Télécharger ce fichier PDF

1
EFFETSDESEXTRAITSDESFEUILLESD’Alchorneacordifolia(EUPHORBIACEAE)SURLE
PEROXYDED’HYDROGENEPRODUITPARLESPOLYNUCLEAIRESNEUTROPHILESHUMAINS
STIMULES
EFFECTSOFAlchorneacordifolia(EUPHORBIACEAE)EXTRACTSONHYDROGENPEROXIDE
PRODUCEDBYSTIMULATEDHUMANNEUTROPHILS.
KOUAKOU–SIRANSYG.1,NGUESSANIRIEG.1,KAMENANA.1,KOUAKOUL.1,GRESSIERB.
2,KABLANBROUJ.1
1Laboratoiredepharmacologie,pharmacieclinique,thérapeutiqueetphysiologie,UFR
SciencesPharmaceutiquesetBiologiques,UniversitéCocody‐Abidjan,B.P.V34,Abidjan,
Côted’Ivoire.
2LaboratoiredePharmacologie,PharmacocinétiqueetPharmacieClinique,Facultédes
SciencesPharmaceutiquesetBiologiques,UniversitéLille2,3rueduProfesseurLaguesse,
B.P.83,59006LilleCedex,France.
Titrecourt:Effetantioxydantd’Alchorneacordifoliavis‐à‐visdeH2O2.
Auteurcorrespondant:G.KouakouSiransy
E‐mail:[email protected]
Tel:(225)07494409.Fax:(225)22486068.
Adressepostale:Laboratoiredepharmacologieetphysiologie,UFRSciences
PharmaceutiquesetBiologiques,UniversitéCocody‐AbidjanBPV34.

2
Résumé
Lestressoxydantestimpliquédansdetrèsnombreusesmaladiescommefacteur
déclenchantouassociéàdescomplicationsdel’évolution.Parmilesespècesréactivesde
l’oxygène,leperoxyded’hydrogène(H2O2)estl’initiateurd’espècesoxygénéestrèstoxiques.
EnCôted’IvoireAlchorneacordifoliaestfréquemmentutiliséeenmédecinetraditionnelle
pourletraitementd’affectionsvariéesdanslesquellessontimpliquéeslesespècesréactives
del’oxygène.Faisantsuiteàdeuxétudespréliminaires,lebutdecetteprésenteétudeestde
rechercher,uneffetantioxydantdesfeuillesd’Alchorneacordifoliavis‐à‐visduH2O2relargué
parlepolynucléaireneutrophilestimulé.Deuxextraitsontétépréparésàpartirdesfeuilles
séchées:unmacérâtaqueuxetunextraitàl’acétated‘éthyle.Unegammedeconcentrations
allantde0,1à15mg/laététestée.Lepolynucléaireneutrophileaétéstimuléparlephorbol
myristateacétate.LedosagedeH2O2relarguésuitecettestimulation,s’estfaitselonla
méthodedePicketKeisaribaséesurl’oxydationdurougedephénolparH2O2par
l’intermédiairedelaperoxydase.Lesrésultatsontmontréuneinhibitiondel’activitédeH2O2
demanièredose‐dépendante.Lesconcentrationsinhibitrices50%(CI50%)sont2,87et
5,73mg/lpourlemacérâtaqueuxetl’extraitacétated‘éthylerespectivement.LesCI5050%
observéessontinférieuresàcellesdesubstancespharmacologiquestellesqueleglutathion
etlaN‐acétylcystéine,connuescommeétantdepotentiellessubstancesantioxydantes.Ainsi
AlchorneacordifoliaauraitdeseffetsinhibiteursintéressantssurlerelargagedeH2O2une
espèceoxygénéetrèstoxique.
Motsclés:Alchorneacordifolia,stressoxydant,peroxyded’hydrogène.

