Cours « Biologie Cellulaire » Licence 1ère année de Biologie 2013-2014 UE GLBP 101 Série D3, 1er semestre Accueil - OK ? Introduction COURS DE BIOLOGIE CELLULAIRE 2013-2014 Unité d enseignement GLBP 101 Série D3 Licence Biologie / Portail D Rendez-vous les lundis de 8h à 9h30 + 4 séances (Semaines n° 38,39,40, 41 mercredi de 15h à 16h30) Amphi 6.03 / semestre 1 (Sauf le 9/10 A5.02) Université Montpellier 2 PRÉSENTATION 1- L ÉQUIPE PÉDAGOGIQUE / COURS de BIOLOGIE CELLULAIRE : 3 séries D1,D2,D3 Simon Descamps (MConf UM2 / CRBM) Christian Jay-Allemand (Prof UM2 / IRD) Paul Mangeat (Prof UM2 / CRBM) + MC, PRAG, ATER (Post-doc) et Moniteurs (thésards) => TD et TP ⇒ Enseignants-chercheurs / Profession Mes Coordonnées : - Tél: 0467143612 Labo DIADE Bât. 15, 3ème - Mèl: [email protected] - Sites Web: www.bioingale.com/ www.diade.ird/ 2- LES 3 MISSIONS DE L UNIVERSITÉ : 1- Former les chercheurs et Ingénieurs de demain… 2- Former les futurs enseignants de collèges, lycées, écoles et universités + Formation continue … 3- Insertion professionnelle / Vous adapter au monde de l entreprise / projets R & D Enquête de l OCDE en 2006 (http:/ www.oecd.org/topicstatsportal/) - L es rémunérations en Europe des diplômés universitaires sont bien supérieures à ceux qui n’ont qu’un bac en poche -Les employeurs recherchent les diplômés Bac + 2 et + ! Techn. / Ingénieur / docteur PLAN GÉNÉRAL 25 h de cours / 17 créneaux d 1h30 7 chapitres Quelques théories Près de 10 concepts en Bio Cell … 1-Origine de la vie 2-Évolution cellulaire 3-Membranes et paroi 4-Cytosquelette 5-Organites 6-Cycle cellulaire 7-Machineries => Vers les disciplines de la biologie intégrative et des biotechnologies Références de livres et de sites Web FdS / ENT / Cours / Licence L1 3- COURS = 1 polycopié + 1 série de fichiers au format pdf / Site web + 1 cours en amphi + TD / TP + livres à consulter + Contacts avec vos Enseignants-Chercheurs de l UM2 / Laboratoires Site Web:http:/www.fdsweb.univ-montp2.fr/ FdS / Espace pédagogique / C.JayAllemand Livres à consulter: - J.C. Callen, 1999. Biologie Cellulaire. Ed. Dunod - P. Cau & R. Seïte, 2002. Cours de Biologie Cellulaire. Ed. Ellipses Examens Apprendre à schématiser, légender et commenter les schémas du cours ! LICENCE Sciences et techniques Mention BIOLOGIE ULBI 101 : BIOLOGIE CELLULAIRE 1 1ère ANNEE, 1er SEMESTRE 2012-2013 Travaux dirigés et travaux pratiques Tous les étudiants doivent suivre l ensemble des travaux pratiques (TP) et des travaux dirigés (TD), y compris les redoublants Il n y a AUCUN REPORT DE NOTES DE TP/ TD quelle que soit la note obtenue au cours de l année 2012/2013 sur l’année en cours Les groupes de TP/TD seront signalés par internet, mis sur le site web FdS et affichés au tableau (bâtiment 4) Seules les permutations d un groupe à l autre justifiées seront acceptées Le début des enseignements pratiques et dirigés – TD à partir: 30/09 STD1 Bât25 (6 séances) - TP à partir: 14/10 STD26.13 (5 séances) Affichage : extrémité du Bâtiment 4 Examen et notation Epreuve écrite de 1h30 En Janvier 2014 Session 1 corrigée et notée par l enseignant de la Série Ecrit - : Une bonne copie c est : Un plan clairement énoncé et suivi Une présentation soignée Des schémas clairs et bien annotés Des paragraphes explicatifs simples et précis D utiliser les bons termes D éviter d écrire des erreurs grossières Une à deux copies doubles maxi TP/TD : Contrôle continu et épreuve de TP / 3h en décembre 2012 - Dessins et légendes soignés Commentaires synthétiques Autres remarques Objectif