offre de thèse_UMR1069_Tours_2017

Offre de thèse:
Rôle du gène SCN4B et de son produit d’expression, la protéine Navβ4, dans prévention
de l’invasion métastatique,
Induction de son expression et inhibition de la progression cancéreuse par les acides
gras polyinsaturés n-3
La forte mortalité associée aux carcinomes dépend essentiellement du développement
des métastases, pour lesquelles il n’existe à ce jour aucun marqueur ni traitement spécifique.
Récemment, nous avons identifié le gène SCN4B, et son produit d’expression la protéine
Navβ4, initialement caractérisée de protéine auxiliaire régulatrice de canaux sodiques
dépendants du voltage (NaV), comme ayant un rôle déterminant dans la progression du cancer
du sein, de manière indépendante de la présence de la sous-unité NaV (Bon et al., Nat
Commun 2016). Le gène SCN4B est fortement exprimé dans les tissus épithéliaux mammaires
sains. En revanche son expression est réduite dans les tissus cancéreux, et particulièrement
dans les tumeurs invasives, pour être presque absente dans les tumeurs de haut grade et dans
les métastases. Au niveau cellulaire, la perte d’expression de SCN4B dans les cellules
cancéreuses stimule leur invasivité en augmentant l’activité de la GTPase RhoA et en
induisant l’acquisition d’un phénotype cancéreux très agressif de type hybride
mésenchymateux-amiboïde. La surexpression expérimentale de SCN4B dans les cellules
cancéreuses réduit leur invasivité et le développement de métastases. Nous proposons que le
gène SCN4B pourrait jouer le rôle de suppresseur de métastases. Ainsi, le maintien ou
l’induction de son expression dans les cellules cancéreuses pourrait représenter une stratégie
intéressante pour prévenir le développement métastatique. Les acides gras polyinsaturés à
longue chaîne de la série n-3 (AGPI n-3), ont été identifiés parmi les facteurs de
l’alimentation comme présentant des effets anti-cancéreux (Bougnoux et al., Prog. Lipid. Res.
2010). Nos données préliminaires indiquent que l’expression du gène SCN4B est fortement
induite par des supplémentations en AGPI n-3, ce qui se traduit en une inhibition de
l’invasivité cancéreuse (Bon et al., données préliminaires). Les objectifs de ce projet de thèse
sont :
i)
de détailler les mécanismes impliqués dans la régulation de l’invasivité
cancéreuse par le gène SCN4B, à la fois in vitro et in vivo,
ii)
de détailler la nature des régulations transcriptionnelles de SCN4B par les
acides gras, et le niveau d’expression de SCN4B dans les tumeurs en fonction
de la composition en acides gras du tissu adipeux péritumoral, et enfin
iii)
de mettre en évidence le potentiel anti-invasif et anti-métastatique, d’une
supplémentation en AGPI n-3 via la modulation de l’expression du gène
SCN4B.
Principales techniques associées au projet de thèse :
Culture cellulaire (dont les techniques d’évaluation de la migration et de l’invasivité
cellulaire)
Biologie moléculaire et cellulaire (extraction ARNm, RT-qPCR, analyse d’activité
promoteur en gène rapporteur, extraction de protéines, western blotting, coimmunoprécipitation, pull-down)
Electrophysiologie cellulaire (patch clamp)
Analyse des acides gras issus des triglycérides (tissus adipeux) et phospholipides
(tissus tumoraux et non tumoraux) par chromatographie sur couche mince et chromatographie
gazeuse
Microscopie d’épifluorescence (immuno-cytofluorescence, microscopie time-lapse)
Marquages immunohistochimiques
Expérimentation animale
5 Publications représentatives :
[1] BRISSON L., GILLET L., CALAGHAN S., BESSON P., LE GUENNEC J.-Y., ROGER S.#* &
GORE J.* NaV1.5 enhances breast cancer cell invasiveness by increasing NHE1-dependent H+
efflux in caveolae. Oncogene, 2011 Apr 28;30(17):2070-6.
[2] BRISSON L., DRIFFORT V., BENOIST L., POET M., COUNILLON L., ANTELMI E., RUBINO R.,
BESSON P., LABBAL F., CHEVALIER S., RESHKIN S.J., GORE J. & ROGER S#. NaV1.5
sodium channels allosterically regulate the NHE-1 exchanger and promote breast cancer cell
invadopodial activity. J. Cell Science. 2013 Nov 1;126(Pt 21):4835-42.
[3] DRIFFORT V., GILLET L., BON E., MARIONNEAU-LAMBOT S., OULLIER T., JOULIN V.,
COLLIN C., PAGÈS J.-C., JOURDAN M.-L., CHEVALIER S., BOUGNOUX P., LE GUENNEC J.Y., BESSON P. & ROGER S.#. Ranolazine inhibits NaV1.5-mediated breast cancer cell
invasiveness and lung colonization. Molecular Cancer 2014, 13:264
[4] WANNOUS R., BON E., GILLET L., CHAMOUTON J., WEBER G., BRISSON L., GORÉ J.,
BOUGNOUX P., BESSON P., ROGER S., CHEVALIER S. Suppression of PPARβ, and DHA
treatment, inhibit NaV1.5 and NHE-1 pro-invasive activities. Pflugers Arch - Eur J Physiol
(2015) 467:1249–1259
[5] BON E., DRIFFORT V., GRADEK F., MARTINEZ-CACERES C., ANCHELIN M., PELEGRIN P.,
CAYUELA M.-L., MARIONNEAU-LAMBOT S., OULLIER T., GUIBON R. , FROMONT G.,
GUTIERREZ-PAJARES J. L., DOMINGO I., PIVER E., MOREAU A., BURLAUD-GAILLARD J.,
FRANK P.G., CHEVALIER S., BESSON P. & ROGER S.# SCN4B acts as a metastasissuppressor gene preventing hyperactivation of cell migration in breast cancer. Nature
Communications. 2016; 7: 13648.
Contact:
Unité Inserm UMR1069 Nutrition, Croissance et Cancer (www.n2c.univ-tours.fr)
Université François-Rabelais de Tours
Nom de l’encadrant responsable de la thèse : Sébastien ROGER
Email : [email protected]
Téléphone : 02 47 36 61 30
Début de la thèse : 01er Octobre 2017
Financement : MRT
Les candidatures sont acceptées jusqu’au 10 Avril 2017.