Loi sur l`égalité des droits et des chances, la participation

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Compte rendu de colloque
Colloque GIS – Maladies Rares (30 – 31 mai 2005)
Le GIS-Maladies Rares a été créé en avril 2002. Il a permis de financer des projets
de recherche, de rapprocher les chercheurs et les cliniciens, de faciliter l’accès à des
technologies (comme la clinique de la souris à Strasbourg), de créer des bases de
données et de favoriser des partenariats avec l’industrie.
« Sur les trois dernières années, un certain nombre de projets ont pu avancer, et
ceci grâce aux financements du GIS (dont 51% proviennent de l’AFM)… Mais il reste
beaucoup à faire et les équipes de recherche sont encore limitées par le manque de
moyens et de temps » a déclaré Alain Fischer lors de ce colloque.
Ce colloque GIS-Maladies Rares (organisé avec le concours de la Fondation
Groupama pour la santé qui soutient, depuis 2000, la lutte contre les maladies rares)
a permis de faire le point sur de nombreuses pathologies qui avaient fait l’objet
d’appel d’offres auprès du GIS-MR. Les communications étaient surtout axées sur
des études physiopathologiques et génétiques et ont montré que, pour la plupart des
pathologies abordées, il y avait une hétérogénéité clinique et génétique. Il y a eu très
peu de présentations sur l’aspect développement de thérapeutiques ou
pharmacologique.
Communications orales:
Emmanuelle Jouanguy (unité 550 Inserm, Hôpital Necker – Enfants malades, Paris)
: Encéphalite herpétique chez l'enfant : un nouveau déficit immunitaire
Une hypothèse génétique a été émise dans la susceptibilité virale qui affecte le
système immunitaire. 62 patients ont été recrutés. Un patient présente une mutation
dans le gène qui code le facteur de transcription STAT-1, une autre dans le facteur
NEMO, facteurs qui interviennent dans la voie de production des interférons /.
Pierre Ronco (unité 702 Inserm, Hôpital tenon, Paris) : Allo-immunisation fœto-
maternelle et pathologie d’organe : renaissance d’un concept
Un enfant souffrant d’un syndrome néphrotique a conduit à une étude sur la
responsabilité des anticorps maternels. L’endopeptidase neutre (NEP) était la cible
de ces anticorps. La mère était déficiente en NEP. Sur cinq mères de trois familles
différentes présentant les mêmes symptômes, deux mutations ont été trouvées dans
le gène MME codant pour des protéines NEP tronquées.
Projets GIS à venir :
- Modèle murin
- Caractérisation d’autres maladies rénales et non rénales induites par allo-
immunisation.
Sylvain Latour (unité 429 Inserm, Hôpital Necker Enfants Malades, Paris) :
Susceptibilité à l’infection par l’EBV : le syndrome lymphoprolifératif lié à l’X
(XLP)

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Compte rendu de colloque
Le syndrome lymphoprolifératif lié à l’X ou syndrome de Purtilo est une
immunodéficience d’origine génétique très rare (1/1 000 000), caractérisé par une
sensibilité particulière à l’infection par le virus Epstein-Barr (mononucléose
infectieuse fulgurante). La mutation est localisée dans le gène SAP/SH2D1A qui
code une petite protéine de signalisation SAP (SLAM-Associated Protein). Chez les
souris déficientes en SAP, il y a un défaut de clearance de cellules tumorales par les
cellules NK. Les cellules NKT représentent une sous-population de cellules NK et
sont absentes chez les patients souffrant de XLP. Ces résultats suggèrent que SAP
serait nécessaire au développement des cellules NKT, et que ces cellules jouent un
rôle dans le contrôle de l’infection par l’EBV.
Loïc Guillevin (Hôpital Cochin, Paris) : Le groupe français d’étude des
vascularites (GFEV)
Grâce au soutien du GIS, plusieurs objectifs se poursuivent :
- Mise en place d’études thérapeutiques prospectives
- Constitution de cohortes de patients et gestion d’une banque de données qui
regroupe plus de 1500 malades (www.vascularite.com).
