Le RNA silencing: mécanisme d`inactivation de l

Le RNA silencing: mécanisme d’inactivation de
l’expression des gènes
Patrice Crété
Laboratoire de Génétique et de Biophysique des plantes
UMR6191,Faculté des Sciences de Luminy

INTRODUCTION
Chez les plantes, transgenèse utilisée en routine pour exprimer des gènes
d’intérêt dans la plante sauvage
Structure d’un ADN de transfert
gène d’intérêt
gène de sélection
BG BD
Dans certains cas, pas d’expression du gène d’intérêt, phénomène
d’inactivation appelé “gene silencing”
Séquence nucléotidique parfaitement conforme mais pas d’expression,
Inactivation retrouvée dans la génération suivante : Inactivation épigénétique
Deux types d ’inactivation en fonction de leurs caractéristiques
Inactivation transcriptionnelle
Inactivation post-transcriptionnelle

Mise en évidence de l’inactivation épigénétique post-
transcriptionnelle ou “post-transcriptional gene silencing” (PTGS)

Le « gene silencing » ou co-suppression de la chalcone synthase
mis en évidence chez les végétaux supérieurs en 1990 suite à l’introduction de
transgènes sens pour surexprimer certains gènes.
Fleur de Pétunia sauvage Pétunia Transgéniques 35S.chsA
chsA
p35S
Transgène sens
+
Co-suppression

Van der Krol et al., 1990, Plant Cell. Pays-bas
Napoli et al., 1990, Plant Cell. Etats-Unis
Deux grandes questions
Quel est le mécanisme moléculaire de la co-suppression?
« The mechanism of suppression by sense genes may involve interference of
RNA strands with the transcription process itself. The transcription process
may be blocked by interaction of RNA with duplex DNA, resulting in a triple
helix structure. »
Est-ce que le mécanisme de la co-suppression correspond à un mécanisme
naturel de régulation de l’expression des gènes
« Finally, the question should be addressed whether the occurrence of the sense
effect is limited to transgenic systems or might be a naturally occurring
phenomenon.»