Les immunoglobulines intraveineuses et la réponse spécifique des

Université de Montréal
Les immunoglobulines intraveineuses et la réponse
spécifique des cellules T dans la prévention de la
maladie lymphoproliférative post-greffe associée au
virus Epstein-Barr chez les enfants greffés de cellules
souches hématopoïétiques
Par
Ramatoulaye Bah
Département de Microbiologie-Infectiologie-Immunologie, Université de Montréal
Faculté de Médecine
Thèse présentée à la Faculté de Médecine
en vue de l’obtention du grade de Doctorat (Ph.D.)
en Virologie-Immunologie
Janvier, 2015
© Ramatoulaye Bah, 2015

Université de Montréal
Faculté des études supérieures
Cette thèse intitulée :
Les immunoglobulines intraveineuses et la réponse spécifique des cellules T dans la
prévention de la maladie lymphoproliférative post-greffe associée au virus Epstein-
Barr chez les enfants greffés de cellules souches hématopoïétiques
Présentée par :
Ramatoulaye Bah
a été évaluée par un jury composé des personnes suivantes :
Président-rapporteur : Dr. Ali Ahmad
Directrice de recherche : Dre. Caroline Alfieri
Membre du jury : Dre. Louise-Geneviève Labrecque
Examinateur Externe : Dr. Pierre Lebel
Représentant du doyen : Dr. Azemi Barama

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Résumé
La maladie lymphoproliférative post-greffe (MLP) est une complication grave chez les greffés
(d’organes solides ou de cellules souches hématopoïétiques) immunosupprimés suite à
l'infection par le virus Epstein-Barr (VEB). En l’absence d'une réponse efficace des
lymphocytes T cytotoxiques, les cellules B infectées par le VEB peuvent proliférer et donner
lieu à la MLP. Dans le cas des receveurs de greffe immunosupprimés, les cellules B infectées
par le VEB de façon lytique, produisent activement de nouveaux virions. Ces derniers
infectent les cellules B voisines, entraînant leur expansion polyclonale. La gp350, une protéine
du cycle lytique située dans l'enveloppe virale, joue un rôle important dans l'infection par le
VEB. Elle interagit avec le récepteur CD21 exprimée à la surface des cellules B pour
permettre l’entrée du virus. Ainsi, des anticorps neutralisants anti-gp350 sont considérés être
des acteurs clés dans le blocage de l'infection, empêchant ainsi le développement de la MLP.
L'effet protecteur des immunoglobulines intraveineuses (IgIV) à titre prophylactique contre le
VEB et la MLP chez les greffés de cellules souches hématopoïétiques n’est pas clairement
démontré. Par conséquent, le premier objectif de cette thèse a proposé d'évaluer l'efficacité des
IgIV contre l'infection par le VEB et la MLP chez les receveurs de cellules souches
hématopoïétiques. Le deuxième objectif a proposé de déterminer, en utilisant la technique
ELISpot, si la présence d'une réponse forte des lymphocytes T contre l'antigène précoce
BMLF1 du cycle lytique du VEB pourrait constituer un marqueur de protection contre la MLP
chez les greffés de cellules souches hématopoïétiques. Les résultats ont montré d'une part que,
si les IgIV peuvent neutraliser efficacement l'infection par le VEB in vitro, ils ne protègent pas

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efficacement les patients greffés contre l'infection par le VEB in vivo. D'autre part, l'étude de
la réponse des lymphocytes T contre des antigènes du VEB a démontré que les cellules T de
certains patients sont capables de reconnaître l'antigène lytique BMLF1. Cette réponse
spécifique des lymphocytes T peut s’avérer un bon marqueur de la protection contre la MLP.
Les résultats de cette thèse démontrent que l’infection lytique au VEB joue un rôle
fondamental dans le développement de la MLP. Les données indiquent également que la
présence d'une réponse spécifique des lymphocytes T contre un antigène du cycle lytique du
VEB peut constituer un bon marqueur de la protection contre la MLP. Cependant, le
traitement des patients recevant des greffes de cellules souches hématopoïétiques avec les IgIV
n’apparaît pas efficace dans la prévention de la MLP.
Mots-clés : virus Epstein-Barr, maladie lymphoproliférative post-greffe, sang de cordon,
moelle osseuse, immunosuppression, immunoglobulines intraveineuses, cellules T.

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Abstract
Post-transplant lymphoproliferative disease (PTLD) is a serious complication in
immunosuppressed transplant patients following infection by the Epstein-Barr virus (EBV). In
the absence of an efficient cytotoxic T-lymphocyte response, EBV-infected B cells can expand
in number and give rise to PTLD. In the immunosuppressed setting, EBV infected B cells are
postulated to be lytically activated, such that the virions released can infect bystander B cells,
resulting in polyclonal B cell expansion. Because gp350, a lytic-cycle protein located in the
viral envelope, plays an important role in EBV infection, anti-gp350 neutralizing antibodies
are thought to be a key player in blocking infection, hence preventing the development of
PTLD. The use of intravenous immune globulin (IVIG) as a prophylactic against opportunistic
infections (including EBV) for patients receiving hematopoietic stem cell transplantation calls
into question the effectiveness of IVIG to inhibit or temper EBV infection in this patient
group. Therefore the first objective of this thesis proposed to evaluate the efficacy of IVIG
against EBV infection and PTLD in hematopoietic stem cell recipients. The second objective
proposed to determine, using the ELISpot technique, whether the presence of a strong T cell
response against the EBV lytic-cycle antigen BMLF1 could constitute a marker for protection
against PTLD in hematopoietic stem cell transplant recipients. The results revealed firstly that,
while IVIG can efficiently neutralize EBV infection in vitro, it does not effectively protect
transplant patients against EBV infection in vivo. Secondly, the study of the T-cell response
against EBV antigens demonstrated that T cells from certain patients are able to recognize the
BMLF1 lytic-cycle antigen. This specific T-cell response may prove to be a good marker of
protection against PTLD.