30 11 16 9h 10h groupe sanguin tagzirt

2016-2017 Immuno-hématologie : Groupes sanguins et règles de transfusions
– UE 7: Sciences biologiques
Immuno-hématologie : Groupes sanguins et règles de
transfusions
Cours complété par les diapos du Professeur.
Semaine : n°13 (du 28/11/2016 au
2/12/2016)
Date : 30/11/2016
Heure : de 8h00 à
9h00
Binôme : n°48
Professeur : Pr. Tagzirt
Correcteur : n°56
Remarques :
- Examen blanc sur moodle avec 20 QCM et 2 questions rédactionnelles
- Heure du vendredi 18 novembre sera rattrapée après les vacances
PLAN DU COURS
I)
Introduction
A)
Historique
B)
Les systèmes de groupes sanguins
C)
Définitions
1)
2)
3)
II)
Groupe sanguin
Antigène
Anticorps
Le système ABO
A)
B)
C)
D)
III)
Généralités
La génétique
Du phénotype au génotype
La transmission
Biochimie
A)
B)
1)
2)
Généralités
Cas particuliers
Les sujets Bombay
Les groupes faibles
IV)
Répartition dans l'organisme
V)
Détermination du système ABO
A)
B)
C)
VI)
Généralités
Épreuve de Beth-Vincent ou globulaire
Épreuve Simonin-Michon ou sérique
Règles de transfusion
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2016-2017 Immuno-hématologie : Groupes sanguins et règles de transfusions
I)
Introduction
A)
Historique
A l'époque de Harvey (1928), on avait découvert la circulation sanguine et les voies intraveineuses. Au fil du
temps, les techniques de transfusion se sont améliorées.
B)
Les systèmes de groupes sanguins
On parle de groupes sanguins, de systèmes sanguins. Le plus décrit est le groupe A,B,O mais il en existe
plus de 33 décrits dans la littérature uniquement pour les GR. On a le système Lewis, Rhésus Kell, Duffy.
Tous ces systèmes sont importants notamment au niveau des transfusions sanguines. Dans certaines
situations, elles sont nécessaires notamment au cours d'une anémie, d'une chirurgie, d'une implantation
rénale ou suite à une greffe de tissus et d'organes.
C'est important dans la prévention des incompatibilités foeto-maternelles
C)
Définitions
1)
Groupe sanguin
Ensemble des antigènes allotypiques sur une membrane du GR et dont le type est génétiquement déterminé.
2)
Antigène
Ce sont des molécules spécifiques qui se présentent à la surface du GR. Elles sont membranaires. Les antigènes
sont présents à la surface des membranes des GR. Ils sont capables de provoquer une réponse immunitaire. Plus un
antigène est immunogène, plus le risque d'apparition d'anticorps dirigés contre lui est élevé.
3)
Anticorps
Ils sont circulants : présents dans le plasma ou le sérum. Ce sont des immunoglobulines produites par le système
immunitaire qui peuvent se lier à des antigènes de surface. On parlera d'interactions spécifiques entre les antigènes
et les anticorps.
Les propriétés des AC dépendent du système où les anticorps se trouvent. On a différents anticorps :
–
Les anticorps naturels, ils existent en absence de toute stimulation antigénique
–
Les anticorps induits, ils font suite à une simulation d'un antigène étranger.
Exemple : suite à une erreur de transfusion, d'une infection chronique, la vaccination.
Ces AC peuvent être réguliers ou irréguliers.
Ils sont capables de se fixer sur un antigène spécifique pour former un complexe anticorps-antigène. On a des
anticorps anti-A et anti-B pour le système ABO.
II)
Le système ABO
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A)
Généralités
Le système ABO est découvert en 1901 par Karl Landsteiner. Il prenait le sang de différents patients et les
mélangait. Certains mélanges présentaient des agglutinats. D'autres mélanges n'avaient pas d'agglutination. Cette
technique est encore utilisée pour la transfusion et la transplantation.
Le système ABO est basé sur la présence ou l'absence des antigènes A et B à la surface des membranes. Par
convention : le groupe sanguin ABO est défini par le ou les AG présents à la surface des GR :
–
l'antigène A → groupe A.
