mésappariements T-T, les résultats ne peuvent s’expliquer que par la pol-ξ qui es responsable du brin
continu.
On fait la même expérience pour la pol-δ : synthèse du brin discontinu. Cependant, la pol-δ est
également capable de faire la synthèse du brin continu quand la pol-ξ est défectueuse.
Translesion synthesis. (TLS)
Il arrive que la polymérase soit face a quelque chose qu’elle ne connait pas (X : site abasique,
dimère de thymines etc.). Avec une polymérase translésionelles, elle va associer n’importe qu’elle
base en face ce site X. En général, ces polymérases translésionnelles sont mutatrices.
On utilise un plasmide ayant un aminofluorène empêchant la polymérase de répliquer correctement.
(=anomalie volontairement placée) sur un brin, et l’autre brin rallongé de 3 nucléotides (permettant
de le reconnaitre après un Southern-Blot).
Pour valider ce modèle, on fait d’abord avec les souches non mutées (sur le Southern-Blot, on voit
bien que les deux brins sont synthétisés de manière coordonnée). Sur la souche mutante, on voit que
les deux brins présentent des anomalies : les fourches de réplications se bloquent au niveau de la
lésion rouge. Face à une lésion de ce genre, Pol III est incapable de passer au travers. On va
commencer à introduire des mutants Pol II et Pol V. on peut déduire que lorsque Pol III arrive sur une
lésion, elle s’arrête puis Pol II et Pol V vont avoir leur activité de polymérases translésionelles.
Quand la lésion est sur la matrice servant de brin continu, on va avoir une extrusion d’une
longue boucle d’ADN simple brin car l’hélicase elle, continue à avancer. (Le simple brin sera recouvert
de la protéine RecA = système SOS).
Si c’est sur la matrice servant au brin discontinu, le système ne sera pas bloqué mais laissera derrière
lui des brins d’Okazaki non terminés.
Le système SOS :
=système mis en place en cas de stress. Le système fige la division cellulaire tant que le
problème n’est pas résolu. L’acteur principal est RecA. Soumise a des UV, il va y avoir une
transcription / traduction de certains gènes chez la bactérie qui sont en temps normal éteints par un
répresseur : LexA.
En cas de stress, RecA* va aller voir LexA qui s’auto-clive (LexA est une endopeptidase). Cela va
entrainer la transcription de gène : immédiatement pour certains, mais plus tardivement pour
d’autres : il y a des régulations subtiles dans le temps.
Le système SOS sera de nouveau réprimé au bout de 30-40min par retranscription des gènes de
LexA.
Les gènes codés par le système SOS sont des gènes d’arrêt du cycle cellulaire.
Les polymérases translésionelles n’ont pas les capacités de relecture : mutations.
Le gène UmuDC (codant pour pol V) va être transcrit / traduit et sa protéine sera clivée :
l’hétérotrimère umuD/umuD’/umuC va être créé. Ce complexe a des propriétés de polymérisation.
Cet hétérotrimère prends le nom de Pol V.