- Etudes épidémiologiques (maladie de Behçet)
- Travaux fondamentaux (identification de nouveaux antigènes des maladies
auto-immunes, organisation d’une biothèque, études génétiques prévues dans
le futur).
L’angéite granulomateuse de Churg-Strauss est une maladie très rare. Deux
phénotypes pour cette maladie considérée comme unique ont été identifiés.
Jean- Marc Egly (IGBMC, Strasbourg) : Xeroderma Pigmentosum et
Trichothiodystrophie : maladies de la transcription ou de la réparation ?
Le complexe TFIIH est composé de 10 sous-unités. Ce complexe basal de
transcription intervient aussi dans la réparation de l’ADN. Des mutations dans les
différentes sous-unités de ce complexe (XPB, TTD, XPD) sont à l’origine de
pathologies sévères (XP, Trichothiodystrophie, syndrome de Cockayne) qui affectent
la peau (photodermatose, lésions pouvant dégénérer en tumeurs) et le
développement avec des problèmes neurologiques parfois associés. Ces sous-unités
ont des activités enzymatiques hélicase ou kinase. Une nouvelle sous-unité a été
dernièrement identifiée, p8. Elle est impliquée dans la Trichothiodystrophie de
groupe A. Cette étude a permis de définir à quoi sert la sous-unité p8 dans la
réparation : elle stimule l’ouverture de l’ADN autour de la lésion.
D’autres études sont nécessaires pour expliquer les différents phénotypes des
patients et pour déterminer le mode de transmission.
Ernie L. Esquivel (unité 574 Inserm, Hôpital Necker Enfants Malades, Paris) :
The role of modifier genes in the progression of renal disease in a model of
steroid-resistant nephritic syndrome
Le syndrome néphrotique cortico-résistant est dû à une mutation dans le gène
NPHS2 codant la protéine Podocine exprimée dans les glomérules, ce qui entraîne
un défaut de filtration au niveau des reins. 40% sont des formes familiales, 10% des
cas sporadiques. Cette maladie est transmise selon un mode autosomique récessif
et les patients sont résistants aux thérapies par les corticoïdes. Il existe une
variabilité phénotypique chez ces patients. Des modèles de souris ont montré que le

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Compte rendu de colloque
taux de survie était différent selon le fond génétique. La question du rôle de gènes
modificateurs dans la progression de la maladie s’est posée. Des expériences de
croisements de F1 de souches différentes ont montré que le développement des
lésions sévères dépendait de l’origine parentale. Les variations phénotypiques
semblent donc être sous contrôle génétique. Le but d’une prochaine étude est
d’identifier les gènes impliqués dans la progression de cette maladie rénale.
Judith Fischer (Centre national de génotypage, Evry) : Analyse génétique des
ichtyoses congénitales autosomiques récessives(ARCI)
Le projet GIS/Génodermatoses et la coordination du réseau ARCI par le Généthon a
permis de recruter 248 familles venant de nombreux pays, surtout du pourtour
méditerranéen. Le CNG réalise le génotypage et le séquençage.
Les ichtyoses regroupent plus de 40 maladies, la plupart d’origine génétique. Les
ichtyoses récessives présentent une grande hétérogénéité génétique. Un nouveau
gène a été identifié récemment : l’ichthyin (localisation chromosomique en 5q33). Sur
81 familles, 12 familles étaient liées au chromosome 5. Six mutations différentes ont
été décrites. La fonction de la protéine reste inconnue.
Six autres gènes sont impliqués dans les ichtyoses, probablement dans une même
voie métabolique. Mais il reste un grand nombre de familles à analyser et à classer,
d’où l’importance d’une collecte efficace.
Anne Moore et Serge Amselem (unité 654 Inserm, Hôpital Henri Mondor, Créteil) :
Bases moléculaires, génétiques et cellulaires des dyskinésies ciliaires
primitives
Les dyskinésies ciliaires primitives sont hétérogènes sur le plan clinique et génétique.
Les cellules ciliées deviennent immobiles, ce qui entraîne un problème d’évacuation
du mucus, des infections à répétition, des problèmes pulmonaires, et des problèmes
de mobilité des spermatozoïdes. La fréquence est de 1/16 000 naissances avec ou
sans situs inversus. Deux gènes mutés ont été identifiés à ce jour, DNAI1 et DNAH5.
