Etude du métabolisme azoté chez quelques acacias tropicaux

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- Y UNIVERSITE CIiEIKH ANTA’ DIOP DAKAR
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DIPLOl!vlE D’ETUDES APPROFONDIES
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Mémoire présenté à la
Faculté des Sciences et Techniques
Département de Biologie Végétale
Par _..
Diégane 7: DIOUF
Maître ès Sciences
Sujet
13
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ETUDE DU META5OEICSl!dlE AZOTE CHEZ ’
L QUEtiQUES ACACIAS. TtiOPICAUX FIXATEURS :
I D’AZOTE
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Soutenu le 25 Janvier 1995
devant la Commission d’Examen composée de :
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Pr$ident : M. Amadou Tidiane FA
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_ Membres : Mme Yaye kène DIA
Professeur UCAD
Maître-Assistant UCAD
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M. Ibrahima NDOYE
Assistant UCAD
Mme Claudine NEF-CAMPA
Chargée de Recherche ORSTOM
DREYFUS
Directeur de Recherche ORSTOM
% Fonds Documentaire ORSTOM

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Mr le professeur Amadou T. BA, Chef du département de Biologie
Végétale de l’Université Cheikh Anta Diop, a bien voulu juger ce travail et en
présider le jury. Je lui suis reconnaissant de cet honneur.
La réalisation de ce travail n’a 6% possible que grâce à l’environnement
scientifique et moral dont j’ai benéficié au Laboratoire de Microbiologie des Sols
de L’ORSTOM-ISRA à Dakar, sous la direction de Mr Bernard DREYFUS. Je le
remercie vivement de m’avoir accueilli au sein de son laboratoire. Qu’il trouve
ici le témoignage de ma très haute considération et ma grande reconnaissance
pour son humilité.
J’exprime ma profonde gratitude à Mme Claudine NEF-CAMPA pour
m’avoir proposé ce sujet si passionnant. Elle s’est particulièrement intéressée à
ce travail qu’elle n’a cessé de diriger et d’orienter. Ses encouragements et sa
.dis-ponibilite à, mon égard m’ont été d’un grand intérêt, C’est un immense
honneur pour moi d’avoir travaillé sous sa direction.
Mr Ibrahima NDOYE est à l’origine de mon séjour au Laboratoire de
Microbiologie des Sols. Ses avis éclairés m’ont été précieux. Je lui suis gré d’avoir
accepté de juger ce travail. ,
Mme Yaye Kène DIA m’a offert son entière disponibilité et m’a fait
partager ses remarquables qualités d’enseignant, tout au long de mon séjour dans
son laboratoire. Je tiens à lui exprimer ici touté ma gratitude et souhaite que ce
stage soit le début d’une fructueuse collaboration.
Mes remerciements s’adressent aussi à l’équipe chaleureuse et dynamique
des chercheurs et techniciens du Laboratoire de Microbiologie des Sols de
l’ORSTOM-ISRA pour son aide experte en tous genres.
Mes sincères remerciements vont également à Anna Marthe Konté.
Je dois beaucoup à i mes compagnons stagiaires à l’ORSTOM-ISRA,
Abdoulaye, Adama, Bouchaïb, Clémence, Etike, Flore, Gilbert, Gilles, Nathalie,
Ndeye Fatou, Nicolas, Rama, Salif, Samba. Je voudrais leur témoigner ici ma
sympathie.
J’ai une pensée particulière pour Paul Moundor Madioune et Jean Baptiste
Ndour qui m’ont témoigné amitié et solidarité. ’
J’adresse mes vifs remerciements à tous ceux qui m’ont apporté leur
soutien et que je ne puis citer individuellement.
Je ne saurais oublier tous mes amis du Yedum Club et de la JUNG. Que ce
travail leur serve de modeste exemple.
Fonds Documentaire ORSTOM

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A mes parents
A mes frères et soeurs
A Rémy et May
A tous mes amis
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1
1) - Assimilation de l’azote par les végétaux supérieurs.. ................ .2
1) La formation de l’ammonium ........................ .
.......... 2
2) Incorporation de l’ammonium et transfert des
groupements azotés dans des molécules organiques. ..... .3
II) - Transport et stockage de l’azote chez les végétaux supérieurs. 4
III) - Les Légumineuses . . . . . . . . . ..*....................................................... 4
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./.. : .i.. I . 1 a,- ,Y - Les Légumineuses à amides . . . . . ;.;... . . . . . . .;.. 5
- Les Légumineuses à uréides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
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. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..~.................
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1) - Matériel végétal. . . ..*............................................................. 8
1) Méthodes de culture . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
a) Aseptisation et germination des graines......... 8
/*~1,>> jjl ..: “,., b) Culture en pépinière ..b............C....................... 8
*T 5 (.; ;-:. \
,T”, II..:.~ “.L,“.>..>.
SC) Culture aseptique en tube Gibson. . . . . . . . . . . . . . . . . !. 8
d) Culture hydroponique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
II) - Méthodes de culture des souches bactériennes. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
III) - Méthodes d’inoculation .......................................................... 9
1) Inoculation. en pépinière ........................................... 9
2) Inoculation en tubes Gibson .................................... 10
IV) - Techniques de dosage ............................................................. 10
A) - Méthodes analytiques ................................................... 10
1) Technique d’extraction ............................................ 10
2) Dosage des acides aminés totaux ............................ 10
3) Dosage des amides ................................................. 11
4) Dosage des uréides ................................................. 11
5) Dosage des nitrates ................................................ 11
6) Dosage de l’ammonium
..........................................
13
7) Dosage de l’azote total. ......................................... 13
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1) - Composés azotés présents dans les organes de différents
Acacias. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
19
1) - Teneur en azote total . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
2) - Répartition de l’azote dans quelques composés
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/-: ,. azotés solubles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..~..“......~.......... 20 <’ :
II) - Evolution de la teneur en métabolites azotés chezAcacia
j- albida. . . . . . . ..*......................................................... 21 (
1) - Chez de jeunes plants cultivés en pépinière...........21
.-
1 2) - Chez des plants adultes au champ. ..-................. . ...22
III) - Influence de la source azotée sur le métabolisme de l’azote....23
1 1) - Détermination de la source azotée. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
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ci- ,, , 2) - Comparaison des croissances en culture
,.*, . ..-. ~ . . . . . . hydroponique ,.
. . . . . . . . . . . . . ..5~...................................... 24
i 3) - Teneur en azote <% N) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
4) - Teneurs en métabolites azotés . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
, IV) - Dosagein vitro des activités nitrate réductase et glutamine
synthétase. *................................................................ 26
1) - Dosage des activités nitrate réductase . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26
2) - Dosage des activités glutamine synthétase...........27
.. c@rïùenmsH@ow G?o lRwqpxQifv(e8 ......................................................
29
.. llimniQgrapbB@ ................................................................. 32
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II