Présentation - Université d`Orléans
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Développement de méthodes robustes pour la synthèse chimique de protéines et de glycoprotéines ARRAGON Laetitia et RAHMOUN Safwane Doctorante: Alba Casas Directeur: V. Aucagne Equipe Chimie des protéines de synthèse et glycoingénierie (CBM), CNRS – Orléans POURQUOI FAIRE DES PEPTIDES? Médicaments «communs» Ex: Doliprane, ibuprofène Introduction Synthèse peptidique Médicaments à base peptidique Ex: Insuline, vaccins, anticorps…. Travail au laboratoire Conclusion DE L’ANIMAL AU LABORATOIRE Synthèse au laboratoire Extraction animaux Ex: Insuline Source naturel Limitations • Faible concentration Avantages • • Introduction Synthèse peptidique Synthétiser un grand nombre de protéines Faire des modifications pour études postérieures Travail au laboratoire Conclusion Acide aminé (aa) Les 20 aa naturels Peptide Protéine Protéine d’insuline en 3D Introduction Synthèse peptidique Travail au laboratoire Conclusion Synthèse peptidique sur phase solide (SPPS) Bras La ligation chimique Résine 1 Retrait du bras et de la résine Avantage: purification simple Inconvénient: 50 aa max Avantage: réaction qui se passe dans l’eau Inconvénient: difficile à purifier Pour profiter des avantages de ces deux méthodes, les chercheurs ont développé une nouvelle méthode : Ligation chimique sur phase solide. Introduction Synthèse peptidique Travail au laboratoire Conclusion LE PRINCIPE DE LIGATION CHIMIQUE SUR PHASE SOLIDE 1-Synthèse du premier peptide par SPPS Bras Résine 1 2-Attachement du premier peptide à une deuxième résine compatible avec la ligation chimique Résine 2 Résine 2 3-Ligations chimiques successives sur support solide Résine 2 4-Libération de la résine. Synthèse de peptides de grande taille Introduction Synthèse peptidique Travail au laboratoire Conclusion Travail au laboratoire: Élèves Edifice et doctorant Synthèses d´un outil pour la ligation chimique de la résine du premier peptide Résine 2 HS O Résine Résine 22 + H2N SR O Ligation chimique HS O Résine Résine 22 Introduction N H O Synthèse peptidique Travail au laboratoire Conclusion Synthèse de bras puis détermination de sa structure par RMN (résonance magnétique nucléaire) Résine 2 Résine 2 O SR Test de pureté par chromatographie Introduction Synthèse peptidique Travail au laboratoire Conclusion CONCLUSION Nous avons synthétisé un nouvel outil pour appliquer la ligation chimique sur support solide. Cela permettra d’augmenter la taille des peptides synthétiques. N N N N O N H N O Introduction Synthèse peptidique O N O Travail au laboratoire Conclusion Merci de votre attention Etude des effets du bisphénol A et de ses dérivés chlorés sur le cerveau de souris in vivo par IRM et SRM Encadrement CBM Elèves Lycée Benjamin Franklin Dounia El Hamrani (Doctorante) Sandra Même (Directrice de Thèse) Clarence Guet Josie Nyangezi Encadrement Benjamin Franklin Annie Renard (Professeur) Introduction Qu'est ce que le Bisphénol A et le Bisphénol A chloré ? Bisphénol A (BPA) Résines époxy Polycarbonates Introduction Bisphénol A Objets du quotidien AIR, SOL EAU, ALIMENTS Exposition quotidienne à faible dose Introduction Dérivés chlorés du BPA Traitement de l’eau par le chlore BPA BPA tétrachloré BPA BPA trichloré BPA bichloré BPA monochloré Objectifs Etudier les effets des dérivés chlorés du Bisphénol A sur la structure et la composition chimique du cerveau Animaux Développement embryonnaire Fécondation Allaitement Naissance Injection de « cocktail » de BPA chloré à faible dose aux « mamans » souris Sevrage Étude sur les « bébés » souris par IRM & SRM Technique Imagerie par Résonance Magnétique et Spectroscopie par Résonance Magnétique IRM Morphologie (taille, forme) & Texture (contraste) SRM Composition chimique Principe IRM 1) Polarisation Sans Avec Champ Magnétique 1 (B0) Principe IRM 1) Polarisation Sans 2) Résonance Bascule à un angle 90° Avec Champ Magnétique 1 (B0) Avec Champ Magnétique 2 (B1) Principe IRM 1) Polarisation Sans 2) Résonance Bascule à un angle 90° Avec Champ Magnétique 1 (B0) 3) Relaxation Sans Champ Magnétique 2 (B1) Avec Champ Magnétique 2 (B1) Principe IRM 1) Polarisation Sans 2) Résonance Bascule à un angle 90° Avec Champ Magnétique 1 (B0) 3) Relaxation Avec Champ Magnétique 2 (B1) 4) Transformation de Fourier Sans Champ Magnétique 2 (B1) Signal obtenu image Résultats attendus Image de cerveau de souris Composition chimique d’un cerveau de souris Résultats attendus Image de cerveau de souris Composition chimique d’un cerveau de souris Cortex HPC Cortex : Neurotransmetteurs : fonctions cérébrales élaborées (motrices, sensorielles) Molécules de la transmission du message nerveux Hippocampe : la mémoire de l’histoire personnelle Merci de votre attention !
