Le clonage chez les animaux de sport : le cas particulier du cheval Gestion des ressources animales : Celli Marie Graff Sophie Chauffray Camille Olivier Laurent Franzon Robin Historique de la sélection reproductive ⇒ ⇒ ⇒ ⇒ ⇒ ⇒ ⇒ ⇒ Premiers registres montrant une formalisation de la sélection des animaux date XVIe siècle avant JC. Sélection moderne : basée sur des outils statistiques appliqués aux notions génétiques. Ces méthodes d’analyses sont utilisées pour évaluer l’héritabilité de certains critères chez les animaux de sports (course, saut d’obstacle, dressage…). On se base notamment sur : la race, le sexe, l’anatomie, la performances et la régularité des animaux. Création des studbook: http://www.sbsnet.be/index_1024.htm La génétique ayant évoluée : réalisation du mapping du génome des chevaux de sport afin de favoriser la reproduction des animaux ne présentant pas de tares génétiques Malgré cette sélection les résultats obtenus restent souvent variables. Le clonage serait-il donc une méthode révolutionnaire pour „obtenir un crack à tous les coups” ? Heritability of jumping ability and height of pony breeds in France, Livestock Production Science, 2004, 89, 243-251 Inheritance of racing performance of Thoroughbred horses, Thiruvenkadan et al., Livestock Science, July 2008, vol 121, p 308-326 Historique du clonage - Définition: « Technique permettant d'obtenir en laboratoire des lignées de cellules ou des embryons à partir d'une cellule, sans qu'il y ait fécondation. » (Larousse) - Dates clés: - 1903 première notion de « clones » par le botaniste H.J. Webber pour désigner la reproduction asexuée des plantes. Nombreuses autres expériences sur les végétaux en particulier F.C Steward carotte (années 1950) - 1952 R. Briggs et T. King: cellules animales peuvent êtres totipotentes. Transfert de noyaux à partir de cellules embryonnaires (têtard) dans cellules énuclées (grenouille). premiers animaux clonés officiellement. - 1996 Naissance de Dolly premier mammifère obtenu par transfert de noyaux de cellules adultes ( =/= séparation des cellules d'un embryon < 1996 ) Campbell N, Reece J, Biologie, 7ème édition, 2007, Pearson Education, p453-455 http://www.larousse.fr/encyclopedie/divers/clonage/34605 http://www2.cnrs.fr/journal/2953.htm Historique du clonage - Équidés (7ème mammifère cloné): - 2003 Clonage des premiers équidés (Woods & Co) = 3 Mules grâce à la technique du transfert d’embryon reconstruit = transfert d’un embryon maturé in-vivo au stade 1 cellule vers l’oviducte de la jument réceptrice. Clonage de la première Jument (Galli, Lagutina, Hinrichs) : technique différente: procédure in-vitro: culture d’un oocyste jusqu’au stade blastocyste (stimulation biochimique), puis implantation chez la mère réceptrice. - 2005 Clonage du premier poulain conçu à la demande du propriétaire de l’animal donneur (Hinrichs ). Technique légèrement différente: - fusion mécanique noyau/cellule énuclée (=/= électrique). - nouvelle méthode biochimique de stimulation du développement embryonnaire. Études en cours : fécondation in vitro + développement Blastocyste. http://www.cryozootech.com/index.php?m=Chevaux%20clon%E9s&d=paris_texas C. Galli, I. Lagutina, R. Duchi, S. Colleoni, G. Lazzari, Somatic Cell Nuclear Transfer in Horses, Reprod Dom Anim 43 (Suppl. 2), 331–337 Le clonage : applications chez le cheval de sport Dans quel but les chevaux de sport sont-ils clonés ? Obtenir la copie d'un cheval d'exception ● Obtenir des descendants chez un hongre ou chez un animal qui présente des problèmes de fertilité (cheval âgé) ● Augmenter le nombre de descendants possibles d'une jument (amélioration génétique) ● Quelles sont les limites de ces applications ? → possibilité d'inscrire les clones et leurs descendants aux stud book S et AES, ce qui leur fournit un passeport et leur permet de participer aux compétitions officielles (jumping, dressage, endurance) → MAIS non inscriptibles dans tous les stud book et interdiction de participer aux compétitions spécifiques à certaines races (Courses pour les Pur Sang ; Trot pour les trotteurs, concours de morphologie du Pur Sang Arabe) CRYOZOOTECH (en ligne) (2013) Adresse URL http://www.cryozootech.com/index.php?m=Applications&d=Applications Consulté le 26 Novembre 2013 LES HARAS NATIONAUX (en ligne) (2013) Adresse URL http://www.haras-nationaux.fr/information/accueil-equipaedia/reproduction/techniquesde-reproduction/clonage-equin.html Consulté le 26 Novembre 2013 La théorie… • 2 lignées cellulaires : somatiques et germinales ; toutes les deux contiennent l’équipement génétique complet. • Difficulté: le réveil des cellules différenciées : plus elle sont « agées », plus leur noyau revient difficilement à l’état de totipotence. • Ovocyte : seul un cytoplasme ovocytaire est équipé pour réguler correctement un programme génétique et en assurer l’exécution. (*) • Les cellules dont le noyau va être utilisé: • Cellules qui doivent revenir facilement à l’état totipotent < cellules embryonnaires. • Cellules dont l’activité mitotique est intense < cellules de la glande mammaire, fibroblastes,.. • Le clone sera identique génétiquement… oui mais… qu’à 98- 99%. En effet, 1-2% de génome provient des