O F F R E

Nouveau procédé d’identification d’utilisation d’un gène
de résistance au virus de la panachure jaune du riz
OFFRE
TECHNOLOGIQUE
Résumé
Cetteinventionconcernel’utilisation
desoutilsdelabiologiemoléculaire
pourl’identificationd’ungènemajeur
delarésistanceauvirusdelapanachure
jauneduriz(RYMV).
Ceprocédémisaupointparles
chercheursdel’IRD,enpartenariatavec
l’AssociationpourleDéveloppementde
laRizicultureenAfriquedel’Ouest
(ADRAO),permetd’identifierun
polymorphismeliéaulocusdugènede
résistancepourdéterminerles
phénotypesrésistantsauvirus.Cette
inventionouvredesperspectivespourle
clonagedecegèneetledéveloppement
devariétésrésistantesauvirus.
Description
Cetteinventionconsisteenl’identification
demarqueursmoléculairesdulocusd’un
gènemajeurintervenantpourla
résistanceauvirusdelapanachurejaune
duriz.CetterésistanceauRYMVestliéeà
ungènerécessifprésentdansles2
souchesOryzasativaetOryzaglaberrima.
Ceprocédépermetaussil’établissement
delacartographiephysiquedela
résistanceetleclonagedugène.
Samiseenœuvrenécessitel’amplification
sélectiveparPCRdefragmentsd’ADNde
rizd’individusrésistantsetsensibles.Ces
fragmentssontpréalablementsoumisà
uneétapededigestion,aveclesenzymes
derestrictionEcoRIetMesI,puisde
ligationpourfixerdesadaptateurs
complémentairesd’amorcesayant,àleur
extrémité,unouplusieursnucléotides
spécifiques.L’unedesamorcesducouple
estmarquéeauxfinsderévélation.La
séparationdesproduitsPCRsefaitpar
électrophorèsesurgeldansdes
conditionsdénaturantes.
L’étudecomparativedesprofilsobtenus
aveclesfragmentsprovenantdesvariétés
parentalesrévèlent2bandes
polymorphesspécifiquementprésentes
chezlesvariétéssensibles,le
polymorphismeétantgénétiquement
liéaulocusderésistance.Letauxde
recombinaisongénétiqueentrele
marqueuretlelocusderésistancepeut
êtrecalculépourvaliderlesrésultats.Ces
2bandespolymorphesde510et140pb
déterminent2segmentschromosomiques
inférieursà10cMflanquantlelocusde
résistance.
L’isolementetleclonagedecesfragments
permettentl’obtentiond’unADNc
capabledes’hybrideravecuncloneBAC
cribléàpartird’unebanquedisponible
auprèsdel’IRRI.Cettebanqueest
constituéedefragmentsd’ADNde100à
150kbd’unevariétéderiztellequeIR64.
L’ADNcpeuts’hybrideravecunclone
appartenantàuncontigrenfermantles
séquencesd’ADNdesmarqueurs
identifiésàpartirdessouchessensibles.
CetADNcpeutdoncêtreutiliséentant
quemarqueurdehautespécificitévis‐à‐
visdulocuspourprédireunphénotype
résistant.
Laboratoire
IRD–France
ADRAO–Bénin
Chercheur
M.C.BRUGIDOU
M.J‐P.BRIZARD
M.A.GHESQUIERE
Contact
IRD
Département
Expertise & Valorisation
Le Sextant
44, boulevard de Dunkerque
CS 90009
F-13572 Marseille cedex 02
France
Tél. [+33] (0)4 91 99 96 26
[email protected]
www.dev.ird.fr
Avantages
‐ Permetdedéterminersiuneplante
estsensibleourésistanteauvirus
RYMV.
‐ Permetleclonagedelaséquence
comprenantlelocusdugène
‐ Obtentiondemarqueursdegrande
spécificitévis‐à‐visdulocusd’un
gènemajeurderésistanceauRYMV
Type de transfert
• Brevet prioritaire français
FR99/07831 déposé le 21
Juin 1999 – Extension PCT
n° PCT / FR2000 / 01723
déposée le 21 Juin 2000
• Disponible pour licence de
brevet et de savoir-faire
Ref.dev/OT34
Partenariat
Applications industrielles
Prédictiondephénotyperésistantau
virusRYMV.
Clonagedugènederésistanceet
développement devariétésrésistantes.
Technologie
‐Procédépermettantleclonagedugène
derésistanceauvirusRYMVpouvant
êtretransféréàdesvariétéssensibles
parvoieconventionnellepour
développerfacilementetrapidement
desvariétésrésistantes.
‐ Permetl’améliorationdesplantes
baséssurdesrésistancesnaturellesaux
pathogènesdesvégétaux.
Stadededéveloppement:Preuvede
conceptréalisée
www.ird.fr 
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français, à caractère scientifique et
technologique, placé sous la tutelle
conjointe des ministres chargés de
la Recherche et de la Coopération