Suivi de protéines fluorescentes en Time Lapse chez la bactérie E. coli

Suivi de protéines fluorescentes en
Time Lapse chez la bactérie
E. coli
JérômeRech
SylvainCantaloube
Seignosse–30septembreau7octobre2016

Laségrégationdumatérielgénétique
ChezlesbactériesChezleseucaryotes
Mitose Partition
5µm

Pourlesplasmidesàbasnombredecopies:besoind’unsystèmedepartitionactif
lesloci par(=opéronsop chezleminiF d’E.coli)
Lesloci par sontcomposésde3éléments:
Uneséquencecentromérique :parS (sopC)
Deuxgènesquicodent: uneprotéinemotriceA(NTPase):ParA (SopA)
uneprotéineBquisefixespécifiquementau
centromère:ParB (SopB)
Lapartition
sopC
sopB
sopA
sop Psop sopC
sopB
sopA
sop Psop
1µ

sopC
sopB
sopA
sop Psop sopC
sopB
sopA
sop Psop
sop sop+
FROS:tetO/TetR‐Gfp
Nécessaire etsuffisant pourlaségrégation duminiF (lowcopynumber)
SystèmedepartitionduminiF d’E.coli

sopC
sopB
sopA
sop sopC
sopB
sopA
sop
- is a very weak ATPase, activated by DNA, ParB and the centromere
- binds DNA, ATP-dependent
- forms protopolymers, ATP-dependent and stimulated by ParB
- conformational changes induces by adenine nucleotide binding, DNA and ParB interactions
SopA:
- centromere binding protein
- modulates all the activities of ParA
SopB:
(Leonard et al. 2005; Bouet et al. 2007; Hester & Lutkenhaus, 2007; Castaing et al. 2008)
(Davis et al, 1992; Ah-Seng et al. 2009)
(Barilla et al. 2005; Lim et al. 2005; Bouet et al. 2007)
- centromere-like site, composed of several repeats of 16-bp
sopc:
Propriétésbiochimiquesetactivitésde
sopA &sopB