Cytologie et détection du VPH - Association des Cytologistes du

Cytologie et détection du VPH:
Passé, Présent et Futur
Martin Daoust
Gestionnaire de comptes, Est du Canada
AGENDA
• Cancer du col de l’utérus
• VPH et son rôle dans le
développement du cancer
• Évolution du dépistage
• Biologie moléculaire du VPH
• Tests moléculaires
Le cancer du col de l’utérus
• Le cancer du col de l’utérus est responsable d’environ 1.1% de tous
les décès attribuables au cancer chez les femmes
• Taux d’incidence: 8.1/100 000 (US); ≈ 14/100 000 (Canada)
• Taux de mortalité: 2.4/100 000 (US); 2/100 000 (Canada)
• Entre 1972 et 2004, le taux d’incidence a diminué de 62% et le taux de
mortalité de 68%
• 67% touchent des femmes âgées de 30 à 59 ans
Au Québec, en 2007…
Facteurs de risques
• Le tabagisme
• Un système immunitaire affaibli
• L'utilisation prolongée de la pilule anticonceptionnelle
• Le fait d'avoir de nombreux enfants
• Etc…
•Virus du papillome humain (VPH) (si persistant)
•
Premier article publié en
1941
•
Dépistage débute dans les
années1950
•
Le dépistage est
responsable de la réduction
de >80% de l’incidence du
cancer cervical et de la
mortalité en Amérique du
Nord depuis 19501
1
Herrero R. Monogr NCI 1996; 21:1-6
Dr. George N. Papanicolaou 1883-1962
Un évènement positif du cancer du col:
Les cellules HeLa
Henrietta Lacks
Percées majeures dans la détection du
cancer du col de l’utérus
1941
Frottis Pap
1996
Test ThinPrep®
1999
2003
Système
d’imagerie
automatique
2009
Test Cervista® VPH
HR et
Cervista® VPH 16/18
Génotypage
VPH
2011
Aptima VPH Primaire?
Test
SurePath®
1940s
1990s
1999
Test Hybrid Capture® 2
1970s
Recherches par
Harald zur
Hausen montrent
que le VPH est
lié au cancer du
col de l’utérus1
1. zur Hausen H. Cancer Res. 1976;36:794.
2000s
2006
Vaccin
2009
Vaccin
Gardasil®
(6, 11, 16 et 18) Cervarix®
(16 et 18)
2011
Roche VPH
Le VPH et le cancer du col de l’utérus
Le VPH est une des causes du cancer du
col de l’utérus
• Plus de 150 souches identifiées
• 30−40 anogénital
– 15−20 types oncogéniques,
incluant 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45,
51, 52, 58
• VPH 16/18/45 responsables de
75% des cas de carcinome
cellulaire squameux (exocol) et
94% des cas d’adénocarcinome
(endocol)
– Types non oncogéniques inclus:
6, 11, 40, 42, 43, 44, 54
• VPH 6 et 11 responsables de
90% des verrues génitales
externes
VPH: virus à ADN double-brin
Le VPH cause…
Cancer du col de l’utérus (100%)
Cancer de l’anus (95%)
Cancer du vagin (65%)
Cancer de la vulve (50%)
Cancer du pénis (35%)
Cancer de l’oropharynx (60%)
Cancer de la tête et du cou
Cancer des ovaires (?)
Détection du cancer du col de l’utérus
• Cytologie conventionnelle (Québec, Canada sauf Alberta,
Ontario part.)
• Cytologie en milieu liquide (Alberta, Ontario part., US)
• Tests moléculaires du VPH (US, Canada?)
• Combinaison de la cytologie et des tests moléculaires
(US)
Évolution du dépistage et algorithme
Progression de l’infection du VPH vers le
cancer cervical
Infection VPH
HR
< 12 mois
Éradication du
VPH
Infection
persistante
CIN 1/2
1-5 ans
CIN 2/3
Progression vers le
cancer du col peut
prendre des
décennies
HR = Haut risque
CIN = Cervical intraepithelial neoplasia
Cancer
CDC. Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases. 11th ed. 2009.
Début du dépistage
(cytologie seul.)
< 2000
2007
Toutes les
femmes
sexuellement
actives de plus de
18 ans
3 ans après les
premières
relations sexuelles
ou 21 ans
Après 3 tests
négatifs,
fréquence à la
discrétion du
médecin
21-30 ans
30 ans +
CML aux 2 ans
Tous les 2-3 ans
après 3 tests
cytologiques
normaux
21-30 ans
2009
3 ans après les
premières
relations sexuelles
ou 21 ans
CML aux 2 ans
21-30 ans
Aujourd’hui
21 ans
CML aux 3 ans
Tous les 2-3 ans
après 3 tests
cytologiques
normaux
OU aux 3 ans si
cyto normale et
VPH HR négatif
Cyto et VPH (cotesting) tous les
5 ans***
OU cytologie
seulement tous
les 3 ans
*** Devrait être privilégié
RÉSULTAT DE CYTOLOGIE
ABSENCE
PRÉSENCE
DE LÉSION INTRAÉPITHÉLIALE
DE CELLULES ÉPITHÉLIALES ANORMALES
ASC-US
≥ 30 ANS
< 30 ANS
TEST DÉTECTION
VPH
CYTOLOGIE
À 6 ET 12 MOIS
-
+
CYTOLOGIE
DANS 12 MOIS
+
CYTOLOGIE
DANS 2-3 ANS
AUTRES TYPES DE LÉSIONS
ABSENCE
DE LÉSION
CYTOLOGIE
DANS 2-3 ANS
ORIENTER
EN COLPOSCOPIE
≥ 1 RÉSULTAT CELLULES
ÉPITHÉLIALES ANORMALES
(INCLUANT ASC-US)
La génétique du virus VPH et sa
détection moléculaire
Cellules et ADN
• Cellule
– La cellule est l'unité de structure,
fonctionnelle et reproductrice constituant
toute partie d'un être vivant.