3
Summary
Oxidativestressisimplicatedinmanydiseasesasatriggerorassociatedwithcomplications
ofevolution.Amongthereactiveoxygenspecies,hydrogenperoxide(H2O2)istheinitiatorof
highlytoxicoxygenspecies.InCôted'IvoireAlchorneacordifoliaiswidelyusedintraditional
medicinefortreatingvariousdiseasesinwhichreactiveoxygenspeciesareinvolved.
Followingtwopreliminarystudies,thepurposeofthisstudyistoresearch,anantioxidant
effectofAlchorneacordifolialeaftowardsH2O2releasebyneutrophilsstimulated.Two
extractswerepreparedfromthedriedleaves:anaqueousextractandanethylacetate
extract.Arangeofconcentrationsfrom0.1to15mg/lwastested.Theneutrophilswere
stimulatedbyphorbolmyristateacetate.ThedosageofH2O2releaseafterthestimulation
wasdonefollowingthemethodofPickandKeisaribasedontheoxidationofphenolredby
H2O2viaperoxidase.TheresultsshowedaninhibitionoftheactivityofH2O2inadose‐
dependentmanner.50%inhibitoryconcentrationsare2.87and5.73mg/lforaqueous
extractandethylacetateextractrespectively.The50%inhibitoryconcentrationsobserved
werelowerthanthoseofpharmacologicalsubstancessuchasglutathioneandN‐
acetylcysteine,knownaspotentantioxidant.AlsoAlchorneacordifoliacouldhaveinteresting
inhibitoryeffectsonthereleaseofaverytoxicoxygenspeciesH2O2.
Keywords:Alchorneacordifolia,oxidativestress,hydrogenperoxide

4
INTRODUCTION
Lestressoxydatifestimpliquédansdetrèsnombreusesmaladiescommefacteur
déclenchantouassociéàdescomplicationsdel’évolution.Parmilesespècesréactivesde
l’oxygène(ERO),leperoxyded’hydrogène(H2O2)alaparticularitéd’êtreneutreetdoncde
traverserfacilementlesmembranes.Ilestl’initiateurd’EROconduisantainsiàunealtération
despropriétésfonctionnellesdelacellulepouvantallerjusqu’àlalysecomplète.
EnCôted’IvoireAlchorneacordifoliaestfréquemmentutiliséeenmédecinetraditionnelle
pourletraitementd’affectionsvariéesliéesàuneinflammationchronique,affections
respiratoires,rhumatismales(Adjanohoun,1994;AdjanohounetAkéAssi,1979).Aucours
decesaffectionsl’activationprolongéedespolynucléairesneutrophiles(PNN)génèredes
EROquientraînentdesdommagessurlesélémentsstructurauxcellulaires(Afonsoetal.,
2007;Henrotinetal.,2005;Roos,1001).
Dansuneétudepréliminairenousavonsmisenévidenceuneffetinhibiteurdirect
d’AlchorneacordifoliasurleH2O2(Kouakou‐Siransyetal,2010a),maiségalementuneffet
inhibiteursurlerelargagedel’anionsuperoxydeparlepolynucléaireneutrophilestimulé
(Kouakou‐Siransyetal,2010b).L’anionsuperoxydeest,certes,lapremièreétapedela
formationdesEROlesplusagressives,maissadétectionetsondosageprésentede
nombreusesdifficultésàcausedesoninstabilitéensolutionaqueuse(Fridovich1997).Dans
cetteprésenteétudenotreobjectifestderechercheruneffetinhibiteurindirectsurH2O2
plusdangereuxquel’anionsuperoxyde,maiségalementplusstable.

5
MATERIELSETMETHODES
Matériels
Matérielvégétal
Lesfeuillesfraîchesadultesd’Alchorneacordifolia(SchumetThonn.)Müll.Arg.
(Euphorbiaceae)ontétérécoltéesauCentreNationaldefloristiqued'Abidjanetvérifiéespar
unexpertbotaniste(professeurAkéAssi,Départementdebotanique,Universitéd'Abidjan).
Préparationdel’extraitaqueux
Lesfeuillesséchéesontétébroyéesdansunmixer,et50gdepoudrefineaétémacéré
pendant48heuresà25°Cdansunballonenverrecontenant500mld'eaudistillée.L’extrait
aqueuxestfiltréetlyophilisé.Lelyophilisatestconservé(dansunflaconenverre)àla
températurede+4°C.
Préparationdel’extraitàl’acétated’éthyle
Lesfeuillesséchéesontétébroyéesdansunmixer,et50gdepoudrefineaétémacéré
pendant24heuresà4°Cdansunballonenverrecontenant500mld’unmélange
méthanol/acétone/eau(70:70:30,v/v/v).Lefiltratestensuiteconcentréàbassepressionà
30°C.Laphaseaqueuserésultante,aprèscentrifugation,estlavéeaudichlorométhaneafin
d’éliminertouslespigmentslipophilespuissoumiseàuneextractionparl’acétated’éthyle.
Laphaseacétated’éthyleestensuiteévaporéeàsec.L’extraitsecestconservéà4°C.