Les endotoxines bactériennes : pourquoi le SIMS

Workshop Equipex Andromède Institut de Génétique et Microbiologie le 19 Juin 2013
Martine Caroff
« Endotoxines, Structures et Activités »
Institut de Génétique et Microbiologie –Université de Paris Sud XI Orsay France
La spectrométrie de masse, un outil de choix pour l‘analyse structurale
des endotoxines bactériennes

Inner
core
Outer
core
O-specific
chain
Lipid A
Polysaccharide
Lipopolysaccharide
n
Peptidoglycan
Lipoprotein
Periplasm
LPS
Phospholipid
Protein
Structure des LPS, virulence bactérienne et
génétique de la biosynthèse des lipides A
Rôle protecteur pour la bactérie: barrière de perméabilité,
Activités bénéfiques et délétères pour l’homme Trimère XXX AA=1 S=176
Trimère XYZ AA=6 S=1056

L’aventure de la PDMS
IPN, Orsay
25 ans de collaboration
Premiers spectres LPS, 1990 1991

B. pertussis
B. parapertussis
B. bronchiseptica
B. hinzii
B. avium
B. trematum
Tetra- &
penta-acylated
Penta- &
hexa-acylated
O
O
O
O
OO
NH
O
O
HO
O
NH
HO
HO
O
O
O
HO
PHO OH
O
HO
O
O
OPOH
OH
O
C12-2OH
C14OH
C14-2OH
C14OH
C16
C14OH
HO
O
O
O
O
H
OO
NH
O
OO
NH
O
HO
O
O
O
OH
PHO OH
O
O
O
O
POH
OH
O
C14OH C14OH
C14OH
C12OH
C14
C16
O
O
OH
OO
NH
O
O
HO
O
NH
O
HO
O
O
PHO OH
O
O
OH
O
POH
OH
O
O
OH
C14 C14OH
C14OH
C14OH C10OH
HO
O
O
O
OO
NH
O
OO
NH
HO
HO
O
O
PHO OH
O
O
OH
O
POH
OH
O
O
C14OH
C14OH
C10OH
C16
C14
Lipides A des Bordetelles

Variabilité des Lipid A et endotoxicité des LPS dans 3 souches de
Bordetella pertussis, recherche d’un vaccin entier non-toxique
0
100
BP18-323
1503
1531
1333
0
100 GlcN
GlcN
BP338
1559
1494
1333
1720
1881
GlcN
Mass ( m/z )
1300 1500 1700 1900
0
100
BP338 GlcN
-
1559
1333
Structure « Classique »
BP18-323
BP338
HEK-293 transfected
BP338
18-323
GlcN-
NF-κB