Enzymes recopiant les acides nucléiques

Enzymes recopiant les acides nucléiques
Enzymes recopiant l’ADN ou l’ARN
DNA polymérase DNA dépendante
DNA polymérase RNA dépendante
RNA polymérase DNA dépendante
RNA polymérase RNA dépendante
Ces enzymes synthétisent le nouveau brin dans le sens 5’ -> 3’
La synthèse se fait de manière complémentaire et antiparallèle.
L’enzyme fonctionne en présence de nucléosides triphosphates
(XTP) ou de désoxynucléosides (dXTP)
Dr. Jacques PAOLETTI
Les DNA polymérases
Propriétés
DNA polymérase DNA dépendante
DNA polymérase I : Activités exonucléasiques
Fragment de Klenow
Dr. Jacques PAOLETTI
LES ADN POLYMÉRASES
- Un brin d'ADN matrice
- Une amorce oligonucléotidique
- Une synthèse du brin nouveau 5'è 3'
3'(OH)
5'
5'
3'
Dr. Jacques PAOLETTI
DNA polymérase DNA dépendante
Ces enzymes recopient l’ADN en ADN.
Elles nécessitent une amorce d’acide nucléique.
La réaction catalysée est:
(dXMP)n + dXTP à (dNMP)n+1 + PPi
Amorce avec une extrémité 3’-OH libre
La nouvelle chaîne est synthétisée dans
le sens 5’ à 3’
Règle de complémentarité et de polarité inverse
Dr. Jacques PAOLETTI
La DNA polymérase 1
Dr. Jacques PAOLETTI
Fragment de KLENOW
Le fragment de
Klenow est préparé à partir de la DNA polymérse 1 d’E.coli.
Ce fragment ne possède plus d’activité exonucléasique 5’à 3’ mais garde
l’activité polymérasique et l’activité exonucléasique 3’ à 5’.
Cette enzyme est utilisée au laboratoire car elle permet de contrôler si la base
qui vient d’être ajoutée obéit à la règle de complémentarité.
(fonction d’édition)
Dr. Jacques PAOLETTI
LES ARN POLYMÉRASES
- Synthèse d'ARN sans amorce préalable.
- Présence de nucléotides : NTPs et d'ions
magnésium (Mg2+ ).
Dr. Jacques PAOLETTI
- Une synthèse du brin nouveau dans le
sens 5'è 3'.
- Absence de fonction d'édition.
- Nécessité de reconnaître le promoteur
spécifique correspondant.
Dr. Jacques PAOLETTI
Dr. Jacques PAOLETTI