Sérum anti-lymphocytaire (SAL) - Service Central d`Authentification

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UNIVERSITE DE NANTES
FACULTE DE MEDECINE
Etudes d’un protocole clinique de minimisation des
corticostéroïdes et de la tolérance opérationnelle
chez des patients transplantés rénaux
THESE DE DOCTORAT
Ecole Doctorale : CHIMIE BIOLOGIQUE
Discipline : SCIENCES DE LA VIE ET DE LA SANTE
Spécialité : IMMUNOLOGIE
Présentée et soutenue publiquement par
Stéphanie LOUIS
Le 6 juin 2005, devant le jury ci-dessous :
Président du jury Francine JOTEREAU, Professeur, Nantes
Rapporteurs Jocelyne DEMENGEOT, Professeur, Oeiras, Portugal
Christophe LEGENDRE, Professeur, Paris
Examinateurs Francine JOTEREAU, Professeur, Nantes
Diégo CANTAROVICH, Docteur, Nantes
Directeurs de thèse Jean-Paul SOULILLOU, Professeur, Nantes
Sophie BROUARD, Chargé de Recherche, Nantes

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Sommaire
Remerciements 2
Sommaire 4
Abréviations 8
Liste des figures 10
Liste des tableaux 11
Avant-propos 12
Introduction 14
I. Le rejet de greffe.................................................................................................... 14
A. Le rejet hyperaigu ...........................................................................................................14
B. Le rejet aigu.......................................................................................................................15
1. Les cellules de l’immunité innée.................................................................................17
2. L’immunité adaptative ...................................................................................................18
a) Différentes voies de présentation antigénique.............................................................................18
b) L’activation du lymphocyte T ..................................................................................................19
c) Réaction d’hypersensibilité retardée et cytotoxicité .....................................................................20
C. Le rejet chronique...........................................................................................................22
II. L’induction d’une tolérance d’allogreffe : modèles précliniques et essais
cliniques.......................................................................................................................... 24
A. Blocage des voies de costimulation.............................................................................25
1. L’interaction CD28/B7....................................................................................................27
2. L’interaction CD40/CD154 ...........................................................................................28
3. L’interaction LFA1/ICAM-1.........................................................................................29
4. L’interaction VLA4/VCAM-1 ......................................................................................30
B. Déplétion lymphocytaire T ..........................................................................................30
1. Anticorps ciblant les molécules associées au TCR..................................................30

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a) La molécule CD3 ..............................................................................................................31
b) La molécule CD2 ..............................................................................................................33
c) La molécule CD4 ..............................................................................................................33
2. Campath-1H......................................................................................................................34
3. Sérum anti-lymphocytaire............................................................................................35
C. Mise en place d’un chimérisme ...................................................................................36
1. Définitions et mécanismes ............................................................................................36
2. Protocoles d’induction de tolérance par induction d’un chimérisme...............38
III. La tolérance « opérationnelle » .............................................................................. 42
IV. Les cellules T régulatrices humaines .....................................................................44
A. Les cellules T CD4+.........................................................................................................46
1. Les cellules T CD4+CD25+ naturelles........................................................................46
a) Origine et localisation ....................................................................................................46
b) Caractéristiques phénotypiques ...................................................................................47
c) Caractéristiques fonctionnelles ....................................................................................49
d) Cellules T CD4+CD25+ régulatrices et pathologies ...............................................50
2. Les cellules T CD4+ régulatrices induites.................................................................52
a) Les lymphocytes Tr1 .......................................................................................................52
b) Les lymphocytes Th3 ......................................................................................................54
B. Les cellules T CD8+ suppressives ................................................................................54
1. Les cellules T CD8+ suppressives (Ts) de type 1 .....................................................55
2. Les cellules T CD8+ suppressives de type 2..............................................................57
3. Les cellules T CD8+ suppressives de type 3..............................................................57
C. Les cellules NKT ..............................................................................................................58
D. Les cellules T anti-idiotypiques et anti-ergotypiques............................................59
V. Les glucocorticoïdes (GC) ....................................................................................62
A. Historique des corticostéroïdes....................................................................................62
B. Les hormones stéroïdiennes .........................................................................................63
C. Les glucocorticoïdes et leurs récepteurs....................................................................63
D. Propriétés anti-inflammatoires et immunosuppressives des glucocorticoïdes64
1. Glucocorticoïdes et voies de signalisations intracellulaires.................................65
2. GC et apoptose..................................................................................................................68

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3. Cibles cellulaires des glucocorticoïdes.......................................................................70
a) Macrophages .....................................................................................................................70
b) Granulocytes et mastocytes ..........................................................................................71
c) Cellules endothéliales .....................................................................................................72
d) Fibroblastes ........................................................................................................................73
e) Cellules dendritiques ......................................................................................................73
f) Cellules NK ........................................................................................................................74
g) Lymphocytes T .................................................................................................................74
h) Lymphocytes B .................................................................................................................76
E. L’utilisation des glucocorticoïdes en transplantation: pour ou contre ?...........76
1. Les avantages des glucocorticoïdes.............................................................................77
2. Les inconvénients des glucocorticoïdes.....................................................................78
3. Les protocoles visant à minimiser les glucocorticoïdes.........................................79
VI. Les sérums anti-lymphocytaires (SAL).................................................................. 80
A. Historique..........................................................................................................................80
B. Composition......................................................................................................................81
C. Mécanismes d’action.......................................................................................................83
1. Apoptose.............................................................................................................................84
2. Anergie ...............................................................................................................................87
3. Modulation des molécules de surface ........................................................................87
4. Lyse des cellules dendritiques......................................................................................88
D. Effets in vivo des SAL.....................................................................................................89
1. Déplétion des lymphocytes circulants.......................................................................89
2. Inhibition de la prolifération........................................................................................89
3. Réponse humorale contre les protéines xénogéniques .........................................90
Résultats 1 : Contribution à l’analyse de patients greffés rénaux
« opérationnellement » tolérants 91
I. Objectifs de l’étude ................................................................................................ 92
II. Description des patients......................................................................................... 92
III. Résultats................................................................................................................. 93
A. Les patients « opérationnellement tolérants » présentent un répertoire
lymphocytaire T fortement altéré ..............................................................................94

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B. Les patients greffés rénaux en rejet chronique présentent un déficit en
cellules T CD4+CD25hi et en FOXP3 couplé à la présence de molécules
associées à une cytotoxicité sur les lymphocytes T CD4+ par rapport aux
patients « opérationnellement tolérants »...............................................................106
C. Les patients greffés rénaux en rejet chronique présentent une augmentation de
lymphocytes T CD8+ « cytotoxiques » par rapport aux patients
« opérationnellement tolérants »....................................................................................132
IV. Discussion et perspectives.................................................................................... 155
Résultats 2 : Protocole de minimisation des corticostéroïdes en transplantation
rénale: le protocole FRANCIA 161
I. Objectifs de l’étude .............................................................................................. 162
II. Description des patients....................................................................................... 162
III. Résultats............................................................................................................... 164
A. Monitorage phénotypique et transcriptionnel des leucocytes circulants chez
des patients greffés rénaux recevant une induction par sérum anti-
lymphocytaire avec ou sans corticostéroïdes.........................................................165
IV. Discussion et perspectives.................................................................................... 190
Bibliographie 194
Annexes 227