Ils codent des chaînes de dynéine qui compose les cils.
Une famille particulière avec une mère atteinte de rétinite pigmentaire a permis de
localiser le locus RP3 sur le chromosome X (Xp21.1), qui code une protéine
tronquée. Chez d’autres familles, ce locus n’est pas impliqué.
Pour étudier la fonction flagellaire, un modèle de protozoaire parasite, le
trypanosome, a été développé. Ce modèle permettra aussi de cribler d’autres gènes
candidats.
Stanislas Lyonnet (unité 393 Inserm, Hôpital Necker-Enfants Malades, Paris) :
Bases génétiques et moléculaires de la maladie de Hirschprung
Le locus majeur est RET (10q11.2). Ce n’est pas un mode traditionnel d’hérédité
monogénique. Les cas familiaux représentent 15 à 20%. Un gène modificateur a été
localisé sur le chromosome 9, en 9q31. 50% des cas familiaux coségrègent avec
RET mais on ne trouve pas la mutation.
Jamel Chelly (Institut Cochin, Paris) : Génétique et physiopathologie des retards
mentaux liés au chromosome X
Les retards mentaux liés au chromosome X forment un groupe très hétérogène de
pathologies. Un des gènes majeurs est FMR1. Un consortium européen (EURO-

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Compte rendu de colloque
MRX) a été créé pour faciliter la découverte de nouveaux gènes (427 familles
recrutées). 12 impliqués dans des formes différentes de RMLX ont été identifiés ces
dernières années, dont le gène ARX (un des gènes majeurs codant un facteur de
transcription), le gène OPHN1 et le gène IL1rapl. Pour ces derniers, des modèles
murins ont été établis afin d’étudier la fonction des protéines. OPHN1 interviendrait
dans la régulation de l’activité synaptique. IL1rapl interagit avec NCS-1 (neuronal
calcium sensor-1). Il semble réguler le processus d’exocytose et l’activité des canaux
calciques.
Jean-Michel Heard (Institut Pasteur, Paris) : Traitement des atteintes cérébrales
dans le modèle canin de la mucopolysaccharidose de type I
La mucopolysaccharidose de type I (syndrome de Hurler) est due à un déficit en
enzyme lysosomale, l’-L-iduronidase, ce qui entraîne un trouble du trafic axonal,
une accumulation de gangliosides, une réponse inflammatoire et une altération de la
barrière hémato-méningée. Pour apporter l’enzyme déficiente et passer cette barrière
hémato-méningée, un modèle de thérapie génique chez la souris puis chez le chien
a été testé. Un vecteur AAV de sérotype 5 a permis d’apporter l’enzyme dans une
grande partie du cerveau chez la souris et d’observer une rapide correction de
l’accumulation lysosomale.
Pour le modèle de chien Hurler, IDUA déficient, des difficultés ont été rencontrées, et
notamment un problème de réaction immune. Après 4 injections du vecteur AAV-5 et
un traitement immunosuppresseur robuste, l’activité enzymatique a été détectée
dans le cerveau, et la correction des lésions a été observée là où il y avait une
activité enzymatique et même au-delà de la zone où elle était détectée.
Alexandra Durr (unité 679 Inserm, Hôpital Pitié Salpétrière, Paris) : Activité du
réseau SPATAX : l’exemple des ataxies avec apraxie oculo-motrice
Les ataxies spino-cérébelleuses touchent le cervelet et les voies longues
médullaires. Il y a une grande hétérogénéité génétique avec plus de 60 loci
possibles. Deux nouvelles ataxies autosomiques récessives ont été décrites
récemment. Elles sont associées à une apraxie oculomotrice (mouvements des yeux
qui ne se déclenchent pas de façon spontanée) :
Forme AOA1 : forme japonaise et portugaise, associée à un retard mental, une
diminution de l’albumine et une augmentation du cholestérol. Le gène APTX est
muté. Il code pour une protéine présentant une homologie avec une protéine
intervenant dans la réparation de l’ADN simple brin.
Forme AOA2 : associée à une alpha fœtoprotéine élevée. Le gène SETX muté dans
l’exon 8 est un grand gène codant la sénataxine. Cette forme se rapproche plus de
l’ataxie « vraie ».