n°1! Les enjeux de la biologie cellulaire • Hier, comprendre la cellule vivante à travers la description de son organisation, l identification de ses molécules constituantes et l étude des propriétés de chacune de ces molécules • Aujourd hui, la nécessaire prise en compte des environnements cellulaires / Facteurs extra-cellulaires, quantification des processus, étude cinétique et surtout les interactions ADN-Protéines, protéinesprotéines, … • Demain, l intégration des données via la modélisation informatique et la cellule artificielle ? Développement de modèles mécanistes et récemment de modèles dits « Structure-Fonction » => Science des interactions moléculaires … Cellules eucaryotes => Animales/Végétales Comparaison entre Animal et Végétal ? Plante = Vaste surface fixe aérienne et souterraine pour un volume modeste : Pour un arbre de 40 m de haut, sa surface externe est de 1 ha, sa surface interne (poches sous-stomatiques) de 30 ha et sa surface racinaire de 130 ha ! Plante = Une symétrie radiale avec une seule polarité verticale pour les plantes. Animal = Une symétrie bilatérale avec une double polarité. Toute forme dépend de la gravité, de l espace et de la taille des organismes. Adaptation à la fixité chez les végétaux => Diversité des biomolécules. - Développement coloniaire et immortalité chez les végétaux (bourgeons indivisibles + reproduction végétative). Individus «égoïstes» chez les animaux - Embryogenèse finie chez l animal et indéfinie chez le végétal (due à l activité de ses méristèmes => gigantisme de certaines plantes). Unité fonctionnelle => Cellule, commune à tous les organismes Dictyostelium Comparaison entre Animal et Végétal Unité fonctionnelle => Cellule, commune à tous les organismes Visualiser vidéo n°1 (Amibe) COURS de Bio Cell ORGANISME <=> TISSUS <=> CELLULES 10 µm Qui suis-je ? Autre réflexion : Nous ne sommes pas assez savants ni vous, ni moi, pour tout analyser … Nous allons jeter, dans cette étrange « caverne », un simple regard de profane. Un regard candide. Le regard de quelqu un qui ne prétend pas savoir pourquoi quand on lui a expliqué comment ! René Barjavel La faim du tigre, 1966 / … Associations ! Plan du cours du 12 / 09 / 2013 1-Origine de la vie et molécules du vivant 1.1-Les êtres vivants face au monde minéral - Composition élémentaire de la matière - Les atomes sont les mêmes - Pas de force vitale ! - Comment définir un organisme vivant ? 1.2-Organisation structurale hiérarchique - De la molécule => à l écosystème - De la cellule => aux molécules - Principales molécules organiques - Nbre total de molécules/cellule et constituants 1.3-Caractéristiques fondamentales de la vie 1.4-Bref historique de la Biologie Cellulaire 2-Diversité des formes cellulaires - Qu est-ce qu une cellule ? - Des procaryotes aux eucaryotes - Notion d évolution cellulaire Ce qu il faut retenir … Monde minéral / Êtres vivants Biosphère Cellules a & v 0,2 % C 10 - 20 % 0,9 H 9 50 O 60 - 80 0,03 N 1 - 5 + Êtres manifestent des propriétés étonnantes … + Les atomes sont les mêmes => des molécules « inanimées » + Il n existe pas de forces vitales ! « Esprit vitaliste » du XIXème + Quelles sont les raisons pour qu un organisme soit vivant ? => La frontière ne passe pas simplement entre le minéral et l organique car il est possible de fabriquer les macromolécules => Niveau organisationnel? En effet, chez les êtres vivants: - Nombre de molécules très élevé, Complexité très grande, haut niveau d organisation, - Propriétés dynamiques / physiologie cellulaire => 3 