"Tests génétiques, mythes et réalités" Docteur Romano La Harpe Institut de médecine légale Unité de médecine forensique ADN Tests génétiques : Application mé médicale mythes et réalités Application mé médicodico-légale Dr R. La Harpe 15 mai 2008 ADN dans la cellule chromosome noyau Molécule d’ADN - Région Région analysée analysée par par PCR PCR double hélice nucléotides 2–5% Génétique médicale 95 – 98 % Médecine légale ADN STR gène ou région codante marqueur génétique Nous n’analysons pas des gènes mais l’ADN qui se trouve entre les gènes, c’est-à-dire de l’ADN non codant. Application en Médecine lé légale et Criminologie Segment d ’ADN …………..tagcatcgatcgacatcggcatcgatcgatcgacaagatcgat cgatactactactactactactactaccgtagcatgcacgtacgatcgatacatgtc cgatgctagcatgccgtacgcatgctatcgccgatatcgcatcggcatcgcgat accgacgggatgctagcagcagcagcagcatgacgatc……………… ………….mvoevnopqfpccoiogjhbcnyeuxbleusincpimnici cuzdovdovdovdovdovdovdovdovzcnushhkjuovcqcxjsthrw qxymuuncheveuxblondszvniocxmnomxncuzcnzcnicncnc ouyncuznhbnvixclaxlaxlaxlaxlaxuhvnvifv………………. Short Tandem Repeats Chromosome 3 1 2 3 Chromosome 3 1 2 3 4 5 Séquence répétitive = AAAT PCR Polimerase Chain Reaction 6 7 Biologie moléculaire forensique La filiation – Recherche en paternité L ’identification – Personnes ( inconnues ou méconnaissables ) – Echantillons – Traces ( sang, sperme, cheveux, mégot de cigarette,, verre, salive, urine, fèces, peau, mucus,…. ) Victime Identification Personnes D 3S1358 V WA FGA A ME L. TH O1 T POX C SF1PO M ère présumée 16 -16 16-17 21 -28 XX 7-9.3 6-11 10 -13 Os 16 -16 16-17 21 -22 XY 7-9.3 6-11 10 -12 D 5S818 D13S317 D 7S820 D8S1179 D 2 1S 11 D 18S 51 M ère présumée 12-13 10-12 8 - 10 14 - 14 29- 30 14-16 Os 11-13 10-12 8 - 11 14 - 16 29- 30 16 - 19 Correspondance pour les 12 marqueurs génétiques analysés d’un allèle en commun entre la mère présumée et les os. Probabilité de = 99.993 % • • • • • • • • Sang Sperme Salive Urine Cheveux Dent Os Tissus Identification Identification Echantillons Traces Matériel biologique Kit STR commercial “Ready-to-use”: il suffit de rajouter l’ADN que l’on cherche à analyser aux réactifs du kit Kit SGM Plus contient les 10 marqueurs choisis pour le système d’information (fichier) national Très haut pouvoir discriminatoire, de l’ordre de 1 dans plusieurs milliards Fichier informatisé ADN Historique de l ’ADN médico-légal Fichier National d’ADN 1985 : découverte de la technique de l ’ empreinte génétique par Alec Jeffreys (GB) 1989 : premières analyses d ’ADN en CH 1995 : création du fichier national en GB ( 4 millions d ’échantillons en 2007 ) 1997 : création du fichier cantonal à GE 1998 : création du fichier national aux USA ( FBI ) 2000 : création du fichier national en CH ( ordonnance ) 2005 : loi ! ( 110.000 échantillons en 2007 ) Juillet 2000 Fichier ADN Comparer trace-suspect Comparer trace-trace Comparer suspect-suspect Ev. permettre une identification Viol Victime affirme avoir été violée par 2 individus – ne sait pas si avec ou sans préservatif Un préservatif a été trouvé sur les lieux Les suspect A et B nient tout contact avec la victime Sperme trouvé dans vagin correspond au suspect A Sperme trouvé dans préservatif correspond au suspect B ADN provenant de l ’extérieur du préservatif correspond à la victime Génome ADN 2,85 milliards de nucléotides Application en 25’000 gènes décryptés Génétique Mé Médicale Maladies monogé monogéniques - - Hypercholesté Hypercholestérolé rolémie - Maladies d’ d’Alzheimer (APOE4) Diabè Diabète de type 2 (PPARG + KCNJ11) Cancer du côlon (KRAS1, KRAS2, APC) Infarctus du myocarde (PSMA6 + LTA4H) Mort subite de l’l’adulte (QT long : KCNQ1, KCNH2) Polyarthrite rhumatoï rhumatoïde (PTPN22) ……. ……. Achondroplasie (nanisme) (nanisme) : 100 % - Mucoviscidose (CFTR) Myopathie de Duchenne Hé mophilie - - - Hypercholesté Hypercholestérolé rolémie familiale - Maladies chromosomiques - Syndrome de Turner (XO) - Syndrome de Klinefelter (XXY) Maladies mitochondriales - Certaines cardiomyopathies - - Trisomie 21 - Trisomie 18 Trisomie 13 - ……. ……. - Maladies Multifactorielles = Plusieurs gènes + Facteurs Environnementaux = Maladies communes Maladies multifactorielles - Choré Chorée de Huntington (pé (pénétrance : 100 %) : 100 % - Maladies Monogéniques (1 mutation) = rares/très rares - Certaines myopathies Certaines épilepsies ……. ……. Cancer du sein - - Dépression 5 – 10 % : héréditaires Mutation des gènes BRCA1 et BRCA2 60 – 80 % : cancer du sein - 15 – 50 % : cancer des ovaires - Parents unipolaires enfants = 3 ∗ plus de risque - Parents bipolaires enfants = 80% - - Ablation des ovaires : risque Ablation des seins : 80 % - Autres critè critères - - 50 % 0,5 % anté antécédents familiaux, âge, degré degré de parenté parenté, âge de survenue dans la famille, ethnie,… ethnie,… - Porteurs d’un gène d’un transporteur de la sérotonine vulné vulnérabilité rabilité accrue aux éléments stressants 1. Stress élément déclenchant de la dépression 2. “Il n’existe pas un gène de la dépression, pression, mais un ensemble de gènes de vulné vulnérabilité rabilité.”