Revue Bio-Africa - n° 8 - 2010, pp. 34-38 © EdUCI 200x bacteriologie COLONISATION DES CATHETERS PAR LE BIOFILM BACTERIEN DANS UN SERVICE DE SOINS INTENSIF A ABIDJAN Boni Cissé C1,2, Méité S1,2, Koffi P3, N’douba Kacou A1,2, Faye Ketté H1,2, Dosso M1,2. Résumé En Afrique et particulièrement en Côte d’ivoire, il existe très peu de données concernant l’étude sur le biofilm. Devant la relation existant entre biofilm et infections nosocomiales, Il apparait important d’étudier le biofilm au niveau des biomatériaux et notamment des cathéters afin de mieux lutter contre les infections acquises en milieu hospitalier. L’objectif de notre étude était d’identifier les bactéries constituant le biofilm et de déterminer leur profil de résistance visà-vis des antibiotiques. Une étude pilote, prospective à visée descriptive qui s’est déroulée du 10 avril au 10 juillet 2009. L’échantillonnage était constitué de 102 cathéters recueillis chez 69 patients hospitalisés dans les services de Réanimation et de Médecine de l’Institut de cardiologie d’Abidjan durant la période d’étude. Les cathéters ont été mis en culture selon la méthode de Brun buisson. L’antibiogramme a été réalisé selon la technique de diffusion en milieu gélosé. Les cathéters périphériques représentaient 78% de l’ensemble des cathéters collectés et 22% étaient des cathéters veineux centraux. Sur un ensemble de 102 cathéters collectés, la culture s’était révélée positive dans 14,7%. Au niveau des cathéters centraux deux profils de résistance étaient observés sur les bactéries isolées. Il s’agissait de S. epidermidis du profil (MetiR, FQR, KTG) et de E. aerogenès du profil(NAR). Au niveau des cathéters périphériques, deux profils de résistance étaient observés sur les bactéries isolées. Il s’agissait de E. coli du profil (Penicillinase TRI ; KTNm) et de A. baumannii du profil(ImpR). Mots-clés : cathéter, biofilm, soins intensifs Abstract In Africa and particularly in Cote d’ Ivoire, there is very little data concerning the study of biofilm. In view of the relationship that exists between biofilm and nosocomial infections, it is important to study the biofilm in biomaterials, especially catheters in other to fight efficiently against infections acquired in hospitals. The aims of this study were to identify the bacteria forming the biofilm and determine their antibiotics resistance profile. This a descriptive study, which was conducted from April 10 to July 10, 2009. A total of 102 catheters were collected from 69 patients hospitalized in the intensive care units of the institute of cardiology of Abidjan (ICA) during the study period. The catheters were cultured using the method of Brun buisson. Antimicrobial susceptibility was performed using the method of agar diffusion. Out of total 102 catheters collected, peripheral catheters accounted for 78%. In the bacteria isolated from central venous catheters two antibacterial profile were observed .They were S. epidermidis of the profile (Meti, R FQR and KTGR) and E.aerogenes of the profile(NaR). From the bacteria isolated from peripheral catheters, two resistance patterns were observed. They were E. coli of the profile (KTNm R pénicillinase TRI) and A. baumannii profile (IMPR). Identify the molecular characterization of bacteria from the biofilm in other to study the mechanisms of resistance especially resistance genes of (IMPR) strain. Key words: catheter, biofilm, intensive care 1- Département de Microbiologie, Université de Cocody, Abidjan, Côte d’Ivoire. 2 - Département de Bactériologie- Virologie, Institut Pasteur de Côte d’Ivoire. 3- Institut de Cardiologie, Abidjan, Côte d’Ivoire UFRCorrespondance : BONI CISSE Catherine /tel. 225 05 08 35 23 E-mail : [email protected] Revue Bio-Africa - n°8- 2010, pp. 34-38 Introduction Le biofilm est un ensemble de microorganismes recouvert par une couche protectrice visqueuse polysaccharidique. Des bactéries, des mycobactéries, des levures, des champignons et des algues peuvent s’y trouver9. En médecine, le rôle du biofilm est établi dans les infections nosocomiales exogènes. Dans ces cas, les biomatériaux tels que les sondes urinaires, les cathéters intraveineux et les pacemakers servent de support. Ainsi, dans l’infection urinaire sur sonde à demeure, une bactériurie se développe chez plus de 25% des patients porteurs d’une sonde urinaire au bout d’environ 7 jours avec un risque journalier croissant de 5%. Après 30 jours, l’infection urinaire est de 100%4,8,15. En