Synopsis type Small Mathilde

Synopsis-type
Présentation projet de mémoire de DES d’Oncologie
TITRE
Caractérisation des cancers de l’ovaire et du sein associés à des
dégénérescences cérébelleuses paranéoplasiques à anticorps anti-Yo
PROMOTEUR EVENTUEL
NA
COORDINATEUR
EVENTUEL
NA
TYPE D'ETUDE
Recherche translationnelle
Etude clinico-pathologique de cohortes rétrospectives
RATIONNEL
Les syndromes neurologiques paranéoplasiques (SNP) sont des
entités rares (moins de 0.01% des cancers1) et sont probablement
liés à une réaction auto-immune déclenchée par le cancer sous-
jacent2. Cette hypothèse auto-immune est suggérée par la présence
pathognomonique d’auto-anticorps retrouvés dans le LCR ou le
plasma des patients et la présence d’une infiltration immunitaire
massive intra-tumorale dans les rares cas publiés de SNP3-8.
Un des SNP les plus fréquents et les mieux caractérisés est la
dégénérescence cérébelleuse paranéoplasique à anticorps anti-Yo
(DCP-Yo). Les patientes atteintes de DCP-Yo présentent une ataxie
cérébelleuse subaiguë liée à une destruction des cellules de Purkinje
dans un contexte de cancer du sein ou de l’ovaire. Le diagnostic est
posé par la présence d’anticorps anti-Yo qui reconnaissent CDR2,
une protéine exprimée physiologiquement par les cellules de
Purkinje mais qui est aussi fréquemment exprimée par les cancers
de l’ovaire et du sein (environ 60 % des cas9). De ce fait, la
physiopathologie de cette réaction immunitaire croisée n’est pas
clairement élucidée10, l’expression de CDR2 n’étant pas suffisante
pour déclencher une DCP-Yo. Cet élément fait évoquer un défaut
de modulation des mécanismes de tolérance immunitaire vis-à-vis
de CDR2 et potentiellement CDR2L, un paralogue de CDR2
également exprimé de manière physiologique par les cellules de
Purkinje et récemment décrit comme une autre cible antigénique
des anticorps anti-Yo11,12.
Il est donc primordial de décrypter s’il existe une immunogénicité
particulière de CDR2 et CDR2L dans ces tumeurs ainsi que de
déchiffrer les mécanismes immunitaires impliqués dans cette levée
de tolérance immune.
Nous proposons de réaliser une étude de cohorte rétrospective qui
recherchera des altérations moléculaires susceptibles d’induire une
lever de tolérance immunitaire de CDR2 et CDR2Lpar CGH-array
et NGS dans les cancers de l’ovaire et du sein associés aux DCP-Yo
et caractérisera les infiltrats immunitaires intra-tumoraux par
immunohistochimie et immunofluorescence.
Cette étude propose un modèle original d’interaction immunité et
cancer et sera la première à caractériser sur le plan histologique et

