Herpesviridae
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Prolonger votre offre de soins, jour après jour Herpesviridae : CMV DEBRUYNE Monique Laboratoire Pasteur Cerba Prolonger votre offre de soins, jour après jour Prolonger votre offre de soins, jour après jour HERPESVIRIDAE • Alphaherpesvirinae : – HSV1et HSV2 – VZV • Betaherpesvirinae : – CMV – HHV6 • Gammaherpesvirinae : – EBV – HHV8 Prolonger votre offre de soins, jour après jour HERPESVIRIDAE Prolonger votre offre de soins, jour après jour HERPESVIRIDAE Infection latente à vie après une primo-infection • Forme de survie pour le virus • Échappe au système immunitaire • Insensible aux antiviraux inhibiteurs de la réplication Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus • Virus strictement humain • Ubiquitaire : infecte 70% des habitants de la planète : - 50% pays industrialisés - 90 à 100% pays en voie de développement - en France la prévalence varie de 43,5 à 51,5% • Opportuniste majeur en cas de déficit immunitaire Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Mode de transmission du virus : • respiratoire • sexuelle • sanguine • transplantation d’organe • greffe de moelle • materno-foetale Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus : primo-infection Incubation de 2 à 4 semaines Virémie intra-leucocytaire : – cellule endothéliale => réplication – polynucléaire => transport le virus – monocyte => transport et réplication Dissémination aux cibles majeures – cellules endothéliales – cellules épithéliales – cellules fibroblastiques Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus : latence Sites – – – multiples: cellules de l’endothélium vasculaire cellules souches de la moelle osseuse monocytes du sang circulant Réactivations : excrétion de virus – pharynx – urines – sperme – sécrétions cervicales – lait maternel – larmes Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infection chez l’immunocompétent : • asymptomatique dans 90% des cas • Fièvre prolongée, diarrhée, asthénie, arthralgies, érythème • Au plan biologique : - signes d’hépatite - syndrome mononucléosique Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infection chez les immunodéprimés par le VIH les lymphocytes CD4+ sont inférieur à 100/mm3 - choriorétinite, colite, encéphalite pneumopathie, L’incidence réduite de 80% sous ARV Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infection chez les receveurs d’organe • entre le premier et le quatrième mois après la greffe. • fonction de la sérologie du couple D/R avant la greffe : - primo-infection du R- par le greffon + - ré-infection R+ par le greffon + - réactivation • fonction de l’organe greffé -cardiaque et cardio-pulmonaire >hépatique> rénale • Co-facteur de morbidité favorisant les infections et les rejets aigus Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infection après allogreffe de moelle • plus fréquente si le receveur est séropositif • 45 à 60 jours après la greffe sans tt préventif • Marqueurs d’infection disséminée (virémie, Ag pp65, ADN) • Pneumopathie interstitielle • Réaction greffon contre l’hôte : hépatite, thrombopénie, leucopénie… Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infection chez la femme enceinte : • Première cause d’infections congénitales • Taux de transmission verticale - 30 à 50% en primo-infection - 1 à 4% en infection secondaire • En France, l’incidence : - primo-infection : 0,3 à 1,4% - infections secondaires : 4% Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Infections congénitales • Formes symptomatiques - atteintes hépatiques et spléniques - microcéphalie - anomalies neurologiques - hypotrophie - prématurité - ictères • Formes asymptomatiques - déficit auditif Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic direct • Recherche le virus au niveau des prélèvements respiratoires • Rapide et spécifique • Manque de sensibilité Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Isolement cellulaire • Inoculation de cellules fibroblastiques embryonnaires humaines MRC5 • Observation d’un ECP demande 9 à 13 jours • Centrifugation et l’utilisation d’Ac monoclonaux dirigés contre les Ag précoces => 36h. • Facteur limitant : fragilité du virus Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Antigénémie leucocytaire pp65 • Recherche dans les leucocytes circulants de l’antigène viral tégumentaire par immunofluorescence • Exprimée en nombre de cellules