S1_2.2_1.2 Génétique cours 2 Bernard Grandchamp 1.Transmission des caractères (lois de Mendel) 2.liaison génétique 3.Polymorphisme 4.Cartes génétiques 5.identification des gènes 1.Transmission des caractères (lois de Mendel) Gregor Johann Mendel, 1865 Pisum sativa Transmission d’un caractère Lignées parentales F1 F2 Première loi de Mendel: transmission d’un caractère JJ jj J j Jj Jj J/j J est dominant sur j J j J JJ j Jj Jj jj ségrégation de 2 caractères indépendants • En F1 Mendel observe la disparition de 2 caractères parentaux • En F2 Mendel observe la réapparition des 2 caractères disparus chez 6 % des descendants (1/16) 2.liaison génétique liaison génétique Liaison génétique Hérédité chromosomique Thomas Hunt Morgan 3.Polymorphismes Polymorphisme des Phénotypes environnement AGTCGGTAGCAGTAGATAATG Polymorphisme des Génotypes AGTCGGTAGCGGTAGATAATG Marqueurs génétiques • Polymorphismes de l’ADN, généralement neutres • Permettant de distinguer des allèles: – SNPs (polymorphismes de substitution d’un nucléotide) – Microsatellites LES MICROSATELLITES Il s'agit de séquences d'ADN constituées de motifs répétés de 2, 3 ou 4 nucléotides : 9 répétitions (CA) Allèle 1 …AGCCCTCAGGCACACACACACACACACAGTTTCCAGTTGA… Allèle 2 13 répétitions (CA) …AGCCCTCAGGCACACACACACACACACACACACACAGTTTCCAGTTGA… Allèle 3 11 répétitions (CA) …AGCCCTCAGGCACACACACACACACACACACAGTTTCCAGTTGA… LES MICROSATELLITES Chromosome Amorces spécifiques d’un locus CACACACACACA Fragments d’ADN amplifiés 1 2 3 4 5 Grands Électrophorèse Petits Recombinaison meïotique Absence de recombinaison entre A et B Gamètes parentaux recombinaison entre A et B Gamètes recombinés Analyse de ségrégation Soit 2 marqueurs biallèliques (Aa pour M1 et Bb pour M2). Il y a 4 combinaisons possibles de ces allèles parmi les gamètes transmis par un individu : AB, Ab, aB et ab. 2 situations possibles : – M1 et M2 sur des chromosomes non homologues (pas de recombinaison possible) mais ségrégation indépendante A a B b 4 types de gamètes qui ont la même probabilité (25 %) d’être transmis – M1 et M2 sur le même chromosome : 2 cas selon les combinaisons des allèles sur les chromosomes de la paire (= phase) A et B situés sur le même chromosome (couplage) A B a b A B a b A b a B production de 4 types de gamètes: •gamètes parentaux (A,B et a,b) •gamètes recombinés (A,b et a,B) Fraction de recombinaison θ = distance génétique Distance génétique en cM(organ)= % de gamètes recombinés • A et B situés chacun sur les chromosomes différents de la paire (répulsion) A b a B A b a B A B a b • production de 4 types de gamètes: – gamètes parentaux (A,b et a,B) – gamètes recombinés (A,B et a,b) locus sur des chromosomes différents Chromosome 1 A B a b 2n n n Chromosome 5 méiose A B A 25% a b 25% b 25% a n B 25% n Deux locus sur le même chromosome A B a b A B Co a 2n Gamètes parentaux n n A B b méiose Gamètes recombinés A ??% a b ??% b ??% a n B ??% n Le pourcentage de gamètes recombinées dépend de la fréquence de recombinaison La distance génétique entre deux sites est dépendante de la fréquence des crossing-over. Trois exemples: Indépendance génétique Liaison génétique: 0 cM Liaison génétique: 13 cM Indépendance génétique A B Co a b Gamètes parentaux A B Gamètes recombinés A 25% a b 25% b 25% a B 25% Liaison génétique (0 cM) A B a b Gamètes parentaux ⇒Pas de crossing overs A B Gamètes A B 50% ⇒Pas de gamètes recombinés (0%) a b Gamètes a b ⇒Distance = 0 cM 50% Liaison génétique (13 cM) A B a b Gamètes parentaux A Gamètes A B a Gamètes a b B 173 b 175 Gamètes recombinés A Gamètes A b a Gamètes a B b 28 B 24 Liaison génétique (13 cM) n= 400 Gamètes parentaux: AB = ab = 173 175 Gamètes recombinés: a B = 28 A b = 24 %Rec = (28 + 24 / 400 ) X 100 = 13% d (A, B) = 13 cM Θ =0,13 4.Cartes génétiques Cartographie génétique chez l’homme: Étude de grandes familles 1- génotypage de tous les individus pour déterminer les allèles présents pour les marqueurs étudiés chez ces individus. 2- calcul des fréquences de recombinaison entre les marqueurs CARTE GÉNÉTIQUE identification des gènes Localisation par la liaison génétique Analyse de ségrégation • Peut-on expliquer la manière dont la maladie se répartit à l’intérieur des familles ? • Peut-on mettre en évidence l’effet d’un gène (dit « gène majeur ») et caractériser cet effet (correspondance phénotype-génotype) ? Analyse de liaison Phénotype observé Génotype locus D(isease) déduit Génotype locus M(arqueur) observé Liaison Distance Génétique Etudes de liaison: observation des méioses dans des familles, analyse de la ségrégation de deux locus d’une génération à la suivante Informations obtenues: -Existence d’une liaison entre un marqueur génétique et un locus morbide -Estimation de distance génétique entre un marqueur génétique M et un locus impliqué dans une maladie D -Recherche sur l’ensemble du génome: pas d’hypothèse à priori sur le locus D en cause On étudie des marqueurs répartis sur l’ensemble du génome Le gène de la maladie: m , + Le marqueur moléculaire rs12: 1 , 2 rs12: rs12: m/+ 2/2 m/+ 1/2 +/+ 1/2 m/+ 1/2 +/+ 2/2 m/+ 2/2 +/+ 2/2 m/+ 1/2 Y a t-il co-ségrégation entre les marqueurs moléculaires et le gène de la maladie? Le gène de la maladie: m , + Le marqueur moléculaire rs56: 1 , 2 rs56: rs56: m/+ +/+ 1/2 2/2 m/+ m/+ +/+ m/+ +/+ m/+ 2/2 2/2 1/2 2/2 1/2 2/2 Y a t-il co-ségrégation entre les marqueurs moléculaires et le gène de la maladie? • Principe du maximum de vraisemblance – on calcule la vraisemblance des observations familiales sous différents modèles – Vraisemblance d’une observation= probabilité d’une observation sous l’hypothèse considérée Succès de la génétique « positionnelle » par étude de liaison • 1989: identification du gène en cause dans la mucoviscidose • Depuis: identification des gènes dans plusieurs centaines de maladies monogéniques • Limites: taille des familles, hétérogénéité de locus • Complémentarité des approches (liaison, gène candidat, séquençage du génome) Application diagnostique de l’analyse de liaison m/+ +/+ 1/2 2/2 rs 56 m/+ 2/2 m/+ 2/2 +/+ 1/2 m/+ 2/2 1 2 +/+ 1/2 m/+ 2/2 ?/+ 1/2 + CO m Si la mutation est à 0 cM du site polymorphe rs 56 => L’enfant n’est pas porteur de la mutation Si la mutation est à 2 cM de rs56 => 2% de risque d’être malade