Buisson_Stephanie_2006_memoire - Papyrus

/J,3y.9
Université
de
Montréal
Génération
et
caractérisation
de
racines
transgéniques
de
pomme
de
terre
Sotanuin
tuberoswn
avec
des
niveaux
altérés
de
pyruvate
kinase
cytosolique
Par
Stéphanie
Buisson
Département
de
Sciences
Biologiques
Faculté
des
Arts
et
des Sciences
Mémoire
présenté
à
la
Faculté
des
Études
Supérieures
en
vue
de
l’obtention
du
grade
de
Maître
ès
Sciences
(M.Sc)
en
Sciences
Biologiques
Août,
2006
t,
m’’
o9O’J
OO6
©
Stéphanie Buisson,
2006

:2
Q
Q

Université
de Montréal
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11
Université
de MontréaÏ
Faculté
des Études Supérieures
Ce
mémoire
intitulé
Génération
et
caractérisation
de
racines
transgéniques
de
pomme
de terre
Sotanttm
tttberosttin avec
des niveaux
altérés
de pyruvate
kinase
cytosolique
Présenté
par
Stéphanie
Buisson
a
été
évalué
par un jury
composé
des
personnes
suivantes
Dr.
David
Morse
(IRBV),
Président-rapporteur
Dr.
Jean
Rivoal
(IRBV),
Directeur
de recherche
Dr.
Mario
Jolicoeur
(Ecole
polytechnique,
département
de génie
chimique),
Membre
du jury

111
Résumé
Mon
projet de maîtrise
portait sur la modification
de l’expression
de
la
dernière
enzyme
de
la glycolyse végétale,
la
pyruvate kinase cytosolique (PKc). La PKc
produit
du pyruvate
et de l’adénosine triphosphate
à
partir
de
phosphoenoÏpyruvate
et
d’adénosine diphosphate.
D’après des études de caractérisation
in
vitro,
cette enzyme est
considérée comme une enzyme
clé de la régulation glycolytique et jouerait un rôle
central
dans le contrôle du flux glycolytique.
Nous avons généré une population de clones racinaires de pomme de terre
portant des constructions sens et antisens pour la
pKc. Des analyses d’activité
enzymatiques et des immunobuvardages nous ont
permis d’identifier des clones antisens
ayant des niveaux réduits de PKc. Nous
n’avons pas réussi à générer des clones sur
exprimant la PKc. Une caractérisation
préliminaire
a
permis de montrer qu’une
diminution
de
l’expression de la PKc avait un effet négatif
sur
la
croissance
des
racines.
Mots
clés
Pyruvate kinase cytosolique, glycolyse, régulation,
$oÏanurn tuberosum, racines,
transgénèse.