–
Un antigène B → groupe B.
–
Un GR qui présente les deux antigènes → groupe AB
–
S'il y en a aucun → groupe O.
Il existe 4 groupes : A, B, O, AB
Groupe A
B)
Groupe B
Groupe AB
Groupe O
La génétique
Il existe 3 allèles A, B, O.
Les allèles A et B ont une homologie importante (99%), la différence se fait uniquement sur 4 AA. L'allèle O code
pour une protéine tronquée, non fonctionnelle. Elle est de type récessive.
Les allèles A et B sont codominantes. Si le sujet a les deux, les deux vont s'exprimer. Ils sont dominants sur O. Il
existe 4 phénotypes : A, B, AB et O qui correspondent à 6 génotypes :
–
AA → Groupe A
–
AB → Groupe AB
–
BB → Groupe B
–
BO → Groupe B
–
AO → Groupe A
–
OO → Groupe O
C)
Du phénotype au génotype
A partir du phénotype on ne peut pas toujours déduire le génotype. Un patient du groupe A peut être soit AA soit
AO. Mais on peut toujours passer du génotype au phénotype : si un patient possède le génotype AO, il sera
forcément du groupe A.
D)
Transmission des groupes sanguins ABO
On a un père de type A, de génotype AO et une mère de génotype BO : les enfants seront à 25% AB, 25% AO,
25% B ou 25% de type O.
III)
Biochimie
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A)
Généralités
Les AG ne sont pas les produits primaires des gènes ABO. On a un intermédiaire. Les produits des gènes sont des
enzymes : glycosyl transférase.
Les antigènes sont des sucres terminaux de chaînes glycolipidiques ou glycoprotéines fixées sur un sucre qui sera
le fucose et correspond au gène H ou substance H.
Les gènes A et B codent pour des enzymes qui entraînent la formation des antigènes A et B. Ces antigènes vont
être associés au gène H.
L'enzyme qui code pour le gène H est une glycosyl transférase : fucosyl-transérase. Il permet d'accrocher un
fucose sur une substance de base à la surface des GR.
Pour le gène A, c'est un autre sucre et c'est l'enzyme N- acétyl galactosamine transférase. Il accroche un N acétyl
galactosamine sur la substance H. Ca permet de former l'antigène pour le groupe A.
Pour le gène B, c'est la D-galactose transférase qui accroche le D-galactose sur la substance H.
Si un sujet présente les deux enzymes, ça permettra la formation des antigènes de groupe A et B, c'est un
patient de type AB. Un patient de groupe O aura uniquement le fucose.
Résumé : (A savoir par cœur)
Gène
Groupe
Enzyme
Sucre immunodominant
O
O
Fucosyl transférase
Fucose (substance H)
A
A
N-acétylgalactosamine-transférase
N-acétylgalactosamine
B
B
D-galactosyl transférase
D-galactose
B)
Cas particuliers
1)
Sujets Bombay
Le premier cas particulier a été découvert en Inde à Bombay.
Le fucosyl transférase permet d'accrocher la substance H. Au niveau du gène H, on a 2 types d'allèles :
–
un H dominant (H)
–
un H récessif (h)
Ces sujets de type Bombay ont 2 allèles récessifs. Ces patients ne vont pas présenter de fucosyl transférase et de
substance H. S'ils n'ont pas de substance H, ils ne peuvent pas être considérés comme O. Ils ne peuvent pas
recevoir de sucre terminal des gènes A et des gènes B. Avant, on pensait qu'ils étaient de groupe O, mais ce n'est
pas le cas car ils n'ont pas la substance de base.
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Concernant la transfusion, ces patients ne peuvent pas recevoir de sang de groupe A ou B ni de groupe O. Ils ne
peuvent recevoir que du sang Bombay. On a eu de nombreuses erreurs de transfusion.
2)
Groupes faibles
L'expression de certains AG notamment A est faible.
Dans l'allèle de type A. on a :
–
un allèle dominant 80% : allèle de type A1
–
un allèle de type A2 : 20% .
