Biologie médicale Exploration biochimique de la calcémie, de la phosphatémie, des affections osseuses page 1/7
Lucile SAUTIER- Laure VALY
12/05/09
Sandra et Céline
Biologie médicale
10h30-11h30
Catherine Trumel
Exploration biochimique de la calcémie, de la
phosphatémie et des affections osseuses.
Objectifs de ce cours :
1/ Comprendre comment faire le diagnostic de ces affections, comment faire le choix des moyens
diagnostiques, connaître les variations des facteurs pré-analytiques pour sélectionner les analyses
adéquates et choisir le type d’analyseur pour notre clinique
2/ Avoir un ordre d’idée de la valeur de la calcémie et de la phosphatémie
3/ Comprendre les régulations et le rôle de la parathormone (PTH), surtout en médecine des
carnivores ; expliquer comment la PTH peut aider à interpréter les variations de P-Calcium et P-
phosphates
Pré-requis points supposés connus :
1/ métabolisme du calcium et des phosphates inorganiques : apports (sources alimentaires, digestion
& absorption), utilisations, régulation
2/ hormones de la régulation calcique
1. Deux constituants minéraux indissociables :
Ca et P sont deux éléments indissociables : on parle de métabolisme phospho-calcique. Ils sont
fortement liés et pratiquement tout est dans les os, 99% du Ca et 80% du Pi (Phosphate
inorganique). Il y a 15% de Pi dans les muscles.
NB : Pour le phosphate c’est la forme inorganique que l’on dose.
Abordons les régulations plasmatiques. Le pool circulant est faible.
Il se compose de 50% de Ca libre (sous forme de Ca2+), 40% associé aux protéines
plasmatiques (surtout à l’albumine), 10% lié aux anions. La forme libre est celle qui est
susceptible d’être modifiée.
Le Pi libre se trouve sous deux formes (fonction du pH sanguin)
Equilibre : HPO42- (~80%) ↔ H2PO4- (~20%)
Le tube digestif (absorption), les os (stockage) et les reins (élimination) sont les 3 organes de la
régulation. La PTH (hormone parathyroïdienne), la calcitonine et la vitamine D3 (cholecalciferol)
sont les 3 hormones de la régulation de la calcémie (la phosphatémie ne fait que suivre).
Ca et P sont les 2 substrats. Leur régulation est très fine permettant de lutter très efficacement
contre l’hypocalcémie.
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Fonctionnement pratique :
La PTH a pour effet biologique une hypercalcémie et une hypophosphatémie. Cette
hormone joue sur le rein en favorisant la réabsorption du Ca et la transformation de la vitamine
D3 en calcitriol (forme active de la Vit D). Elle favorise aussi la résorption osseuse (libération de
Ca) et est très active pour éliminer le P.
Le calcitriol agit à 3 niveaux :
- rein : elle augmente la réabsorption du Ca
- tube digestif : elle favorise l’absorption de Ca alimentaire
- os : elle stimule la libération de Ca et Pi (résorption osseuse).
PTHrP est la parathormone physiologique chez le fœtus, elle disparaît à la naissance mais on
peut la trouver sécrétée par quelques tumeurs.
Valeur usuelles de Ca et Pi: en mEq/L (milli équivalent par litre)
Il faut retenir 2 mEq/L pour le Ca et 1,8 mEq/L pour le Pi.
2. Formes du Ca plasmatique exploration :
But : Quelle machine acheter pour doser le Ca ?
La forme du Ca qui nous intéresse est celle que l’on peut doser par prise de sang.
Il existe plusieurs formes de Ca comprises dans le Ca total :
- Ca2+ libre seule forme active : « Ca ionisé » dans la littérature
- Ca2+ lié à l’albumine
- Ca2+ comple
On devrait doser le Ca ionisé car c’est la partie variable de la calcémie, donc représentative des
variations. Mais dans la pratique on ne l’analyse pas facilement (ça nécessite des machines qui font
les gaz du sang). Ce n’est pas aussi utilisé en pratique que le dosage du Ca total et c’est cher.