France, les infections liées aux cathéters représentent 18 à 25% des infections nosocomiales ; et sont à l’origine de complications infectieuses ou thrombotiques, d’une prolongation du séjour à l’hôpital et de surcoûts hospitaliers16. Cependant, en Afrique et particulièrement en Côte d’Ivoire, il existe très peu de données concernant l’étude sur le biofilm. Devant la relation existant entre biofilm et infections nosocomiales, Il apparait important d’étudier le biofilm afin de mieux lutter contre les infections acquises en milieu hospitalier ; d’où l’intérêt de notre travail. Les objectifs de cette étude sont d’identifier les bactéries constituant le biofilm et de déterminer leur profil de résistance vis-à-vis des antibiotiques. Matériel et méthodes Il s’agissait d’une étude prospective à visée descriptive qui s’est déroulée du 10 avril au 10 juillet 2009. L’inclusion des malades s’est faite dans les services de Médecine et de Réanimation de l’Institut de Cardiologie d’Abidjan (ICA) .L’analyse bactériologique des cathéters s’est effectuée à l’Unité de Bactériologie Clinique du département de Bactériologie et Virologie à l’Institut Pasteur de Côte d’ Ivoire (IPCI). L’échantillonnage était constitué de 102 cathéters recueillis chez 69 patients. Ont fait partie de notre étude les cathéters veineux centraux et les cathéters veineux périphériques, implantés chez tout patient admis dans les services de Réanimation et de Médecine de l’ICA durant la période d’étude. La fiche d’enquête comportait des paramètres liés au porteur du cathéter et des paramètres liés au cathéter. L’analyse bactériologique s’est faite selon la méthode de Brun Buison 3. L’identification bactérienne s’est faite selon les techniques classiques de bactériologie. L’étude de la sensibilité aux antibiotiques a été réalisée selon la méthode de diffusion en milieu gélosé. La lecture et l’interprétation de l’antibiogramme ont été faites selon les normes du CASFM version 20095. Résultats Les données épidémiologiques La tranche d’âge allant de 30 à 50 ans était la plus importante avec 51% suivie de celle de 51 à 80 ans avec 39%. Le sex ratio était de 1,27. Environ 67% des échantillons provenaient du service de Médecine et 33% du service de Réanimation. Les cathéters périphériques représentaient 78% de l’ensemble des cathéters collectés. Le taux de colonisation des cathéters périphériques était de 15% (12/80) et celui des cathéters cen- traux à 13,6% (3/22). Les cultures positives étaient observées dans 66,7% des cathéters provenant de patients de sexe masculin. Les données bactériologiques Sur un ensemble de 102 cathéters collectés, la culture s’était révélée positive dans 14,7 % avec 66,7 % (10/15) de bacilles à Gram négatif, 20% (3/15) de cocci à Gram positif et 13,3% (2/15) de bacilles à Gram positif. Au niveau des bacilles à Gram négatif, l’espèce la plus fréquente colonisation des catheters par le biofilm bactérien.... 35 Revue Bio-Africa - n° 8- 2010, pp. 34-38 a été Acinetobacter baumannii avec 26,5% (Tableau 1). Au niveau des cocci à Gram positif, S. aureus a été retrouvé dans 13,3%. Sur les cathéters centraux, étaient isolées Enterobacter aerogenès (33,3%), Klebsiella pneumoniae (33,3%) et Staphylococcus epidermidis (33,3%). Au niveau des cathéters périphériques Acinetobacter baumannii étaient isolées dans 33,4% suivies de Staphylococcus aureus avec 16,7% (Tableau 2). Les marqueurs de résistance aux antibiotiques Dans 69,2% des souches isolées aucun marqueur de résistance n’avait été observé. 30,8% des bactéries isolées présentaient au moins un marqueur de résistance aux antibiotiques. Une souche de S. epidermidis isolée au niveau d’un cathéter central était à la fois résistante à la méticilline, aux fluoroquinolones et aux aminosides et une souche d’E. coli produisait une pénicillinase et était résistante aux aminosides (tableau 3). La résistance à l’acide nalidixique a été observée pour une souche d’E. aerogenes isolée au niveau d’un cathéter central. La résistance à l’imipenème Au niveau des Non entérobactéries, une souche de A. baumannii isolée au niveau d’un cathéter périphérique était résistante à l’imipenème. Tableau i : Répartition des bactéries isolées selon leur morphologie Morphologie Genre Entérobactéries (n= 4) Bacilles à Gram négatif (N=10) Non entérobactéries (n=6) Cocci à Gram positif (N= 3) Staphylocoques Bacilles à Gram positif (N= 2) Bacillus Espèces E. coli K. pneumoniae E. aerogenes N 1 1 1 % 6,7 6,7 6,7 