3éme Année Pharmacie Pharmacologie Professeur Toumi 2010/2011 www.dzpharm.com Notions Générales Introduction : Consiste { l’étude du médicament depuis son administration dans l’organisme jusqu’{ son élimination en passant par l’étape de l’effet du médicament sur l’organe endommagé. Définition du médicament : Le médicament est toute substance naturelle semi-synthétique utilisée dans un but préventif (vaccin), curatif (anti-inflammatoire) ou diagnostique (radio sélectant) à l’égard de la maladie humaine. Classification de la Pharmacologie : - Pharmacologie expérimentale : c’est l’étude du comportement de l’animal dû au nouveau médicament. Pharmacologie clinique : c’est l’étude de nouveaux médicaments sur des sujets volontaires et l’évaluation thérapeutique. Pharmacovigilance : c’est la surveillance des effets indésirables prévisibles ou imprévisibles. Pharmacoépidémiologie : c’est l’étude épidémiologique d’un médicament. Pharmacocinétique : c’est l’étude du sort du médicament dans l’organisme. Pharmacogénétique : c’est l’étude du polymorphisme génétique selon la population étudiée. Pharmacoéconomie : c’est la rationalisation du médicament. Origine des médicaments : Végétale : alcaloïdes (morphine, strychnine). Animale : kinases (urokinase), hormones (GH). Synthétique : synthèse chimique totale (Drug Design), hémi synthèse (pénicilline). Biogénétique : hormones, cytokines (interférons). 1 Les Voies D’administrations I/ Classification : Les voies d’administration sont classées selon qu’il y est présence ou absence de la peau et/ou des muqueuses. Le second critère est en fonction du site d’action et de l’état du malade. II/ Voies avec effraction cutanée et/ou muqueuse : 1- Voies vasculaires : Avec ces voies d’administration, le médicament n’est pas soumis au phénomène d’absorption. Voie d’administration Site de ponction Voie intraveineuse Veine du pli du coude et autres veines (jugulaire, carotide, fémorale, saphène) Voie intracardiaque Au niveau cardiaque Voie intra artérielle Artères accessibles Caractéristique - Biodisponibilité absolue - Action rapide Exceptionnelle - Très dangereuses - Biodisponibilité absolue très importante Forme pharmaceutique Solution liquide stérile apyrogène, limpide { base d’eau ou d’alcool éthylique, de glycérine et/ou propylène glycérol, ne comporte pas de particules Idem Idem 2- Voies extravasculaires : Avec ces voies d’administration, le médicament doit traverser une barrière physiologique, phénomène d’absorption pour atteindre la circulation générale, par conséquence le site d’action. Voie d’administration Site de ponction Cadron superoexterne de la fesse ou d’autres muscles Caractéristique - Biodisponibilité variable - Absorption irrégulière Voie sous-cutanée Au niveau du bras ou de l’abdomen Absorption irrégulière et lente Voie rachidienne Espace intravertébral L3-L5 Absorption très lente Voie intramusculaire Forme pharmaceutique Solution aqueuse ou huileuse limpide stérile isotonique neutre ou en suspension Solution aqueuse ou huileuse limpide et stérile, les suspensions, les implants pellets Substance opaque 2 III/ Voies sans effraction cutanée et/ou muqueuse : 1- Voies à visée systémique : L’effet systémique est obtenu après passage du médicament dans la circulation générale à partir de son site d’administration. Voie d’administration Voie perlinguale Voie orale Voie rectale Site de ponction Application sous la langue Ingestion Application au niveau du rectum Caractéristique Forme pharmaceutique Absorption rapide Comprimés et gélules Absorption variable Absorption variable et irrégulière Forme solide et liquide Suppositoires, lavements, solutions Gaz et substances volatiles Voie pulmonaire Inhalation Absorption rapide Voie percutanée Application sur la peau Absorption lente Patchs, implants 2- Voies à visée locale : Avec ces voies d’administration, le médicament n’est pas résorbé et exerce un effet local. Voie d’administration Site de ponction Voie cutanée Peau Voie oculaire Œil Voie nasale Nez Voie auriculaire Voie vaginale Oreille Vagin Forme pharmaceutique Gels, lotions, crèmes, pommades Collyres, pommades ophtalmiques Gouttes nasales, instillation Gouttes auriculaires Ovules, capsules IV/ Critères de choix d’une voie d’administration : - En fonction du médicament : selon ses propriétés physicochimiques, pharmacocinétiques et pharmacodynamiques (exp : insuline et pénicilline par voie orale) En fonction des effets indésirables Présentation disponible (exp : insuline par voie parentérale) Cout En fonction du malade La localisation de la maladie La rapidité d’action La diffusion du médicament Observance du traitement Facilité de la prise Psychisme de l’être humain Pathologie particulaire Particularité du malade 3 Pharmacologie Expérimentale I- Définition : La pharmacologie expérimentale consiste à sélectionner les molécules présentant une activité pharmacodynamique sur les animaux de laboratoire, ces molécules sont obtenues par synthèse totale ou extraite à partir du règne végétal, animal, minéral. II- Screening : C’est un criblage des molécules par des tests codifiés pour découvrir d’éventuelles propriétés pharmaceutiques et indications thérapeutiques par criblage orienté. III- Classification : 1- Screening Général : C’est une présélection systématique des molécules sur plusieurs tests physiologiques appartenant à plusieurs systèmes : digestif, respiratoire, cardiovasculaire, immunitaire, nerveux… Le screening général présente un rendement faible mais permet de fournir des propriétés pharmacologiques et des tests en série. 2- Screening Orienté : C’est une recherche d’une ou plusieurs activités (indications) définies dans un ou plusieurs domaines (systèmes) { l’aide d’un ou plusieurs tests physiologiques. Exp : recherche de l’activité anti-inflammatoire des dérivés stéroïdiens. Le screening orienté permet l’évaluation de l’activité des molécules préparées dans un but précis. Exp : indication thérapeutique. Ou le rétablissement de la relation chimique / activité pharmacologique dans une série homologuée (validée). IV- Modèle biologique expérimental utilisé : Ce modèle vise { reproduire un effet pharmacologique en dehors d’un sujet original. Classification des différents modèles : Modèles spontanés Mutants pathologiques Modèles expérimentaux Modèles négatifs Culture cellulaire, organes et tissus isolés, œufs embryonés, culture de microorganismes, invertébrés, poissons, mammifères sains ou malades Rat hypertendu Reproduire l’intoxication ou l’infection Etude des éléments de résistance d’animaux insensibles aux facteurs pathologiques pour d’autres espèces 4 V- Notion de finalité d’expérience : Visée globale : évaluation qualitative de l’essai : présence ou absence d’action. Visée pragmatique : évaluation quantitative de l’effet pharmacologique : choix ciblé de l’animal de laboratoire. Visée explicative ou analytique : mise en évidence du mécanisme d’action d’une façon analytique. VI- Exigences expérimentales et contraintes : - Exigence économique Exigence scientifique Exigence pratique et technique Exigence légale et administrative Exigence éthique VII- Composition du modèle dans la recherche pharmacologique : 1/ Modèle utilisant l’animal en entier : L’animal peut être normal ou pathologique, éveillé ou anesthésié. Il existe plusieurs modèles pathologiques induits expérimentalement chez des animaux normaux par des réactifs pharmacologiques ou de l’environnement ou du régime alimentaire Ex : - L’inflammation chez le rat peut être provoquée par l’injection de la caragenine sous l’aponévrose de la patte postérieure - La fièvre peut être induite chez le lapin par injection de peptones de viande - Les réflexes de vomissement peuvent être provoqués chez le chien par administration du sulfate de cuivre par voie orale ou par injection intramusculaire d’apomorphine Le reflex de la toux peut être provoqué chez le cobaye par inhalation d’un aérosol { base d’acide citrique - L’animal est anesthésié dans le cas d’opération chirurgicale pour induire une pathologie Psychotropes Rat, souris, chat, chien, singe Anesthésiques Lapin Analgésiques Rat, souris Antipyrétiques Chèvre, lapin, limule Cardiovasculaires Chat, chien, cobaye, rat Appareil respiratoire Rat Appareil digestif Rat, chien, cobaye, pore Anticancéreux Rat, souris, chien 2/ Modèle utilisant l’organe en question : C’est le modèle intermédiaire entre l’animal entier et la pharmacologie moléculaire (tissu) il permet d’étudier l’effet d’une substance sur ses récepteurs spécifiques présents au niveau de l’organe. Les organes utilisés sont : le cœur, jéjunum, iléon, trachée, utérus d’une ratte gravide … 3/ Modèle utilisant la culture cellulaire : Certaines propriétés pharmacologiques peuvent être étudiées sur les cultures de tissus ce qui limite les massacres inutiles des animaux de laboratoires selon le théorème de DRAIZ L’utilisation de la culture cellulaire permet d’utiliser d’une façon plus précise l’interaction des médicaments avec leurs récepteurs spécifiques. 