FABRICATION DU MAÏS TRANSGENIQUE RESISTANT A LA PYRALE 1- Isolement du gène de résistance à la pyrale(gène Bt) extrait du bacillus thuringiensis 2- Insertion du gène Bt dans un plasmide vecteur avec un gène de résistance à un antibiotique et un gène de résistance à un herbicide 4- Sélection des bactéries hôtes modifiées par un milieu contenant l’antibiotique (résistance des seules bactéries ayant incorporé le plasmide) 3-Transfert plasmide contenant les 3 gènes dans bactéries hôtes agrobactérium TECHNIQUE 1 5 -Transfert du plasmide des bactéries hôtes à des agrobactérium (bactérie parasite des cellules végétales) TECHNIQUE 2 6 - Culture d’agrobactérium transformés en présence de tissus végétaux Transfert du gène des agrobactérium aux cellules végétales agrobactérium canon à ADN cellule végétale Tissu végétal 6 bis- Transfert du gène par canon à ADN (plasmides vecteurs) Développement de cals 7-Sélection des cals transgéniques avec un herbicide (résistance des seules cellules ayant incorporé le plasmide –et donc le gène de résistance à l’herbicide-) 8- Régénération d’un plant entier dont toutes les cellules sont transgéniques, à partir des cellules souches (cals + hormones)