On a une différence qualitative et quantitative.
Il y a une différence structurale. L'allèle A2 présente une délétion d'un nucléotide au niveau de son extrémité N
terminale. Les patients ayant des allèles de type A2 vont coder moins d'antigènes A que les allèles de type A1.
S'ils codent moins d'antigènes, tous les sites de substances H ne seront pas couverts par les antigènes de groupe A.
Donc les sites de groupe H libres seront plus importants. La performance de l'enzyme A2 sera moins importante
par rapport à l'enzyme A1.
Lorsqu'on veut faire des réactions pour déterminer le groupe sanguin, la réactivité du groupe A2 est plus faible.
Cela peut entraîner des difficultés de groupage.
IV)
A)
Répartition dans l'organisme
Les antigènes
Les antigènes A et B sont présents dans tous les tissus sauf au niveau des cellules nerveuses, de l'os et de la cornée.
Les greffes de cornée n'entraînent pas de complication, pas de rejet systématique.
Ces AG de type A et B sont nombreux au niveau des liquides biologiques : salive, plasma. Ils sont présents sous
forme soluble pour 80% des sujets. 20% des sujets sont non sécréteurs. La sécrétion de la forme soluble est
contrôlée par le gène Se (dominant) et se( récessif). Le sujet est sécréteur quand le gène Se est présent. Dans 80%
des cas, on peut trouver le groupe sanguin avec la salive.
Les substances H, A et B sont largement réparties dans la nature : bactérie, cellules végétales.
Certaines situations pathologiques présentent certaines modifications acquises des antigènes A et B au cours des
myélodysplasies et des leucémies aiguës. On a une perte des antigènes à la surface des hématies.
B)
Les anticorps
Ils sont plasmatiques. Dans le système ABO, les anticorps correspondant aux antigènes absents de la surface
de l'hématie sont toujours présents dans le sérum. Ce sont des anticorps naturels.
Un patient de groupe A présente à sa surface des antigènes de type A. D'un point de vue du génotype, il est soit
AA soit AO. Il présente des anticorps anti B.
Pour le groupe B, il a des anticorps de type anti-A.
Pour le groupe AB, il n'a pas d'anticorps.
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Dans le groupe O, il a des anticorps anti-A et anti-B.
Ces anticorps apparaissent de manière spontanée et sont de types réguliers. Ils sont présents de façon constante et
sont toujours retrouvés en fonction de l'absence d'antigène.
Ces anticorps peuvent apparaître secondairement à la stimulation antigénique de l'environnement (ex : bactéries,
flore intestinale). Chez les nouveaux-nés, les anticorps ne sont pas présents avant l'âge de 3 ou 6 mois. Les
nouveaux-nés ont un groupage sanguin provisoire à cause de l'immaturité des AG et des AC.
Ces anticorps sont de type IgM. Ces IgM ne traversent pas la barrière foeto-placentaire. Ils sont agglutinants, ils
permettent d'agglutiner les GR en milieu salin et à température ambiante. Ils sont spécifiques à un antigène donné.
Ils sont dits hémolysants. Lorsque l'anticorps se lie à l'antigène correspondant, il est capable d'induire la lyse du
GR et donc être responsable d'accidents hémolytiques de transfusions. La prévention est de transfuser uniquement
dans le système ABO compatible.
V)
Détermination du système ABO
A)
Généralités
La répartition géographique de ces groupes est variable. Le groupe B est surtout présent en Asie. Le groupe A est
essentiellement au niveau de l'Europe et le bassin méditerranéen. Le groupe 0 est en Amérique latine. En France, le
groupe dominant est le groupe A à 45% et le groupe O à 43%, les plus rares sont les sujets du groupe AB.
Intérêts :
–
Transfusion sanguine pour éviter accident hémolytique
–
Transplantation rénale
–
Suivi des femmes enceintes
–
Recherche des anémies hémolytiques auto-immunes (AHAI)
–
Recherche de paternité
Les erreurs liées à une mauvaise transfusion sont rares. Une erreur de transfusion dans le système ABO peut tuer :
2 erreurs mortelles par an en France.