fonctions essentielles: - 1- Accroissement et renouvellement de la matière sèche / chaque cellule et individu 2- Reproduction et évolution / Générations 3-Capacités de réaction / réseaux d interactions à toutes les niveaux => Survie ! => Phénomènes de la vie + Nbre de types cellulaires : 200 chez les animaux et seulement 40 chez les végétaux + Utilisation de l énergie de l environnement + Métabolisme: transformation des molécules exogènes, synthèse des macro-molécules / fonctions, stockage d ATP / liaisons chimiques + Homéostasie et auto-assemblage Plan du cours 2 1-Origine de la vie et molécules du vivant 1.1-Les êtres vivants face au monde minéral - Composition élémentaire de la matière - Les atomes sont les mêmes - Pas de force vitale ! - Comment définir un organisme vivant ? 1.2-Organisation structurale hiérarchique - De la molécule => à l écosystème - De la cellule => aux molécules - Principales molécules organiques - Nombre total de molécules/cellule et constituants 1.3-Caractéristiques fondamentales de la vie 1.4-Bref historique de la Bio. Cel. et des techniques 2-Diversité des formes cellulaires - Qu est-ce qu une cellule ? -Des procaryotes aux eucaryotes - Notion d évolution cellulaire Exemple d une Organisation structurale hiérarchique ATOMES Molécule d un pigment : la chlorophylle Chloroplaste Cellules et chloroplastes Tissus foliaires Feuilles d un arbre Écosystème forestier Hiérarchie des ultrastructures cellulaires (p3) Molécules Cellule végétale Notion de structure et de fonction Et le tableau en bas de la page 3 … Composition chimique et liaisons moléculaires (p4) • Cellules = 90% d eau / liaisons H • Le reste exprimé en pourcentage de poids sec est approximativement de: – 50% protéines – 15% glucides – 15% acides nucléiques – 10% lipides – 10% autres Ceci pour la cellule animale … Ø Les biomolécules et leurs fonctions => Macromolécules Exemple : ARN polymérases … Ø Les différents types de liaisons Molécule d eau Dipolaire Protéine Liaisons faibles pouvant s établir au sein d une macromolécule telle qu une protéine ou entre molécules (ex: l eau) ARN polymérase (Sillon) (Rabat) (Queue d orientation) Liaisons chimiques 1- Celles définies entre atomes - Liaisons covalentes fortes (C-C) Longueur Force . (nm) (kcal/mol) 0,15 90 + Liaisons ioniques 0,25 3 + Ponts hydrogènes 0,30 2-3 + Forces de van der Waals 0,35 1 - 0,1 - Liaisons faibles + Forces hydrophobes 2- Exemples de liaisons formant les macromolécules - Ponts hydrogènes R-H---R et liaisons ioniques - Ether R-O-R et thioether R-S-R O - Ester R-C-O-R - Phosphodiester R-PO4-R - Peptidique R-CO-NH-R - N-glycosidique R-N-CH-R - Pont disulfure R-S-S-R R = une molécule donnée Les protéines (p9-12) • Molécule de base: l acide aminé . (a.a.) / L ou D • Classification des 20 aa / R: ü Polaire = Hydrophile Ø faiblement ionique Ø ionique ü Apolaire = Hydrophobe Ø aliphatique Ø cyclique Rem: La cystéine est impliquée dans les ponts S=S intra- et inter-moléculaires Peptides et polypeptides Ø Liaison peptidique (amide): δ- δ+ La liaison peptidique est polarisée: liaisons H! Orientation: N term -aa1-aa2 … aan -C term Les protéines: des structures I à IV • Structure primaire: Ø Enchaînement des a.a. du polypeptide • Structure secondaire: Ø Repliements dus aux liaisons hydrogènes intra-moléculaires (CO/HN) des polypeptides en: Hélice α Feuillets plissés β :O H: :C :N C-Term N-Term Figure: Protéine d actine G avec une molécule d ATP (jaune). Noter les structures en feuillet (rouge) et en hélice alpha (vert). • Structure tertiaire