Université SAAD DAHLAB Faculté des sciences Département de physique Spectrophotométrie Par: A. SIDI MOUSSA L’absorption de la lumière • C’est le phénomène par lequel l’énergie d’un photon, est prise par une autre particule. • Cette énergie absorbée peut par la suite être retransformée en énergie électromagnétique l’émission de photon(s). Spectrophotométrie • La spectrophotométrie est une méthode analytique quantitative qui mesure l’absorbance d’une substance chimique donnée. • Un spectrophotomètre est un appareil qui permet de mesurer l'absorbance d'une solution homogène à une longueur d'onde donnée. Loi de Beer-Lambert • C’est une relation empirique reliant l’absorption de la lumière aux propriétés des milieux qu’elle traverse. I(λ,x) = I0λ e-α x Avec: I0 λ: intensité initiale α : coefficient d’absorption x : longueur de trajet optique L’absorbance • La loi de Beer-Lambert peut s’exprimer aussi sous la forme: I(λ,x) -ε C L I(λ,x) = I0λ e ou Aλ = - Log( )= ε C L I0λ Aλ,T= ε C L I(λ,x) : La transmittance (T) de la solution. I 0λ Aλ : l’absorbance. ε : coefficient d’absorption molaire (L.mol-1.cm-1) C : concentration (mol/L ou g/cm3) L : longueur de trajet optique (cm ou m) L’absorbance • L’absorbance mesure la capacité d’un milieu à absorber la lumière qui le traverse. • L’absorption molaire ε en fonction de λ, T, et C. on peut calculer ε a partir de la perte d’intensité I a travers une épaisseur L. A C .L Applications • • • • Détermination d’une concentration inconnue. Suivi de la cinétique d’une réaction chimique. Colorimétrie. Oxymétrie. Manipulation • SPID-HR Visible • Jenway Visible + UV Manipulation avec SPID-HR Manipulation avec SPID-HR Manipulation avec Jenway Manipulation avec Jenway Absorbance Transmittance Longueur d’onde Etalonnage