CORRECTION BAC BLANC BIOCHIMIE 1. Etude structurale de la tributyrine 1.1- formule générale d’un triglycéride : CH2 – O – CO – R1 | CH – O – CO – R2 | CH2 – O – CO – R3 Un triglycéride homogène est un ester de glycérol et de 3 acides gras identiques 1.2.1- formule brute des acides gras saturés : CnH2nO2 1.2.2- la formule développée de l’acide butyrique et numérotation des C : N° des carbones : 4 3 2 1 H3C – CH2 – CH2 – COOH Apolaire Polaire 1.2.3- molécule amphiphile 1.3- réaction de saponification de la tributyrine par l’hydroxyde de potassium : CH2 – O – CO – (CH2)2 – CH3 | CH – O – CO – (CH2)2 – CH3 | CH2 – O – CO – (CH2)2 – CH3 Tributyrine CH2 – OH | CH2 – OH | CH2 – OH Glycérol + + 3 x KOH hydroxyde de potassium 3 x H3C – (CH2)2 – COO - ; K + savon ou ion carboxylate 2. Enzymologie 2.1- La vitesse initiale vi d’une réaction correspond à la vitesse au début de la réaction pendant la phase stationnaire initiale. On la détermine graphiquement en calculant la pente de la droite de la période stationnaire initiale sur la courbe [P] = f(t). 2.2.1- L’équation de Michaelis-Menten est : vi = (Vmax . [S]) / (Km + [S]) 2.2.2- Cette courbe a une allure hyperbolique. On remarque que plus la [S] augmente plus la vi augmente jusqu’à une certaine [S] où vi n’augmente plus (on obtient un plateau) ce qui montre que la catalyse enzymatique est un phénomène saturable. 2.2.3- significations des paramètres de la cinétique : Vmax : vitesse initiale maximale : c’est la vitesse de réaction lorsque toutes les enzymes sont saturés par un S c’est-à-dire lorsqu’elles sont toutes sous forme de complexe ES. Placement de Vmax et valeur : Vmax = 0,24 mol/min Placement de Km et valeur : Km = 0,04 mol/L 1 2.2.4- On pourrait tracer la courbe de Lineweaver-Burk (ou courbe des doubles-inverses) : 1/vi = f(1/[S]) qui correspond à une droite et qui permet de déterminer avec une plus grande précision les valeurs des paramètres de la cinétiques. 2.3.1- acides aminés 2.3.2- site actif (ou site catalytique) 2.3.3- hydrolase 3. Métabolisme de l’acide butyrique 3.1.1- cytoplasme (ou membrane externe de la mitochondrie côté cytoplasmique) 3.2.2- réaction de l’activation de l’acide butyrique : Acide butyrique + ATP + CoA-SH butyryl-coA + AMP + PPi Nom de l’enzyme : acyl-coA synthétase 3.2.1E1 : acyl-coA dehydrogenase E2 : dehydroacyl-coA hydratase E3 : β-hydroxyacyl-coA deshydrogenase E4 : β-cetothiolase Dans l’ordre, les coenzymes et substrats : - FAD et FADH2 - déhydroacyl-coA ou déhydrobutyryl-coA - H2O - β-hydroxyacyl-coA ou β-hydroxybutyryl-coA - NAD+ et NADH,H+ - β-cetoacyl-coA ou β-cetobutyryl-coA - acétyl-coA - acétyl-coA 3.2.2- Bilan moléculaire de la dégradation de l’acide butyrique en acétyl-coA : Activation : Acide butyrique + ATP + CoA-SH butyryl-coA + AMP + PPi β-oxydation : butyryl-coA + FAD + H2O + NAD+ + coA-SH 2 acétyl-coA + FADH2 + NADH,H+ BILAN : Acide butyrique + ATP + 2 CoA-SH + FAD + H2O + NAD+ 2 acétyl-coA + FADH2 + NADH,H+ + AMP + PPi 3.3- Bilan énergétique de la dégradation complète de l’acide butyrique : 2 acétyl-coA => 2 x 12 ATP = 24 ATP 1 FADH2 => 1 x 2 ATP = 2 ATP 1 NADH,H+ => 1 x 3 ATP = 3 ATP TOTAL 29 ATP – 2 ATP (pour l’activation) Soit 27 ATP formés 2