mitochondries. Or l’ADN mitochondriale est donné par la mère. Impact sur la capacité sportive ? Le Moigne A, Foucrier J, Biologie du développement, 5ème édition, 2001, Dunod, p305 (*) Slack J, Biologie du développement, 2004, de Boeck Campbell N, Reece J, Biologie, 7ème édition, 2007, Pearson Education, p453-455 … La pratique Cheval que l’on veut cloner Jument donneuse d’ovocytes Fibroblastes < peau Ponction du noyau de l’ovocyte Electrofusion Culture de fibroblastes, 2-3 semaines Cytoplasme et ZP ovocyte Ny fibroblaste Culture in vitro du jeune embryon pendant 7 jours Implantation de l’embryon dans l’utérus d’une jument receveuse 7ème - CAMPBELL N, REECE J, Biologie, édition, 2007, Pearson Education, p453 - http://www.haras-nationaux.fr/information/accueilequipaedia/reproduction/techniques-de-reproduction/clonage-equin.html Poulain identique génétiquement au cheval donneur de fibroblastes Génétique : Création de banques de gènes pour le clonage: ⇒Société Française : ⇒Aux USA : Via Tech (Texas) ⇒ Procédé : biopsie, mapping, culture des cellules et conservation (paillettes congelées) ⇒ Ces banques proposent plusieurs possibilités: Qu’un propriétaire fasse une mise en banque de cellule de son propre animal D’acheter des gènes de chevaux d’exception : niveau olympique ou mondial ⇒ Critique : pas vraiment de critères de sélection pour les propriétaires d’animaux souhaitant faire une mise en banque de cellules. N’importe qui peut penser que son animal est « un crack » ! http://www.cryozootech.com/index.php?m=liens&d=liens Écologie Autoécologie = science qui étudie l’influence des facteurs extérieurs sur un individus. Ces facteurs sont de deux sortes : Abiotique = facteurs indépendants des être vivants, donc tout ce qui concerne l’environnement dans lequel vit l’animal : box / prairie / nourriture / infrastructures d’entrainement / facteurs climatiques.. Biotiques = facteurs dépendant des relations entre les êtres vivants Le cavalier / le groom / l’entraineur / le maréchal / le vétérinaire / mère porteuse … On a donc un impact de l’environnement sur le clone durant la vie embryonnaire, fœtale et post-natale et cela va avoir un impact sur son expression phénotypique et comportementale. Hinrichs K., Equine Cloning, Vet Clin Equine, 2006, 22 857–866 Écologie ⇒ Problématique : du fait de l’existence de ces facteurs, et malgré la ressemblance génétique des animaux clonés, leur comportement, leur santé, leur croissance et leurs capacités ne sont donc jamais totalement les mêmes que l’animal cloné ⇒ Cette différence est d’ailleurs mise en avant par les entités pro-clonage concernant l’acceptation des animaux produits de clonage à des concours internationaux. Interdits jusque là par la FEI depuis 2007 => modification de leur point de vue cette année (Juin 2013) http://www.chronofhorse.com/article/fei-announces-cloned-horses-can-compete Hinrichs K., Equine Cloning, Vet Clin Equine, 2006, 22 857–866 Débat/Ethique Les arguments en faveur du clonage : • Progrès scientifique et clonage thérapeutique : greffes, organes… • Biodiversité : sauvegarde des espèces en voie d’extinction • Ne va pas contre la nature: puisque la nature elle-même produit des clones (vrais-jumeaux, boutures, scission des bactéries…) Débat/Ethique Les arguments contre le clonage : • Intérêt des courses? Si tous les chevaux sont aussi performants • Viabilité des êtres créés : Marguerite morte d’anémie à 6 semaines, Noah à 48h de dystenterie, Dolly à 6 ans de pathologie pulmonaires et d’arthrite. Entre 40% et 74% des clones issus de cellules somatiques meurent pendant les derniers mois de la gestation ou peu après la naissance, de problèmes respiratoires ou circulatoires. Plus de 2 clones sur 5 meurent de façon prématurée. • Contre-nature : unicité, identité d’un être, problème de dignité (créer un être pour qu’il soit conforme à quelqu’un d’autre et non pas pour lui seul) • Nombre d’embryons « sacrifiés » pour prduire un seul clone • Porte atteinte à la biodiversité • Raisons sous-jacentes : résusciter un animal perdu? • Dérives : clonage humain, clonage à l’insu d’un individu APPLICATIONS ET PERSPECTIVES DU CLONAGE DANS D'AUTRES ESPECES Clonage reproductif : ● Sauvegarde des espèces en voie de disparition (2001, société Trans Ova Genetics: Noah, un bœuf sauvage en voie d'extinction ) ● Clonage d'animaux de production : sélection des performances (production laitière, résistance aux maladies) ● Clonage d'animaux de compagnie (2004 : Little Nicky, premier chat cloné dans un but commercial par la société Genetic Saving and Clone) Clonage thérapeutique: ● Palier au problème des rejets de greffes d'organes ● Banques d'organes ● Réparation de tissus ● Transgenèse CLONAGE, QUELQUES CLES POUR COMPRENDRE (en ligne) (2013) Adresse URL http://www.clonage.u-psud.fr/index.php option=com_content&view=article&id=2&Itemid=2 Consulté le 26 Novembre 2013 LA RECHERCHE(en ligne) (2013) Adresse URL: http://www.larecherche.fr/savoirs/dossier/cloner-son-chien-ou-son-chat-beaucoup-argent-peu-garanties-0109-2000-76943 Consulté le 27 Novembre 2013 TRANS OVA GENETICS (en ligne) (2013) Adresse URL:http://transova.com/our-services/genetic-preservation-cloning.php Consulté le 27 Novembre 2013