contact de l’ARN avec l’intervention des ribosomes (organites associés au REG) 1.3. Interprétez-les en utilisant l’aide 3, concluez : les acides aminés sont donc bien assemblés dans le cytoplasme et plus particulièrement dans le REG grâce à l’intervention des ribosomes, au contact de l’ARN. Plusieurs ribosomes « travaillent » en même temps sur 1 ARN et le traduisent donc a haute fréquence : plusieurs protéines sont fabriquées à partir d’1 ARN Bilan : de l’ADN aux protéines : Transcription Epissage Traduction Initiation : fixation du ribosome sur « AUG » Elongation : synthèse progressive de la protéine par décodage de l’ARNm, codon par codon selon le code génétique. Terminaison : arrêt de la synthèse par encontre avec un codon « STOP »