M -05 Chapitre 2 : Les activités cellulaires T.P.1. : La nutrition des cellules Intro : Une cellule étant formée d'eau, des sels minéraux et de la matière organique doit se procurer ces substance pour vivre : C'est la NUTRITION. Comment montrer cette activité ? Les êtres unicellulaires sont facilement cultivables. S'il se nourrissent, ils se divisent et leurs nombre augment. I. Cas des cellules non chlorophylliennes Les levures sont des cellules végétales sans chlorophylles. Protocole : *On place une même quantité de levure dans des milieux différents. Milieu 1 : Eau + sels minéraux. Milieu 2 : Eau + sels minéraux + glucose (sucre = matière organique) *On laisse ces milieux pendant 24H et 48H, les témoins sont préparés au temps zéro. *On étudie la population de levures. Technique de colorimétrie Observation : Un milieu contenant des levures est plus ou moins trouble. Cela dépend du nombre de cellules. Principe : La quantité de lumière qui traverse une culture de cellules diminue quand le nombre de cellules augmente : c'est l'ABSORBANCE. Un colorimètre permet de mesurer cette quantité de lumière. Il est relié à un voltmètre qui chiffre l'absorbance (1 Volt = 1 d'absorbance). Manipulation : On établit d'abord une courbe d'étalonnage. On mesure l'absorbance de cultures de concentration connue : Concentration de levures (g/L) 0 0,3 0,6 1,25 2,5 5 Absorbance 0 0,05 0,08 0,12 0,31 0,56 -1- Culture avec culture de levures L1 L2 L1-L2 = Lumière absorbée = absorbance M -05 Tracer la courbe de l'évolution de l'absorbance en fonction de la concentration de levures. Puis passer au colorimètre chaque milieu de culture, après agitation. Lire l'absorbance. Reporter cette valeur sur le graphe. La courbe permet de trouver la concentration de levures. Remarque : Une concentration de 1g/L correspond à 21 600 levures par µL. Résultats : Milieu 1 Temps Absorbance 0 24 heures 48 heures 0,6 0,6 0,6 Concentration de levures (g/L) Milieu 2 Absorbance 5,7 5,7 5,7 0,6 0,8 1 Concentration de levures (g/L) 5,7 7 9,5 Dans le milieu un, le nombre de levures est resté constant, dans le milieu deux, il a doublé. Conclusion : Les levures ont besoin de glucose pour vivre et se diviser. Elles trouvent ce glucose en l'absorbant dans le milieu extérieur. II. Cas des cellules chlorophylliennes Protocole : *On met des algues unicellulaires dans deux milieux. Milieu 1 : eau + sels minéraux + obscurité Milieu 2 : eau + sels minéraux + lumière *On les laisse pendant une semaine puis on les compte. Résultat : Dans le milieu 1, le nombre d'algues est constant, dans le milieu 2, il a doublé. Conclusion : Les algues se sont nourries en présence de lumière. Pourtant, il n'y a pas de glucose dans l'eau. On éclaire les feuilles d'Elodée puis on fait tremper une feuille dans de l'eau iodée qui est un réactif de l'amidon. Sous le microscope les chloroplastes ont des taches violettes. Ils contiennent de l'amidon. Conclusion : Les algues peuvent fabriquer de l'amidon (matière organique) en présence de lumière. BILAN : Les cellules animales et végétales sans chlorophylles absorbent les matières organiques dans le milieu extérieur. Elles sont HETEROTROPHES. Les autres (cellules chlorophylliennes) fabriquent les matières organiques grâce à la lumière. Elles sont AUTOTROPHES. Ces matières organiques permettent de grandir, travailler… -2-