5 VIII- Différents types de réponse biologique en pharmacologie expérimentale : 1/ Réponse Qualitative : C’est la loi du tout ou rien Ex : Souris présentant ou non des convulsions après injection de pentétrazole, Cobaye présentant ou non un bronchospasme après inhalation d’un aérosol à base d’histamine. 2/ Réponse Quantitative : Est une mesure en fonction de sa durée et de son intensité, La réponse peut être Continue (graduelle) Ex : modification de la pression artérielle après injection de doses progressives d’adrénaline Discontinue lorsqu’elle varie par unité ou fraction d’unité Ex : le nombre de toux chez le chat dont on irrite la voie aérienne avant et après traitement par la codéine IX- Détermination de la dose efficace 50 : La dose efficace 50 est la dose qui inhibe 50% de l’apparition des symptômes pathologiques induits expérimentalement chez l’animal de laboratoire. Le pourcentage d’inhibition = 1/ Exemples de symptômes évalués lors de l’induction de la pathologie expérimentalement : Activité pharmacologique Anti-inflammatoires Antipyrétiques Analgésiques Antitussifs Anti-hypertensifs Symptômes évalués Œdème Température corporelle Perception de la douleur Toux Tension artérielle 2/Détermination graphique : En pharmacologie expérimentale la mise en évidence de l’activité pharmacologique se fait toujours par rapport au lot témoin constitué d’animaux recevant uniquement le véhicule (ex : eau physiologique ou eau distillée). La substance à tester est administrée { différentes doses chez les lots d’essais soit une dose par lot d’animaux. 6 Toxicologie Expérimentale I- Introduction : Les médicaments à usage humain ou vétérinaire présentent une sécurité pour les sujets auxquels ils sont destinés. Cette sécurité est appréciée par les investigations de sécurité de toxicité expérimentale chez l’animal de laboratoire. En effet après la mise en évidence d’une propriété pharmacologique pouvant être exploitée en thérapeutique, la substance est soumise à des études toxicologiques pour apprécier le risque qu’elle présente. Les essais de toxicité expérimentale se divisent en 2 groupes : Les Essais Prérequis : 1- Toxicité aiguë par administration unique 2- Toxicité chronique par administration réitérée 3- Essais de mutagénèse Les Essais Obligatoires : 1- Toxicité chronique par administration réitérée 2- Essais Cancérigènes 3- Essais de la Reproduction Les études de toxicité expérimentale doivent être effectuées selon des protocoles bien établis et réalisées dans des conditions de : - Bonne pratique de laboratoire (BPL) - Bonne pratique d’exécution d’analyses (GBEA) L’évaluation expérimentale de la toxicité globale d’un médicament permet de déterminer la : - Dose maximale tolérée (DMT) - Les organes, les tissus et les cellules cibles - Les fonctions physiologiques altérées - Les risques d’altération génétique et cancérogénèse - Les risques de malformation congénitale II- Essais de toxicité aiguë par administration unique : La détermination de la toxicité permet l’évaluation qualitative et quantitative des phénomènes toxiques et de leur apparition dans le temps suite { l’administration d’une dose unique d’une substance physiologiquement active, cette détermination permet de connaître le niveau des doses pouvant entrainer la mort de l’animal de laboratoire ainsi que les symptômes d’intoxication aiguë. L’essai de la toxicité aiguë est la première étude toxicologique { effectuer pour une molécule dont on ignore la nature de sa toxicité, généralement on détermine 2 grands paramètres, la DMM (dose mortelle minimale) et DM50 (dose mortelle 50) ou DL50 (dose létale 50) 1- Détermination de la DMM C’est la dose minimale de substance capable de tuer un animal par administration intraveineuse lente, la mort de l’animal est appréciée par arrêt cardiaque. La DMM permet { l’expérimentateur de choisir les doses pour déterminer la DM50 (DL50) et DM100 (DL100). 7 2- Détermination de la DM50 ou DL50 : Correspond à la dose capable de tuer dans des conditions déterminées la moitié des animaux mis en expérience d’une même espèce animale. 8