positives pour 200.000 cellules examinées • Réalisation rapide • Sensibilité est supérieure à l’isolement Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Amplification génique • Qualitative ou quantitative • ADN viral ou ARNm • Sang total, plasma, sérum, leucocytes, LCR, HA et LAMN • Sensibilité est supérieure à l’antigénémie Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus • Etude de Revello et al. 52 patients immunocompétents 1 mois 2 mois 3 mois Virémie 26,3 % Ag pp65 57,1 % 25 % 0% ADN 100 % 89,5 % 27,3 % 4/6 mois 26,6 % >6 mois 0% Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic sérologique : Recherche des IgM • EIA indirect, après élimination des IgG ou par immunocapture • Présentes au cours des primo-infections • Persistent 4 à 6 mois • Peuvent se positiver dans les réactivations • Positives dans les stimulations polyclonales Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic sérologique : Recherche des IgG • EIA indirect, RFC, agglutination • Présentes quelques jours après les IgM • Persistent toute la vie • Peuvent augmenter dans les récurrences. Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic sérologique : mesure de l‘avidité des IgG L’affinité des IgG peut aider à dater - un index faible signe une infection récente (<3 mois) - un index élevé élimine une infection récente (>3 mois) - résultat est indéterminé entre les deux Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Indications de la sérologie : • Confirmer ou infirmer une primo-infection • Connaître le statut immunitaire des patients avant greffe, transfusion et banque de tissus • Dépistage systématique chez la femme enceinte ? Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic anténatal • Détection du génome viral dans le LAMN par : - culture et - PCR avec une sensibilité de 98%. • Au moins 6 semaines après l’infection • À partir de la 22ème SA • Virémie maternelle est négative Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Diagnostic postnatal Recherche du virus dans les urines ou la salive - avant le quinzième jour de vie - par isolement viral ou détection de génome Recherche quantitative du génome viral dans le sang périphérique - charge élevée prédictive? - 10% des enfants infectés ne sont pas virémiques Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Patients immunodéprimés : Ag pp65 et/ou CV • VIH : nécessaire quand les CD4 sont < 100 par mm3 • Receveurs d’allogreffe : - surveillance hebdomadaire de la charge virale - dès la greffe =>trois mois Les traitements sont instaurés selon l’organe - rein : 4 log de copies /ml (50 cellules pp65 positives) - cellules souches : 1ère antigénémie ou 1000 copies Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Efficacité du traitement : • antigénémie disparaît en 10 à 15 jours • ADNémie se négative en 15 à 21 jours Manque de standardisation => le suivi doit être fait • par la même laboratoire • sur la même matrice Une diminution de 0,5 à 1 log par semaine est significative Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Patiente enceinte de 4 mois 24/02/09 • IgG anti CMV +++ 2,1 • IgM anti-CMV ++ 1,2 Conclusion ? 11/03/09 +++ 2,3 ++ 1,2 Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Patiente enceinte de 4 mois 24/02/09 • Avidité IgG anti CMV • Conclusion ? 0,56 11/03/09 0,58 Prolonger votre offre de soins, jour après jour Cytomégalovirus Patiente enceinte de 4 mois 22/05/08 • IgG anti CMV • IgM anti-CMV Conclusion ? n <0,4 +++ 5,2 24/11/08 +++ 2,3 n <0,9 Prolonger votre offre de soins, jour après jour Herpesviridae : EBV DEBRUYNE Monique Laboratoire Pasteur Cerba Prolonger votre offre de soins, jour après jour Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • Virus ubiquitaire • Séroprévalence de 95% à l’âge de 30ans • Deux souches virales : type A et B (1 et 2) - Type 1 prédominant en Europe et en Amérique - Type 2 fréquent en Afrique Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Transmission : • directe par voie salivaire et de manière précoce • greffes d’organes ou de cellules souches • transfusion de sang • transmission maternelle décrite mais exceptionnelle Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • tropisme strict pour les lymphocytes et cellules épithéliales • cycle lytique avec production de virions : Ag Zebra, EA, VCA et GP. • capacité d’induire la prolifération continue des lymphocytes B infectés : Ag EBNA et LMP, ARN