La détermination du système ABO est toujours réalisée par 2 méthodes :
–
Épreuve globulaire ou de Beth-Vincent : déterminer les AG présents à la surface du GR
–
Épreuve sérique ou de Simonin-Michon : déterminer les AC naturels sériques
→ Il faut absolument une concordance entre les 2 épreuves.
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La détermination définitive du phénotype ABO nécessite obligatoirement les 2 épreuves sur 2 prélèvements
différents. Chacun examiné par 2 techniciens différents (sauf si automates) à des temps différents.
Le sang est anti coagulé avec du citrate ou l'EDTA. Ce prélèvement sanguin est centrifugé pour séparer le plasma
des cellules. Au niveau du sérum on trouve de nombreuses protéines avec les AC du groupe sanguin.
B)
Épreuve de Beth-Vincent ou globulaire
Elle nécessite l'utilisation des GR du patient + ajout d'anticorps anti A, anti B ou anti AB connus et si possible anti
H pour les sujets Bombay. Si on a une agglutination entre le GR du patient et les anticorps déterminés, on a
présence des antigènes sur le GR du sujet.
C)
Épreuve Simonin- Michon ou sérique
Elle permet de mettre en évidence les anticorps du patient. Elle nécessite l'utilisation du sérum du patient qui
contient des anticorps ou non. On met les anticorps en contact avec des GR tests de type A, B ou O.
S'il y a une agglutination, on a présence de l'anticorps dans le sérum du sujet.
Une réaction d'agglutination est caractérisée par la réunion en amas « agglutinats » d'antigènes particulaires ou
cellulaires après fixation d'anticorps agglutinats.
Les agglutinats peuvent être visualisés à l’œil nu.
Agglutination
Pas d'agglutination
Exercice : Pour déterminer le groupe sanguin, on réalise les deux épreuves
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–
On a un sujet chez qui on a fait une épreuve globulaire. Le patient présente des antigènes de type A car il réagit
avec les anticorps anti-A et aussi quand on met les anticorps anti A et anti B. On prend son sérum. Le patient
présente des anticorps de type anti B. Le patient est de groupe A.On valide cette détermination.
–
Le patient présente des antigènes de type B et des anticorps de type anti A. Le patient est de groupe B.
–
Le patient présente des hématies de type AB. Il y a une absence d'anticorps. Le patient est de groupe AB.
–
Le patient n'a pas d'AG sur ses hématies. Pour le second test, il a des anticorps anti-A et anti-B. Il est de
groupe O.
Il faut des témoins négatifs obligatoires :
–
Témoin auto : GR à tester + sérum à tester
–
Témoin AB : Sérum AB + GR à tester
–
Témoin « allo » : GRO + sérum à tester
VI)
Règles de transfusion
–
Un patient de groupe O peut recevoir du sang de groupe O.
–
Un patient de groupe B peut recevoir du B
–
Un patient de A peut recevoir du A
–
Un patient AB peut recevoir du AB.
Les sujets de type AB sont receveurs universels car ils n'ont pas d'anticorps. Au niveau de la transfusion on donne
des GR et pas de sérum.
Les sujets de type O sont donneurs universels car il n'y a pas d'antigènes de surface qui peuvent être reconnus par
le receveur.
Lorsqu'on fait une transfusion, il y a toujours des vérifications effectuées en amont sur le receveur et la poche de
sang à transfuser. On a une vérification ultime au lit du patient obligatoire et réglementaire fait juste avant la
transfusion. On vérifie l'identité du patient, sa date de naissance et la compatibilité du patient avec la poche de
sang à transfusée. On met dans une case le sang du patient, dans une autre le sang de la poche. Il doit y avoir une
concordance totale entre les deux colonnes.
Exemple : Réaction négative d'antigène A pour le patient. Réaction positive pour le culot. Le patient est de groupe
O. La poche est de groupe A. On ne peut pas transfuser la poche de sang chez le patient. On parle
d'incompatibilité entre ces 2 phénotypes.
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