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Le frottis sanguin
3- Examen du frottis
Le frottis est d’abord observé au faible grossissement (x100 ou x200 avec des oculaires x10 et des
objectifs x10 ou x20) pour apprécier la répartition des cellules sanguines. Il est aussi utile pour détecter la
présence anormale d’agrégats plaquettaires voire leucocytaires, apprécier la richesse en leucocytes
(normalement plus nombreux sur les bords et en queue de frottis) et évaluer la population des globules
rouges (anisocytose, poïkilocytose, polychromatophilie, hypochromie,…). Le faible grossissement permet
également l’observation d’éléments de grande taille (microfilaires, …).
Il est ensuite examiné en utilisant un objectif x100 à immersion, plus particulièrement en fin de corps de
frottis, où les globules rouges ne se chevauchent pas, pour réaliser la formule leucocytaire et apprécier la
morphologie cellulaire.
Régions du frottis: tête, corps et queue du frottis.
La morphologie des cellules et leur répartition dépendent de la région du frottis. Il existe une zone
d’observation idéale car d’épaisseur optimale, correspondant approximativement au dernier tiers du frottis
(en fin de la région du corps), là où les hématies ne se chevauchent pas et sont à peu près équidistantes les
unes des autres. Cette zone de lecture est idéale pour réaliser la formule leucocytaire et apprécier les
caractéristiques cytologiques des différentes populations cellulaires.
Tête corps queue
Méthode de lecture pour réaliser la formule leucocytaire :
Appréciation de la morphologie cellulaire :
TAILLE : appréciation semi-quantitative de la taille d’une cellule par rapport à celle d’une hématie : entre 6 à
7 m pour les espèces animales concernées (Chien, Chat, Cheval et Bovin)
► Une cellule sera de petite taille si elle avoisine la taille d’un globule rouge, de taille moyenne si sa taille
est comprise entre 10 et 20
m et de grande taille si elle est supérieure à 20
m de diamètre.
FORME : arrondie, ovalaire, irrégulière, avec pseudopodes,…
RAPPORT NUCLEOCYTOPLASMIQUE (RNP) : pourcentage de la surface cellulaire occupée par le noyau:
rapport élevé (> 80%), comme par exemple un lymphocyte dont le noyau occupe la presque totalité de la cellule,
moyen (50%<rapport< 80%), faible (< 50%).
NOYAU : position dans la cellule (central, excentré), forme (arrondi, encoché, lobé,…), chromatine (fine,
perlée, mottée, laquée,…), présence d’éventuels nucléoles (nombre, taille).
CYTOPLASME : couleur, présence, taille, forme et teinte d’éventuelles granulations, présence de vacuoles,
d’éléments phagocytés,…
Identification
Zone d’observation du frottis au fort grossissement : les globules rouges
sont en mono-couche, équidistants les uns des autres ; l’ensemble des
cellules sanguines est dispersée de façon homogène.
Identification Identification
Comptage d’au minimum 100 leucocytes par balayage systématique,
en créneaux, d’un bord du frottis à l’autre, dans la zone de lecture.
En cas d’hyperleucocytose, il est préférable de compter 200
leucocytes.
En situation de leucopénie, compter par petits créneaux sur les bords
du frottis.
Si la leucopénie est sévère, on ne compte pas toujours les cellules
mais on regarde quelle(s) population(s) semble(nt) prédominer.