III: Ø Ponts S=S intra- ou inter- moléculaires Ø Interactions avec l environnement cellulaire: chaperons, modifications post-traductionelles, etc. III IV • Structure IV Ø Association entre sous-unités protéiques, apports d hèmes (ex: Fe), pontages lipidiques ou glucidiques (Glyco- et lipoprotéines). NON! La fonction d une protéine n est pas entièrement déterminée par sa structure Iaire, c.a.d par l enchaînement des acides aminés constitutifs de son polypeptide. L environnement … Protéine Complexe protéique Notion de sous-unités Les Glucides (p5-6) • Molécules de base: oses Aldéhyde ou cétone + fonctions alcools primaire ou secondaire Souvent des HEXOSES, Pentoses cycliques, parfois structures linéaires + Stéréo-Isomérie • Macromolécules: polyoses ou polysaccharides Diversité des liaisons, linéaires ou branchées • Fonctions cellulaires: énergie métabolique (Glucose, amidon, glycogène), molécules de l identité cellulaire (reconnaissance, adhésion, tissu), structurale (cellulose) C3 Glucides = Oses Ribose C5 C3 Désoxyribose C6 Amidon Glycogène Cellulose Rappels sur la représentation des glucides Projection de Fisher Représentation de Haworth La cellulose est un β-1-4 glucane. Structure cristalline formée de microfibrilles (2000 monomères) de diamètre (20 à 30 nm). AMIDON (végétal) GLYCOGENE (animal) Les Lipides (p7-8) - Les acides gras (les huiles) saturés ou insaturés courants en C16, C18 - Les triglycérides (le beurre) Ester d acides gras et du glycérol ⇒ Fonction de réserve énergétique • Les phospholipides (Phosphatidylcholine) Ester d acides gras et du glycérol + Phosphatidyl-X ⇒ Fonction structurale (membrane) • Les stéroïdes (cholestérol) => Fonctions structurale et hormonale Propriété d auto-assemblage Amphiphilie => MICELLE Stérol Liposomes Les acides nucléiques (p13-15) • Bases = A, G / T, C / U • Nucléosides = Dans l ARN, UMP remplace TMP base + ribose (ARN) base + 2-désoxyribose (ADN) • Nucléotide = nucléoside + phosphate(s) Ø Les bases sont polarisées: liaisons H! AMP ADN P GMP ARN 5 4 3 1 2 TMP 2 liaisons H P CMP Guanosine 3 liaisons H Cytidine Polynucléotides 3 5 5 3 L appariement (ou hybridation) dû aux liaisons hydrogènes impose l antiparallélisme des 2 chaînes de l ADN. Plan du cours du 24 / 09 / 05 1-Origine de la vie et molécules du vivant 1.1-Les êtres vivants face au monde minéral - Composition élémentaire de la matière - Les atomes sont les mêmes - Pas de force vitale ! - Comment définir un organisme vivant ? 1.2-Organisation structurale hiérarchique - De la molécule => à l écosystème - De la cellule => aux molécules - Principales molécules organiques - Nombre total de molécules/cellule et constituant 1.3-Caractéristiques fondamentales de la vie 1.4-Bref historique de la Bio Cell et des techniques 2-Diversité des formes cellulaires - Qu est-ce qu une cellule ? - Des procaryotes aux eucaryotes - Notion d évolution cellulaire Cellule procaryote Cellules eucaryotes p18 Tableau: Nombre de molécules par type cellulaire et par constituant B H EAU IONS i ARN Protéines Lipides 4 1010 2,5 108 4,6 105 3,6 106 2,5 107 10 4,2 1013 2,4 1011 1,5 108 2,5 109 2,5 10 X 1000 B= Bactérie H= Hépatocytes d homme Bref historique de la biologie cellulaire et des techniques d analyse - 1830 : Formulation de la théorie cellulaire par Dutrochet, Schleidens, Schawnn -1850 : Formulation de la continuité cellulaire par Virchow / Division ! -1900 : Description des principales structures composant la cellule et préparation des premiers extraits acellulaires de levure par Büchner -1920 : Développement cytochimie / coloration des techniques de -1940 : Utilisation des isotopes / Études métaboliques et premières images en MEB et MET par von Ardenne et Porter (com. en 1965) -1950 : Mise au point des techniques de fractionnement cellulaire et de purification des organites par Claude et Brachet -1960 : Immunolocalisation; 1970; Hybridation in situ; 1987 : Utilisation de la microscopie confocale (inventée par Minski en 1961) Hybridation in situ de l ADN Plan du cours 1-Origine de la vie et molécules du vivant 1.1-Les êtres vivants face au monde minéral - Composition élémentaire de la matière - Les atomes sont les mêmes - Pas de force vitale ! -Comment définir un organisme vivant ? 1.2-Organisation structurale hiérarchique - De la molécule => à l écosystème - De la cellule => aux molécules - Principales molécules organiques - Nombre total de molécules/cellule et constituant 1.3-Caractéristiques fondamentales de la vie 1.4-Bref historique de la Bio Cell et des techniques 2-Diversité des formes cellulaires - Qu est-ce qu une cellule ? - Des procaryotes aux eucaryotes - Notion d évolution cellulaire La cellule: base de l unité et de la diversité du monde vivant (p17) Théorie cellulaire (1838, Schleidens & Schwann) et théorie de l évolution (Darwin, 1809-1882) Ø Toute forme vivante est faite de cellules Ø Toute cellule dérive d une cellule pré-existante Unité et diversité structurale C est un volume de cytoplasme entouré par une membrane cytoplasmique et contenant un noyau et différentes structures. Mais … différenciation Unité et diversité fonctionnelle C est la plus petite organisation moléculaire qui possède les propriétés du vivant: contrôle des échanges, métabolisme, croissance et multiplication. Mais … différenciation La biologie cellulaire étudie l organisation et le fonctionnement de la cellule. Qu est-ce qu une cellule ? Définition (p17) *La cellule est la plus petite unité capable de manifester les propriétés du vivant: elle synthétise l'ensemble de ses constituants en utilisant les éléments du milieu extracellulaire, elle croît et se multiplie. *La cellule est limitée par la membrane plasmique. La membrane plasmique est faite d'une bi-couche de phospholipides peuplée de protéines glycosylées. Il s'agit d'une barrière dont la perméabilité est extrêmement sélective. *La cellule renferme également un certain nombre d'organites. *La cellule subit un cycle où alternent deux grandes phases, la phase d'activité fonctionnelle ou interphase et la phase de multiplication ou mitose. Membrane plasmique Cellules eucaryotes PLURICELLULAIRES=Métazoaires • Animaux • Végétaux • Champignons • Algues UNICELLULAIRE • Levures • Protistes • Algues Formes de cellules Bactéries Pro-érythrocyte Exoderme de racine Paramécie La cellule eucaryote Nous distinguons: - les Protozoaires formés par une seule cellule libre, souvent capables de se mouvoir (amibes, paramécies, euglènes, levures) Une Paramécie (Ciliés) (x 250) - les Métazoaires (animaux, plantes) dont les cellules sont groupées en tissus épithéliaux, musculaires, conjonctifs, de soutien [cartilagineux, osseux], nerveux chez les animaux Evolution et tailles des cellules -1,5 Milliards d années - 3,5 Milliards d années Procaryotes ⇒ Pas d organites cellulaires, pas de noyau. Origines de la vie cellulaire On suppose que la vie existait dès -3,8 Md années, âge des plus anciennes traces de molécules organiques, et les premières cellules ayant laissé des vestiges fossiles sont datées de -3,45 Md années (cyanobactéries découvertes