3. Dosage du Ca total
Donc, dans la pratique courante, on mesure le Ca total (= mélange des 3 formes citées ci-dessus). Il
faut se débrouiller pour que ça reflète la calcémie.
Calcémie
Phosphatémie
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Exemple :
- Si une grosse partie du Ca est liée à l’albumine, on peut avoir une hypocalcémie causée par une
hypoalbuminémie. C’est la variation de la protéinémie qui induit la diminution de la calcémie
dosée, ceci peut nous induire à mal interpréter cette hypocalcémie.
Par conséquent, quand on a une hypo- ou hypercalcémie, on ne sait pas trop comment l’interpréter :
est-ce la fraction libre ou liée qui a bougé ? Il suffit de mesurer alors les protéines totales ou
l’albumine et si c’est normal, alors la calcémie est le reflet de la calcémie libre.
/!\ Attention pour le prélèvement, il ne faut pas utiliser n’importe quel tube : jamais de tube
anticoagulant, jamais EDTA, Citrate, et Oxalate (car ils chélatent le Ca).
Donc il faut :
- un plasma hépariné (couleur du bouchon : vert), ou éventuellement un sérum sans
séparateur si aucun élément ne précipite
- sans hémolyse
- un sujet à jeun (hyperlipémie entraîne des résultats faussés).
Le Ca reste stable pendant plusieurs heures à température ambiante, quelques jours à 4°C et
plusieurs mois à -20°C.
Ce qui est contre-indiqué est le tube violet EDTA et celui à hémostase bleu clair.
NB : Tous les automates sont capables de faire le Ca total.
4. Dosage du Ca ionisé
Il faut un automate spécialisé avec des électrodes spécifiques, couplées sur des machines pour les
gaz du sang.
Il faut faire cette analyse sur du sang total et la plus vite possible car la valeur varie avec le pH.
L’avantage est qu’on n’a pas besoin de centrifuger, on met le sang total.
Valeurs usuelles du Ca ionisé: 1,5 mmol/L pour le chien et 1,3 mmol/L pour le Chat.
Si vous n’avez pas d’automates spéciaux dans votre clinique, il faut mesurer le Ca total et ensuite
on corrige : on regarde les taux de protéines totales/albumine et on fait la calcémie approchée (ça
n’a rien à voir avec le Ca ionisé).
!!! Attention pour un chien avec une insuffisance rénal et chez tous les chats ça ne marche pas !
C’est donc à prendre comme une technique utile dans certains cas pour se faire une idée de la
situation, mais des examens complémentaires plus précis seront nécessaires.
Ca corrigée = Ca (mg/L) 0,4 x Protéines totales (g/L) + 35
= Ca (mg/L) Albumine (g/L) + 33
Si l’animal a une Ca mesurée de 100mg/L et 15g/L d’albumine, ça nous donne 118 mg/L de Ca
on est dans l’intervalle de référence.
En pratique : On fait d’abord la calcémie totale dans un contexte donné : par exemple pour un
animal présentant une PUPD (polyurie-polydipsie) on commence par faire la mesure de la calcémie
totale et des protéines totales. Si on trouve une hypercalcémie et une protéinémie normale, ça vaut
la peine de faire le Ca ionisé (si possible).
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5. Pi : pré analytique
Il y a de fortes variations postprandiales (dues à un repas riche en viande principalement, la viande
étant très riche en P).
Il faut faire le prélèvement sur un animal à jeun, sur un tube héparine rapidement centrifugé. En
effet, il faut séparer le plasma des globules rouges rapidement car ils contiennent du Pi (surtout chez
les ruminants). Le P est très concentré dans les plaquettes, alors si on laisse le tube sur la paillasse
longtemps, les plaquettes libèrent leur P artefactuel.
6. Calciurie et Phosphaturie
Ces mesures sont très peu utilisées en routine. A ne surtout pas faire en première intention.