• Noyau
– Organite enveloppé présent dans la
majorité des cellules eucaryotes
– Il contient l’essentiel du matériel
génétique de la cellule. Ce matériel est
organisé en molécules d’ADN
• L’acide désoxyribonucléique (ADN)
– Renferme l’ensemble des informations
nécessaires au développement et au
fonctionnement d’un organisme
La biologie du virus VPH
transcription
Particules
virales du VPH
Génome du virus
(ADN)
L’ADN indique la présence du VPH
traduction
Expression des
ARNm E6/E7 par le
virus actif
Les oncoprotéines
E6/E7 induisent la
carcinogenèse
L’expression de l’ARNm E6/E7 indique
un VPH actif
Acides nucléiques et évolution vers le cancer
Épithélium
cervical
normal
Cellules
cervicales
infectées
par le VPH
CIN1 ou LSIL
(lésions
intraépithéliales
bas-grade)
CIN2 ou HSIL
(lésions
intraépithéliales
haut-grade)
CIN3+ ou HSIL
(lésions
intraépithéliales
haut-grade)
Niveau d’ARNm E6/E7
Niveau d’ADN VPH
Carcinome cervical
Les options possibles pour la
détection moléculaire du VPH
1. AMPLIFICATION CIBLE: Amplification PCR
(Polymerase Chain Reaction) (Roche, etc.),
l’amplification médiée par la transcription
(i.e. Aptima)
Elles amplifient un ou plusieurs génotypes
spécifiques du VPH en utilisant des
séquences d’ADN ou d’ARN spécifiques
2. AMPLIFICATION DU SIGNAL: utilisent une
méthode spécifique de détection qui
augmente directement le signal en
proportion du nombre de cibles dans la
réaction (i.e. Cervista, Hybrid Capture)
Avantages de la détection du VPH
• Les tests VPH sont plus sensibles que la cytologie1
• Les tests VPH ont une valeur prédictive négative plus
élevée
• Pour les femmes de plus de 30 ans, un test Pap négatif
et un résultat VPH négatif permet d’augmenter l’interval
de dépistage à 5 ans2
“L’objectif du dépistage du cancer du col de l’utérus est
d’identifier les femmes qui ont la maladie parmi celles
qui ne l’ont pas. Quand la sensibilité augmente, il en va
de même de la probabilité que tous les cas soient
réellement positifs”
1. Bulkmans NWJ, Berkhof J, Rozendaal L, et al. Lancet 2007; 370:1764-72.
2. J Clin Oncol May 2011 vol. 29 no. 15_suppl 1508
Les tests moléculaires VPH augmentent
la sensibilité1
Méthode de détection
Détection des lésions haut grade
prouvée histologiquement
Sensibilité %1
(95% IC)
Spécificité %1
(95% IC)
Cytologie conventionelle
68.1
(55.4-79.2)
95.3
(94.5-96.2)
Cytologie en milieu liquidea
87.8
(80.3-93.3)
93.1
(92.4-93.8)
Tests d’ADN ou d’ARN VPH
moléculairesb
100
(96.4-100)
85.6
(84.7-86.5)
Sensitivité = taux de vrais positifs
Spécificité = taux de vrais négatifs
a. Cytologie en milieu liquide ThinPrep
b. VPH HR réalisé avec la trousse HC2
1. Clavel C, et al. Br J Cancer. 2001;89:1616-1623.
Cytologie vs test VPH
Cyto conventionnelle
Cytologie liquide
VPH
Faible coût (?)
Échantillons inadéquats
Rapide
Faux-négatifs
Clarté de lecture
Très sensible (≈ 100%)
Surdépistage/nombre
de femmes en
colposcopie
Niveau d’anxiété des
femmes (dim. faux pos)
Possibilité de diminuer la
fréquence des tests
Délais ++
Lecture automatisée
Possibilité de savoir quel
génotype
Utilisation des cellules
pour d’autres tests
Délais
Conclusions
Quel est le futur du dépistage du
cancer du col de l’utérus?
• Cytologie primaire avec:
– Co-testing avec VPH moléculaire ou triage?
– Triage avec d’autres biomarqueurs (p16, Ki67, etc)?
• VPH primaire avec:
– Triage avec cytologie?
– Triage avec VPH génotypage?
– Triage avec d’autres biomarqueurs?
– Re-test à des intervals spécifiques?
Questions?