Le système immunitaire Le système immunitaire défend l’organisme des corps étrangers (virus, bactéries…). Il est constitué de globules blancs (lymphocytes T, lymphocytes B et phagocytes…) Observation de coupe de peau Coupe de peau contrôle Les macrophages en rouge sont présent dans le derme et les lymphocytes T en vert sont dans l’épiderme Coupe échantillon Epiderme Epiderme Derme Derme Alors que ici les macrophages sont plus nombreux, et ils sont présent dans le derme et dans l’épiderme Pourquoi y a-t-il plus de macrophages ? -Cicatrisation -Défense contre les bactéries -Plus de sang qui arrive - Multiplications des cellules - Regroupement de macrophages Problématique : *Les macrophages synthétisent-ils et sécrètentils du NO (oxyde nitrique)? *Quel est le rôle du NO : Peut-être il détruit les bactéries? Schéma de l’hypothèse Observation au microscope de macrophages et de cellules intestinales Macrophage IEC-6 Dosage du NO dans le milieu nutritif des macrophages et IEC-6 contenant du LPS à différentes doses On récupère le milieu nutritif des cellules Insertion du réactif Mesure de l’absorbance au spectrophotomètre NO (µM) Quantité de NO sécrété dans les milieux nutritif 0.025 Absorbance 0.02 0.015 Macrophages IEC-6 0.01 0.005 0 LPS 0 LPS 1 ng/ml LPS 100 ng/ml LPS 1000 ng/ml Estimation de concentration de NO dans les milieux nutritifs Concentration de NO (µM) 7 0.4 y = 0.0037x - 0.0009 Absorbance 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 -0.05 0 20 40 60 80 100 Concentration de NO (µM) 120 6 5 4 Macrophage 3 IEC-6 2 1 0 LPS 0 LPS 1 ng/ml LPS 100 ng/ml LPS 1000 ng/ml Test sur les bactéries pour voir si le NO les détruit NO en poudre L’antibiotique Estimation de la quantité des bactéries Bactéries MTT Résultat de cette expérience Graphique représentant le nombre de bactéries 0.6 0.5 Absorbance 0.4 0.3 0.2 0.1 0 NO Conclusion : *Les macrophages synthétisent-ils et sécrètent-ils du NO? En effet, les macrophages synthétisent et sécrètent du NO car dans leurs milieux nutritifs nous avons retrouvé du NO grâce au colorant qui réagit a la présence de NO *Quel est le rôle du NO? Le rôle du NO est de détruire les bactéries, on peut le confirmer à l’aide des test précédents. Mais le NO peut détruire les bactéries qu’à partir d’une certaine quantité de celui-ci.