Étude de micro-organismes : Bactéries, levures, protistes 1. Suivi de la croissance d’une population de Levures Comptage des levures Une lame KOVA La grille accueille un volume de 0,81µL, chaque case a un volume de 0,01µL. Levure 1 case = 0,01µL Après agitation, prélever une goutte de la suspension de levure, la déposer dans l’espace destiné à cet effet. Au microscope (grossissement x 100), compter les levures présentes dans plusieurs carrés. Calculer le nombre moyen de levures par carré. Pour les levures chevauchant deux carrés, on ne compte que celles disposées sur les côtés inférieurs et droits des carrés afin de ne pas les dénombrer deux fois. Ramener ce résultat au nombre de levures par µL ou mL en tenant compte du volume d’une case de la cellule utilisée. nombre de cellules concentration (g/L) 8,1 0,1 14,6 0,2 14,6 0,3 22,4 0,4 39,3 0,5 49,4 0,6 70,0 0,7 68,8 0,8 80,7 0,9 89,5 1 T itre du g raphique 1,2 1 0,8 c onc entration 0,6 L inéaire (c onc entration) 0,4 0,2 0 0,0 10,0 20,0 30,0 40,0 50,0 60,0 70,0 80,0 90,0 100,0 Suivi de la croissance d'une population de levure par colorimétrie Transmittance = I/IO Absorbance = -logT La relation de Beer-Lambert décrit que, à une longueur d’onde λ donnée, l’absorbance d’une solution est proportionnelle à la concentration des espèces de la solution, et à la longueur du trajet optique (distance sur laquelle la lumière traverse la solution). 2. Diversité des microorganismes Cellules de levure Saccharomyces cerevisiae Microscope optique, état frais, x 1000 Schéma d’une cellule de Levure La Levure, Saccharomyces cerevisiae, est un eucaryote unicellulaire. Manipuler en conditions stériles L’anse PASTEUR ou oëse ou fil ni-chrome La pipette Pasteur Coloration rose Coloration bleu foncé Observation des micro-organismes d'une « infusion » de débris végétaux Extrémité antérieure Vacuole pulsatile cils trichocyste cinétie ectoplasme cuticule Endoplasme (organites de la nutrition) vestibule macronucléus micronucléus membranelle péristome Cytostome = bouche gastriole Vacuole pulsatile Une paramécie (longueur 500µm) Région des cytoproctes Vacuole digestive Extrémité postérieure Divers autres ciliés Stylonichie Colpode Vorticelle Un rhizopode, une amibe