Stage proposé par Emmanuelle MARTINI Chercheur CEA- CEA/CNRS Laboratoire de réparation de l’ADN UMR217-DSV/IRCM/SGRR/LRD CEA Fontenay aux Roses Téléphone : 01-46 54 86 98 Mail : [email protected] Site internet : http://www-dsv.cea.fr/dsv/instituts/institut-de-radiobiologie-cellulaire-etmoleculaire-ircm/unites-de-recherche/service-instabilite-genetique-reparation-recombinaisonsigrr/laboratoire-de-radiobiologie-de-l-adn-lrd Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Serge Boiteux Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Laboratoire de réparation de l’ADN Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Serge Boiteux Résumé du thème de recherche de l’équipe : Le laboratoire a largement contribué à l’étude de la réparation de lésions de l’ADN par le mécanisme d’excision de Bases ainsi qu’à l’étude de la mutagénèse associée aux voies impliquées dans ce mécanisme. Des travaux récents sont axés sur l’étude des mécanismes impliqués dans la mutagénèse associée à l’activation de la transcription. Titre du projet de stage : Etude de l’intégrité de la structure chromatinienne au cours de la réparation de cassure double chaine dans le contexte naturel de la recombinaison méiotique chez S. cerevisiae. Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage: Emmanuelle Martini Tél : 01 46 54 86 98 [email protected] Projet de stage : Afin de préserver l’intégrité de l’information génétique et épigénétique, il faut, au cours de la réparation de lésions de l’ADN, préserver non seulement l’information portée par la molécule d’ADN, mais également par la structure chromatinienne dans laquelle elle se trouve. Le premier niveau d’organisation de la chromatine est le nucléosome composé d’un fragment d’ADN entouré autour d’un octamer d’histones. Le génome est naturellement remanié au cours de la production des gamètes grâce à la formation et la réparation programmée de cassures doubles brins. Notre projet à pour but de suivre et d’identifier les modifications spécifiques des histones au cours de la méiose. Cette étude sera menée dans un premier grâce aux techniques de chromatine immunoprécipitation (CHIP) et western blot. L’organisme model utilisé est la levure S.cerevisiae. Cet organisme unicellulaire a largement permis d’identifier et de comprendre les étapes moléculaires essentielles à la division méiotique chez les eucaryotes supérieurs. Ce projet sera mené en collaboration avec Valerie Borde de l’UMR 218 à l’institut Curie Paris Techniques mises en œuvre par le stagiaire : Techniques de clonage afin de construire des outils génétiques tels que délétions de gènes, génération de proteines taggées. Chromatine immunoprécipitation sur protéines taggées et PCR quantitative Western blot Southern blot pour suivre la formation des cassures doubles brins au cours de la méiose dans les différents contextes mutants Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années : Analysis of chromatin remodeling during formation of a DNA double-strand break at the yeast mating type locus. Tsukuda T, Trujillo KM, Martini E, Osley MA. Methods. 2009 May;48(1):40-5. Epub 2009 Feb 24. Review. Crossover homeostasis in yeast meiosis. Martini E, Diaz RL, Hunter N, Keeney S. Cell. 2006 Jul 28;126(2):285-95. Autres informations Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Tomio Takahashi, soutenance en septembre. école doctorale : GGC Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des cinq dernières années. Guénaëlle Slezak . école doctorale : GGC Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ? Spécifique pour un étudiant scientifique, médecin ou vétérinaire Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ? oui