7. Intervalles de référence P-Ca tital et P-Pi
Pour l’analyseur utilisé aux cliniques de l’ENVT (ne pas les apprendre par cœur) :
calcium phosphates
Chat 2.3-2.9 mmol/L 26-92 mg/L
Cheval 2.7-3.3 mmol/L 19-54 mg/L
Chien 2.4-3.0 mmol/L 22-79 mg/L
Lapin 1.4-3.0 mmol/L 12-49 mg/L
Mouton 2.3-2.7 mmol/L 40-89 mg/L
Porc 1.3-2.9 mmol/L 36-92 mg/L
Vache 2.0-2.5 mmol/L 47-90 mg/L
8. Hormones de la régulation calcique
PTH: On constatera des variations en cas d’affection rénale ou de problème alimentaire.
!! La PTHrP est sécrétée par certaines tumeurs (principalement lymphome malin du chat) : elle
entraine une augmentation de Ca et une diminution de P.
D’ailleurs les hypercalcémies les plus fortes sont observées lors de telles tumeurs.
Calicitriol: joue peu fréquemment un rôle, très peu de variations - observables lors d’intoxication
ou de manque de vitamine D dans l’alimentation.
Calcitonine: On observe rarement des variations.
Dosage de la PTH :
On peut être amené à doser la PTH pour connaître l’étiologie d’une hypercalcémie par exemple.
Il faut des conditions pré-analytiques particulières :
- La séquence de la PTH est différente selon les espèces donc il faut le préciser si on demande
une analyse à un labo.
- Prélèvement sur tube EDTA contenant des anti-protéases (= aprotinines) tube rose à
conserver au frigo
- Centrifuger et séparer le plasma
- Congeler avant de l’envoyer au laboratoire
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- Si on dose la PTHrP, il faut le préciser au labo car il n’y a pas de croisement entre les
dosages de PTH et PTHrP.
9. Hypocalcémies - causes
Il faut vérifier qu’il n’y ait pas d’erreurs analytiques comme prendre un mauvais tube, surtout si
l’hypocalcémie est sévère.
Défaut d’apport alimentaire
Défaut d’absorption
Augmentation de la consommation : tout ce qui a à voir avec la fabrication du lait, surtout
en péripartum = fièvre de lait (existe dans toutes les espèces : bovins, chevaux, chats,
chiens…). L’ossification du fœtus entraine aussi une augmentation de la consommation en
Ca.
Exemple : Vache laitière ayant un pool de Ca régulé, 2 situations fonction des apports pré-partum :
1) Si elle a un apport bas en Ca on va avoir une hypocalcémie donc une sécrétion de PTH
( résorption osseuse, ↑ absorption intestinale)
2) Si les apports sont importants, la vache absorbe tout le calcium du tube digestif, il n’y a pas
de sécrétion de PTH. Quand l’appétit diminue en fin de gestation (car elle n’a plus de place),
il y a moins d’absorption de Ca, d’où une hypocalcémie. Mais comme il n’y a pas de PTH, il
n’y a pas de résorption osseuse. Donc on a une fièvre de lait et elle est plus marquée chez
les vieilles vaches laitières car les os sont moins durs et contiennent moins de Ca.
Chélation du Ca
Intoxication à l’éthylène glycol, il y a formation d’oxalates dans le sang qui ont une propriété
acide importante, d’où une acidose métabolique avec un trou anionique important. L’animal est
caractérisé par une hypocalcémie et le diagnostic est facilité par l’analyse d’urine contenant des
cristaux d’oxalate de Ca.
Hypoparathyroïdie primaire si manque de PTH rare
Pancréatites aiguës
Hypoalbuminémie = fausse hypocalcémie
10. Hypercalcémies - causes
On la trouve surtout chez les carnivores domestiques.
Hyperparathyroïdie primaire, surtout due à une tumeur de la parathyroïde donc assez rare.
Ce trouble est associé à une hypercalcémie, on a une phosphatémie normale à basse et un
animal en très bonne santé : découverte fortuite (bilan pré-anesthésique).
Pseudohyperparathyroïdie néoplasique : cause la plus fréquente, associée à une PTH
basse et à une PTHrP élevée. Cependant on ne fait pas à chaque fois les dosages PTH et
PTHrP même si c’est une cause fréquente.
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