- enseignement Catholique

HGT- SCG
Biologie
UAA3
AUTEUR : Pascale Papleux
Fiche d’expérience 3 Bis
Cette expérience peut être réalisée par les élèves moyennant le respect des mesures préconisées
dans l’analyse de risques. Les points 2 à 5 de cette fiche seront alors mis à leur disposition.
Coloration des noyaux et des chromosomes avec le carmin
acétique
1. Description générale
Le noyau est visible dans la plupart des cellules. Il contient les chromosomes qui ont alors l’aspect de
filaments très enchevêtrés constituant la chromatine.
Cependant, lorsqu’une cellule entre en division au cours d’un phénomène appelé mitose, le noyau
disparait et les chromosomes se condensent pour prendre la forme de petits bâtonnets.
Pour observer les noyaux de cellules ainsi que les chromosomes au cours de mitoses, on utilise aussi
le carmin acétique.
2. Objectifs d’apprentissage
Identifier différentes étapes du cycle cellulaire. L’élève apprend à reconnaitre dans un tissu une cellule
en interphase et une cellule en cours de division (ou en mitose). De plus, l’observation de différentes
cellules en mitose permettra d’identifier quelques moments importants de la division : la prophase, la
métaphase, l’anaphase et la télophase.
3. Matériel et produits
- Une lame porte-objet
- Une lame couvre-objet
- Un oignon mis en germination (ou un bulbe de
jacinthe mis en germination)
- Du carmin acétique
- Une plaque électrique
- Une capsule de porcelaine
- Une pince en bois
- Des gants résistant à la chaleur
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4. Santé, sécurité
La réalisation d’expériences suppose le respect d’un certain nombre de règles permettant à chacun,
élèves et professeur, de vivre ces séances de laboratoire dans les meilleures conditions de sécurité.
Pour chaque local où se déroulent de telles expériences, existe un règlement de laboratoire,
approuvé par le Conseiller en Prévention. Il sera signé par le chef d’établissement, le professeur,
l’élève et ses parents/responsables.
Chaque élève a une bonne connaissance de ce document.
Analyse de risques
Phases
Points-clés
Sources de danger
Nature du risque
Avant
(Professeur)
Organisation de la
classe
Chauffage du carmin
acétique
Les déplacements des élèves
Lors du chauffage du carmin
acétique, dégagement de
vapeurs corrosives.
Pendant
(Professeur et
élèves)
La préparation
microscopique se
brise suite à une
manipulation
Risque de coupure
Nettoyage et
rangement des lames
Nettoyage du matériel et des
mains de manière hygiénique
Après
(Professeur et
élèves)
Afin de limiter les déplacements,
installer des postes de travail avec tout
le matériel nécessaire pour le groupe.
La manipulation se déroulera sous
hotte.
Les lames brisées au cours de la
manipulation doivent être placées, par
le professeur, dans un contenant prévu
pour la récupération du verre cassé
Les élèves appellent le professeur qui
se charge lui-même de ramasser les
débris.
Les lamelles couvre-objet peuvent être
jetées à la poubelle, tandis que les
lames porte-objet seront nettoyées
minutieusement avec du savon
désinfectant.
Professeur et élèves se lavent les
mains en fin de séance.
Nettoyage des mains
Elimination du carmin
acétique
Mesures de prévention
préconisées
Carmin acétique est un produit
corrosif
Vider le carmin dans un récipient
dédié. Le professeur se chargera de
son élimination.
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5. Mode opératoire
a) Mettre de petits oignons en germination
4 à 5 jours avant la séance (voir photo cidessus).
b) Couper les racines à 1 cm de la pointe
lorsqu’elles ont atteint la longueur de 1,5
cm.
c) Mettre ces pointes de racine (apex)
dans une capsule de porcelaine.
d) Rajouter 3 à 4 ml de carmin acétique.
e) Placer sous une hotte aspirante.
f)
Faire bouillir le contenu de la capsule de porcelaine sur une plaque chauffante pendant
quelques minutes.
g) Retirer la capsule de la plaque chauffante à l’aide
d’une pince en bois.
h) Réaliser le montage d’une pointe de racine entre lame
et lamelle, en utilisant comme liquide une goutte de
carmin acétique.
i)
Presser la lamelle couvre-objet pour écraser la
préparation afin de disperser les cellules.
j)
Observer d'abord à faible grossissement, sélectionner
une cellule en division puis passer au grossissement
x 400 pour observer les noyaux et les figures de
mitose.
Effectuer les observations suivantes :

À faible grossissement, observer les cellules et repérer celles en division

Passer ensuite au grossissement X400 pour observer les différentes moments de la
mitose
Télophase
Prophase
Cellules de racine de jacinthe colorée au carmin acétique (X400)
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Notes pour le professeur
a) Au cours de sa vie, une cellule grandit puis se divise pour donner deux cellules filles qui lui sont
identiques. On désigne sous le terme de cycle cellulaire les différentes étapes par lesquelles passe
une cellule vivante entre deux divisions successives. Un cycle cellulaire comporte deux étapes :
l'interphase et la mitose.
b) Pour un bon résultat, il faut :

laisser macérer quelques minutes la pointe de la racine dans le carmin non bouilli ;

laisser au moins 3 à 4 minutes bouillir le carmin acétique contenant la pointe de la racine ;

bien écraser la pointe de la racine sur la lame porte-objet.
Développement attendu principalement visé
Décrire les phases du cycle cellulaire et expliquer le rôle de la mitose (C7).
L'élève décrit comment l’ADN est transmis afin de maintenir la même information génétique dans toutes les
cellules somatiques.
L'élève explique que la multiplication cellulaire est un phénomène indispensable au développement d’un
organisme (augmenter le nombre de cellules et les renouveler).
Bibliographie
Vidéo montrant comment colorer les noyaux d’une cellule en utilisant du carmin acétique
http://www.svt.ac-versailles.fr/spip.php?article457 (page visitée le 14/02/2016)
Autre site présentant la coloration au carmin acétique de racines d’ail ou d’oignons http://www.biotop.net/Microbio/TP/Mitose_prep.htm (page visitée le 14/02/2016)
Site présentant différentes méthodes de coloration et préparations microscopiques
http://www.bio-top.net/Microbio/Menu_microbio.htm (page visitée le 14/02/2016)
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