S. marcesens 1 6,7 Acinetobacter baumannii P. aeruginosa Stenotrophomonas malthophilia S. aureus 4 1 26,5 6,7 1 6,7 2 13,3 S. epidermidis 1 6,7 Bacillus spp 2 13,3 Tableau II : Comparaison des bactéries selon le type de cathéters Bactéries E. aerogenes K. pneumoniae S. epidermidis Acinetobacter baumannii Cathéters centraux N(%) 1 (33,3) 1 (33,3) 1 (33,3) Cathéters périphériques N (%) 4 (33,4) 1(8,3) Stenotrophomonas maltophilia bacillus E.coli P.aeruginosa S.aureus S.marcescens 2 (16,7) 1 (8,3) 1 (8,3) 2 (16,7) 1 (8,3) Boni Cissé C, Méité S, Koffi P et al 36 Revue Bio-Africa - n°8- 2010, pp. 34-38 Tableau III : Répartition des phénotypes de résistance selon les espèces bactériennes. Phénotypes de résistance MetiR FQR KTGR KTNmR pénicillinase TRI NaR IMPR Espèces Staphylocoques S. epidermidis Entérobactéries E.coli E. aerogenes Non entérobactéries A.baumannii % 42,9 28,6 14,4 14,2 Discussion Comme tout matériel implanté, les cathéters ont une propension à se couvrir d’un biofilm, c’est à dire à être colonisés par des germes. Ils peuvent être ainsi le point de départ d’infection locale ou générale dont les conséquences vont retentir sur l’avenir du cathéter ou celui du patient4,12,13. Plusieurs études ont donc été effectuées sur les cathéters aussi bien centraux que périphériques en milieu hospitalier16,10,14. Dans la présente étude, le sexe masculin prédominait et la moyenne d’âge était de 46,4 ans. Selon certains auteurs, 90% des infarctus se voient entre 40 et 60 ans.17. De plus l’infarctus du myocarde serait plus fréquent chez l’homme que chez la femme7. Aussi dans cette étude, l’âge des patients, le sexe masculin, une utilisation intra-cathéter répétée et systématique d’antibiotique durant le cathétérisme ainsi que la durée du maintien du cathéter, augmenteraient le risque de colonisation du cathéter. Ces résultats ont été aussi retrouvés par certains auteurs10,6. Cependant l’utilisation d’antibiotiques intraveineux pendant la durée d’insertion du cathéter est associée à un risque moindre d’infection10. De plus, il existerait un lien entre risque infectieux et durée d’insertion du cathéter qui était de 0,3 à 0,5% par jour-cathéter16. De cette étude, il semble difficile d’incriminer le service, la durée de l’hospitalisation et le type de cathéter comme des facteurs à risque compte tenu de la taille de notre échantillon. Certaines études ont montré que le taux d’infection des cathéters périphériques et celui des cathéters centraux étaient pratiquement identiques16. Concernant le profil microbiologique, une étude réalisée dans un hôpital de Paris SudEst a rapporté S. epidermidis comme première étiologie des infections des cathéters 11. D’après plusieurs auteurs les bactéries des biofilms, isolés sur des cathéters centraux restent pratiquement les mêmes, seuls diffèrent les taux de colonisation16. Concernant la résistance aux antibiotiques, in vivo les antibiotiques ont peu d’effets sur les microorganismes présents à l’intérieur des biofilms car ces derniers agissent comme facteur de résistance ou de protection contre les antibiotiques qui ne réussissent pas à pénétrer ce réservoir 2,18,19,21 . Par conséquent, les marqueurs de résistance aux antibiotiques ne permettant pas d’expliquer à eux seuls la résistance des bactéries présents sur le biofilm, il y a nécessité d’étudier les autres facteurs tels que les facteurs d’adhérence et de virulence. Les infections à BMR entraînent un surcoût (durée de séjour plus longue, coût des antibiotiques, cout des examens) par rapport aux infections à bactéries sensibles1,20. Conclusion Il importe aujourd’hui que le personnel de santé sache prendre en charge un malade porteur de biomatériau tel que les cathéters afin de minimiser les coûts hospitaliers. L’étude sur les biofilms constitue un maillon important dans les mécanismes de survenue colonisation des catheters par le biofilm bactérien.... 37 Revue Bio-Africa - n° 8- 2010, pp. 34-38 des infections nosocomiales. Les données issues de ces études doivent être prises en compte dans la surveillance et la prévention de ces infections. REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1-Astagneau P., COSTA Y., Legrand P. (2009). Maîtrise de la diffusion des bactéries multirésistantes aux antibiotiques. CLIN, Paris. 14-Paul N (2002). Danese Antibiofilm Approaches: Prevention of Catheter colonization Chemistry & Biology, 9:873–880. 2-Belanger S. (2006). 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