en Australie occidentale). Précipités de calcite dûs au métabolisme bactérien Origine endosymbiotique des eucaryotes (p19) Cellule animale: bactérie pourpre … Cellule végétale: bactérie bleue (cyanobactérie) … Cellule animale (schéma) Centrioles Cellule végétale (MET) Le jeu des 7 différences (p18) LE CYTOPLASME HYALOPLASME MORPHOPLASME CYTOSOL CYTOSQUELETTE - Solution - Réseau aqueuse microtrabéculaire - pH = 7 - Filaments - Homogène protéiques - Molécules solubles ORGANITES - Noyau Réticulum endoplasmique - Appareil de Golgi - Vacuoles Pexoxysomes Mitochondries Chloroplastes VOIES MÉTABOLIQUES Mitochondrie Hyaloplasme Hyaloplasme Chloroplaste La problématique 1. La théorie de la génération spontanée est caduque (Pasteur 1860) et Darwin impose l idée d un ancêtre commun de forme cellulaire simple 2. La théorie de l ÉVOLUTION veut que le premier organisme vivant se soit développé à partir de la matière inanimée. Au fur et à mesure qu'il s'est reproduit, il s'est transformé en des organismes différents, jusqu'à donner toutes les formes de vies sur terre. 3. L'émergence de la vie cellulaire n a laissé aucune trace. Les 1ères macromolécules (Last Universal Common Ancestor) ? Les protéines sont indispensables pour la réplication et l'expression des gènes (ADN) … Et L ADN est nécessaire pour la biosynthèse des protéines. Origines des molécules de la vie Divers schémas réactionnels aboutissent à la formation de monomères et polymères biologiques à partir de précurseurs plus ou moins simples. Ils postulent que la genèse a eu lieu dans des environnements extrêmes : 1. Composants de l atmosphère primitive dissous dans l eau (CH4, NH3, CO2, SH2, H2) + Photons, électricité = Chimie prébiotique où se forme le « CHON » ! (Oparin/Haldane ~ 1890) 2. Au fond des océans près des sources hydro-thermales 3. Provenir de l espace Expérience de S. Miller … => Exobiologie Les expériences de S. Miller (1953) + Production de l acide cyanidrique HCN en présence d NH3 => Adénine, acides aminés, sucres Chimie prébiotique! La théorie de l ARN On suppose qu'un "monde d'ARN", c'est à dire une vie utilisant les ARN à la fois comme matériel génétique et comme catalyseurs, a précédé l'apparition de cellules comportant de l'ADN et des protéines. Pour: • ARN Catalytiques • Virus à ARN Contre: • « Fragiles » • Non autoréplicatif Ce qu il faut retenir … Culture générale - Apport de la science / Société - Missions de l Université / Biologie à Montpellier - Savoir définir un animal / Végétal - Organisation structurale hiérarchisée du vivant - Processus d auto-assemblage des macromolécules - Théorie cellulaire endosymbiotique Examen de fin de semestre -Distinguer un procaryote d un eucaryote -Distinguer cellule animale / cellule végétale -Structure et fonctions des organites -Structure, fonctions et propriétés des molécules -Fonctions et liaisons chimiques / édifices macromoléculaires -Interactions entre macromolécules (ADN-Protéine, protéine-protéine, ARN-protéine, ARN-ARN) -Intégration des structures et des fonctions / cellule Frontière biologique p21 => CONCEPTS Échanges Communication Début des TP : Le x octobre 2012 Petit matériel pour TP Matériel de dessin : - un crayon graphite HB, une gomme, un double-décimètre - des feuilles de dessin blanches non quadrillées Matériel à dissection : vendu à la corpo voir affichage salles I/J Bât 4 ou Galtier, Bastide… - une pince fine (ex : AA) - une paire de ciseaux fins - une aiguille montée ou une aiguille lancéolée ou des épingles - un scalpel - un chiffon en coton (