interet de la technique taqman pour l`analyse de la mutation de l

INTERET DE LA TECHNIQUE TAQMAN POUR L’ANALYSE DE LA
MUTATION DE L’ONCOGENE KRAS A PARTIR DU MATERIEL DE
CYTOPONCTION PRELEVE SOUS ECHOENDOSCOPIE DE MASSES
TISSULAIRES PANCREATIQUES
Bournet B., Grand D., Selves J., Torrisani J., Cordelier P., Buscail L.
INSERM U858 & Gastroentérologie et Nutrition CHU Toulouse Rangueil
Service d’Anatomopathologie, CHU Toulouse Purpan
Introduction : L’oncogène KRAS est muté sur le codon-12 dans 70 à 95 % des cancers
pancréatiques. Nous avons précédemment démontré l’intérêt de la recherche de cette mutation
dans le matériel de cytoponction pancréatique prélevé sous échoendoscopie (EE) pour le
diagnostic différentiel entre cancer du pancréas (CP) et panréatite chronique pseudo-tumorale
(PCC) (Endoscopy 2009 ;41 :1-6).
Buts : dans le cadre d’un transfert de technologie à la pratique courant nous avons évalué de
façon prospective les performances de la technique de recherche des mutations de KRAS par
Taqman à l’ancienne technique de RFLP puis séquençage.
Matériel et méthodes : Au moins une Une EE avec cytoponction-biopsie a été réalisée chez 26
patients (H : 14; F : 12; âge moyen : 57 ans) porteurs d’une masse tissulaire pancréatique avec
histologie couplée à la recherche des 3 principales mutations du codon 12 de KRAS (GAT,
GTT et CGT). Cette recherche était effectuée après extraction de l’ADN par le DNA micro kit
(Qiagen) à partir du matériel de rinçage de l’aiguille de cytoponction de 22G.
Résultats : L’histologie a confirmé un adénocarcinome primitif pancréatique dans 15 cas, une
PC pseudotumorales dans 6 cas et une autre tumeur ou un autre diagnostic dans 3 cas
(endocrine, TIPMP). Les résultats de l’analyse de la recherche de la mutation KRAS ont été
comparés à ceux obtenus depuis 4 ans avec l’ancienne technique RFLP + séquençage :
mutation au cours du CP : ( 11 / 15 soit 73 % (GAT>GTT>CGT) (Vs 67 %) ; mutation au
cours de la PC = 0 / 6 soit 0 % (Vs 0 %) ; mutation dans autres tumeurs : 1 / 3 soit 33 %
(TIPMP) (Vs 6,2%). Soit une sensibilité, une spécificité et une précision pour le diagnostic
d’adénocarcinome de respectivement 73 %, 88 % et 75 % (Vs 67, 100 et 72 % pour RFLP +
séquençage).
Conclusion : Pour la première fois nous démontrons que la recherche de mutation de KRAS
par Taqman sur le matériel de cytoponction pancréatique prélevé sous EE est réalisable en
routine et présente des performances similaires à celle de la RFLP + séquençage. La présente
étude valide aussi nos résultats antérieurs en autorisant l’application de la technique Taqman
qui est plus rapide et accessible dans tout l’hexagone (plates-formes de génétique somatique
des tumeurs) pour le diagnostic positif et différentiel des masses solides pancréatiques.