Jamal Tazi (CNRS UMR 5535, Montpellier) : Protéine(s) contrôlant l’épissage
alternatif : une nouvelle cible pharmacologique pour corriger les maladies
génétiques
Les SR sont des facteurs spécifiques qui contrôlent l’épissage alternatif. Un modèle
d’épissage in vitro a été mis en place pour cribler des molécules chimiques
provenant de la chimiothèque de l’Institut Curie. Certaines molécules sont capables
d’inhiber des SR spécifiques. Quelle est l’application des inhibiteurs du spliceosome
pour traiter les maladies génétiques ?

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Compte rendu de colloque
Ivan Tarassov (CNRS FRE2375, Strasbourg) : Epilepsie myoclonique de type
MERRF : l’importation mitochondriale d’ARNt exogène permet de restaurer les
fonctions mitochondriales
De nombreuses mutations de l’ADN mitochondrial existent (environ 200) et sont à
l’origine de pathologies très diverses (myopathies, maladies neurodégénératives). Un
nouvel outil pour complémenter une mutation dans l’ADN mitochondriale a été
développé. De manière artificielle, un ARN de transfert de levure est importé dans la
mitochondrie. Le modèle utilisé est celui de l’ARNt Lysine associé au syndrome
MERRF, la plus fréquente des épilepsies.
Dans des lignées cybrides (produit de fusion entre cytoplasme et cellule marquée du
patient) ou dans des fibroblastes de patients contenant la mutation MERRF, les ARNt
sont transfectés, exprimés et participent à l’activité mitochondriale. L’activité des
complexes déficients est récupérée. Donc, l’ARNt de levure s‘exprime dans des
mitochondries humaines.
Pierre Szepetowski (unité 491 Inserm, Marseille) : Identification d’un gène
responsable de troubles de la parole et de crises épileptiques d’origine
rolandique
Il y a de très nombreux syndromes épileptiques, d’où la complexité pour l’étude
génétique. Ce sont des pathologies multifactorielles et polygéniques, et il y a souvent
plus d’un phénotype par famille. Les défauts identifiés touchent souvent des canaux
ioniques.
Deux loci ont été identifiés dans l’épilepsie Rolandique et Sylvienne, 15q24 et 16p12.
Dans cette maladie, l’aire du cerveau autour des scissures de Rolando et de Sylvius
est touchée, et en particulier l’opercule rolandique qui intervient dans la motricité du
langage. Il existe des formes rares de la maladie avec altération du langage.
L’origine génétique est complexe et controversée, et aucun gène n’était connu. Deux
familles ont été décrites, et deux marqueurs identifiés en Xq21-q24. Une mutation
faux sens a été trouvée dans le gène SRPX2 (Sushi-Repeat Protein). Cette mutation
génère un site consensus de N-glycosylation. Deux formes mutantes de la protéines
sont produites, glycosylée et non glycosylée, et sécrétées. Un phénomène de
rétention de SRPX2 mutées dans le réticulum endoplasmique a été observé. SRPX2
est exprimée dans l’aire rolandique et dans d’autres aires cérébrales.
Anne Joutel (E 365 Inserm, Paris) : Notch 3 est requis pour l’identité artérielle et
la maturation postnatale des cellules musculaires lisses vasculaires
CADASIL est une maladie monogénique, à transmission autosomique dominante, qui
entraîne des accidents vasculaires cérébraux à répétition (maladie des petites
artères responsable d’une démence chez l’adulte). Tous les patients présentent une
mutation dans le gène Notch3 codant pour un récepteur transmembranaire.
L’expression de Notch3 est restreinte aux cellules musculaires lisses du vaisseau.
Pour étudier le rôle de Notch3, un modèle murin invalidé pour Notch3 a été généré.
Les souris sont viables et fertiles mais les artères mutantes ont une forme anormale.
La fonction de résistance qui intervient dans le débit sanguin est altérée. L’étape de
maturation postnatale est perturbée. Les CML ont une morphologie de CML
veineuses, et donc l’identité artérielle de ces cellules est modifiée. Ces résultats,