8-L’organisateur de Spemann Dorsalisation du mésoderme et induction neurale Expérience de Spemann : Interactions DMZ/mésoderme et ectoderme Dorsalisation du mésoderme Expérience de recombinaison DMZ/VMZ Rôle des protéines noggin et chordin antagonistes de BMP4 Rôle de frizbee, antagoniste de Xwnt8 Neuralisation de l ’ectoderme BMP4, inducteur d ’épiderme noggin et chordin antagonistes de BMP4 L’organisateur de Spemann est induit par le centre de Nieuwkoop au cours de l’induction mésodermique L’induction neurale fut démontrée par l’expérience de Spemann et Mangold en 1924 Einsteck method 8-L’organisateur de Spemann Dorsalisation du mésoderme et induction neurale Expérience de Spemann : Interactions DMZ/mésoderme et ectoderme Dorsalisation du mésoderme Expérience de recombinaison DMZ/VMZ Rôle des protéines noggin et chordin antagonistes de BMP4 Rôle de frizbee, antagoniste de Xwnt8 Neuralisation de l ’ectoderme BMP4, inducteur d ’épiderme noggin et chordin antagonistes de BMP4 Expérience de démonstration de la dorsalisation 8-L’organisateur de Spemann Dorsalisation du mésoderme et induction neurale Expérience de Spemann : Interactions DMZ/mésoderme et ectoderme Dorsalisation du mésoderme Expérience de recombinaison DMZ/VMZ Rôle des protéines noggin et chordin antagonistes de BMP4 Rôle de frizbee, antagoniste de Xwnt8 Neuralisation de l ’ectoderme BMP4, inducteur d ’épiderme noggin et chordin antagonistes de BMP4 Les ARNm de Noggin et Chordin sont synthétisés en réponse au facteur de transcription Siamois Ils sont également régulés positivement par les facteurs de croissance Xnr1,2,4 (mais pas par Xnr3). Les deux voies VegT et β-cat régulent donc en synergie, l’ l’expression de Noggin et Chordin. Chordin. L’expression de Noggin et Chordin se confond Avec la lèvre dorsale du blastopore, là où se situe L’organisateur de Spemann Régulation de la dorsalisation par Chordin et Noggin Liaison moléculaire directe avec BMP4 Concentrations intercellulaires de Chordin jusqu’à 10000 fois supérieure à celle de BMP4 Constantes d’affinité différentes pour BMP4 Noggin: 300pM ( 15 fois supérieure ) Chordin: 20pM L’injection d’ARN antisens de Chordin au stade 0 entraine l’expansion du mésoderme latéroventral dans la ZMD au stade gastrula L’injection en excès de la protéine BMP4 au stade 0 cause la ventralisation de l’embryon semblable à celle obtenue par les RUV 1/2 heure après la piqûre du spermatozoïde Les signaux dorsalisants Modèle des interactions entre BMP4 et les facteurs diffusibles de l’Organisateur dans l’ensemble de l’embryon DOS Dorsal:……… Dorsal:……….. la Chorde Dorsolatéral: Dorsolatéral:…..les ..les somites Latéral: ……….. le pronéphros ………..le Ventrolatéral: Ventrolatéral:….les lames latérales Ventral: ……….. les ilots sanguins ………..les VENTRE Au niveau de la zone marginale, ces interactions déterminent l’ l’ordre des dérivés mésodermiques depuis la chorde dorsale jusqu’ jusqu’aux cellules sanguines ventrales. 8-L’organisateur de Spemann Dorsalisation du mésoderme et induction neurale Expérience de Spemann : Interactions DMZ/mésoderme et ectoderme Dorsalisation du mésoderme Expérience de recombinaison DMZ/VMZ Rôle des protéines noggin et chordin antagonistes de BMP4 Rôle de frizbee, antagoniste de Xwnt8 Neuralisation de l ’ectoderme BMP4, inducteur d ’épiderme noggin et chordin antagonistes de BMP4 La dorsalisation du mésoderme latéral est donc régulée par un double système d’interactions cellulaires et moléculaires où l’Organisateur apparaît comme un inhibiteur de signaux ventraux. Des signaux antériorisants complètent les signaux dorsalisants. Ex: le gène Goosecoid Goosecoid marque le mésoderme antérieur (le mésenchyme céphalique de la carte des territoires présomptifs). Il contribue à réguler négativement l’ l’expression de XWnt8 dans la zone marginale dorsale. L’injection ventrale au stade 0, des ARNm de Goosecoid, induit la formation d’une deuxième encoche blastoporale à l’opposé de la première Otx: Orthodenticle like gene; MyoD: Myogenic Determinant