EBER Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Mononucléose infectieuse • Asymptomatique chez l’enfant en bas âge • MNI des adolescents et des adultes : fièvre, angine, adénopathie, asthénie, hépatosplénomégalie • Formes sévères sont associées au déficit immunitaire (syndrome de Purtilo) Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Infection latente Le virus persiste dans l’organisme : - dans les lymphocytes B, même après division cellulaire, sans production de particules virale. - dans des organes lymphoïdes secondaires où peut se produire une excrétion virale sans traduction clinique Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Pathologies malignes associées : Lymphoprolifératif : • • • • lymphome de Burkitt, lymphome B de l’enfant en Afrique équatoriale certaines maladies d’Hodgkin les lymphomes B des immunodéprimés après transplantation ou au cours du SIDA Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Epithélial : • leucoplasie orale chevelue des immunodéprimés : lésions proliférantes du bord de la langue Lympho-épithélial : • carcinome du naso-pharynx, endémique en Asie du Sud-Est et en Afrique du Nord, rare en Europe Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Diagnostic biologique • Culture possible sur des lymphocytes B vierges, lente et impraticable en routine • L’amplification génique : – qualitative ou quantitative – salive, sang, LCR, biopsie Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Diagnostic sérologique • Technique référence : IFI ou IF anti-complémentaire • Techniques EIA avec des AG natifs, protéines recombinantes ou peptides • Agglutination de particules de latex sensibilisées • Immunoblots Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Etudie la cinétique de différents anticorps : • • • • IgM anti-VCA (15 jours, 2-3 mois) IgG anti-VCA Anti-EA (IgG ou IgA) précoces mais inconstants Anti-EBNA tardifs (3 à 6 mois) • Anticorps hétérophiles (IgM dirigés contre GR de bœuf ou de cheval) Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus VCA IgM VCA IgG EA IgG EBNA IgG Séronégatif n n n n MNI débutante + n +/- n MNI + + +/- n Infection ancienne n + n + Réactivation + + +/- + Déséquilibré n + n n Si EBNA + isolé chez des enfants, en EIA, proposer une recherche VCA IgG en IFI Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus VCA IgA Carcinome du nasopharynx Lymphome de Burkitt VCA IgG EA IgG EA IgA +++ +++ +++ +++ n +++ ++ n Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein Barr virus Indications de la sérologie : • diagnostic de la primo-infection chez un immunocompétent • connaissance du statut immunitaire • complément pour le Lymphome Burkitt et le Carcinome du naso-pharynx Indications de la mesure de la charge virale : • primo-infection du sujet immunodéprimé • cancers : Lymphome Burkitt et le Carcinome du nasopharynx • syndromes lymphoprolifératifs : suivi régulier de la CV Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • Patient 1 VCA IgM VCA IgG EBNA IgG ++ n n Primo-infection ? Peut-être Stimulation polyclonale des IgM ? Peut-être Conduite à tenir ? Demander un 2nd prélèvement Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • Patient 2 VCA IgM VCA IgG EBNA IgG n ++ n Infection ancienne ? Maladie à +/- long terme ou âge ou greffe Infection récente ? Non Conduite à tenir ? Demander un nouveau prélèvement à 3 mois Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • Patient 3 VCA IgM VCA IgG EBNA IgG n n ++ Infection ancienne ? Problème technique versus IF Faux positif en EBNA ? Conduite à tenir ? IF Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus • Patient 4 VCA IgM VCA IgG EBNA IgG ++ ++ ++ Primo-infection ? NON Faux positif en IgM ? Peut être activation poly IgM Réactivation ? Possible Conduite à tenir ? Creuser dossier au niveau clinique et biologique Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Etude 2006 portant sur 15367 dossiers : – – – – – – 19% 66% 5% 2,5% 1,5% 6% absence d’anticorps infection ancienne primo-infection IgM isolées déséquilibré réactivation ou stimulation polyclonale Prolonger votre offre de soins, jour après jour Epstein-Barr virus Patient avec une éruption cutanée et des arthralgies après un voyage à Madagascar. VCA IgM : ++, VCA IgG : ++, EBNA IgG : ++ CMV IgM : ++, CMV IgG :n Conclusion : soit CMV débutante soit autre infection entraînant une activation polyclonale des IgM (chicungunya ou parvovirus)