moléculaire une cohorte conséquente de patientes atteintes de DCP-
Yo.
OBJECTIF PRINCIPAL
Caractérisation moléculaire des cibles antigéniques des anticorps
anti-Yo (CDR2 et CDR2L) dans les cancers de l’ovaire et du sein
associés aux DCP-Yo
OBJECTIFS
SECONDAIRES
Caractérisation des infiltrats immunitaires intra-tumoraux des
cancers de l’ovaire associés aux DCP-Yo
Caractérisation histologique des cancers de l’ovaire ou du sein
associés aux DCP-Yo
Recueil des données cliniques des patientes atteintes de DCP-Yo
associées au cancer de l’ovaire ou du sein
CRITERES
D’EVALUATION
 Caractérisation moléculaire de CDR2 et CDR2L :
- recherche d’une anomalie du nombre de copie d’ADN par CGH-
array et comparaison à une cohorte contrôle de 126 cancers de
l’ovaire et 10 cancers du sein sans DCP-Yo
- recherche de mutation par NGS et comparaison au data base du
TCGA et Cosmic
- recherche de mutations constitutionnelles de CDR2 et CDR2L
 Caractérisation histologique des cancers du sein et ovaire
associés aux DCP-Yo:
- relecture anatomopathologique de l’ensemble des blocs tumoraux
par un anatomopathologiste référent
- quantification de l’expression de CDR2 et CDR2L en IHC
 Caractérisation des infiltrats immunitaires intra-tumoraux
des cancers de l’ovaire associés aux DCP-Yo
- caractérisation des infiltrats lymphocytaires en IHC (CD3, CD8,
CD20, CD79a, Tbet, FoxP3) et en immunofluorescence (CD3,
CD20, MECA-79)
- caractérisation des cellules dendritiques en IHC (BDCA2,
DClamp)
 Collections des données cliniques (âge, date du diagnostic
de cancer, date du diagnostic DCP-Yo, diagnostic
anatomopathologique, stade TNM, date des dernières
nouvelles/décès)
CRITERES D’INCLUSION
Patientes atteintes d’une DCP-Yo associée à un cancer de l’ovaire
ou du sein, déclarées entre 1995 et 2015 au Centre de Référence
National des Syndromes Neurologiques Paranéoplasiques et
répondant aux critères diagnostiques internationaux13
Confirmation anatomopathologique par biopsie ou exérèse
chirurgicale d’un cancer du sein ou de l’ovaire, concomitant ou
précédant la DCP-Yo

ADN constitutionnel collecté par Neurobiotec non obligatoire
CRITERES DE NON
INCLUSION
Bloc tumoral non disponible
Absence de consentement à la collection des données cliniques et
biologiques de Neurobiotec.
ESTIMATION DU
POTENTIEL
D’INCLUSIONS
96 cas déclarés depuis 1995 au Centre de Référence des Syndromes
Neurologiques Paranéoplasiques, dont 57 cancers de l’ovaire et 22
cancers du sein.
HYPOTHESE
STATISTIQUE
NA
NOMBRE DE PATIENTS
Blocs tumoraux récupérés :
- cancer de l’ovaire : n = 25
- cancer du sein : n = 11
DUREE PREVISIBLE
DE L'ETUDE
4 ans
CALENDRIER
PREVISIONNEL AVEC
DATE DE DEBUT ET DE
FIN
Date de début : novembre 2014
Date de fin prévue : mai 2018
Ce travail a été initié dans le cadre d’un master 2 de Recherche en
Cancérologie entre 2014 et 2015 (recueil des données clinico-
biologiques des cancers de l’ovaire associés au DCP - Yo, CGH-
array sur les cas et contrôles, quantification et analyse des infiltrats
immunitaires des cancers de l’ovaire DCP - Yo).
Ce travail s’est poursuivi au delà du master 2 avec l’extension de la
cohorte aux cancers du sein DCP-Yo (collecte des blocs tumoraux
et des données clinico-biologiques, quantification des infiltrats
immunitaires, collection de la cohorte contrôle, CGH-array sur les
cas et contrôles) et réalisation d’un séquençage en NGS sur ADN
somatique et constitutionnel des cibles antigéniques des cohortes
seins et ovaires DCP-Yo.
La contribution à ce travail regroupe l’acquisition des données,
l’analyse et interprétation des données et la rédaction du manuscrit
pour publication (premier auteur, en cours).
TUTEUR
Dr Virginie Desestret
MCU-PH, Neurologie-Histologie
Service de Neurologie D, Hôpital neurologique Pierre Wertheimer,
Lyon
Faculté de Médecine Lyon-Sud, Histologie
Institut NeuroMyoGène, Équipe Synaptopathies et Autoanticorps
(SynatAc)
INSERM U1217 / UMR CNRS 5310
tél: [phone]
[e-mail]

FINANCEMENT
Lyric Grant INCa-DGOS-4664
ASPECTS
REGLEMENTAIRES
CPP
ANSM
CNIL
Avis favorable du CPP de Lyon (Sud-Est IV).
NA
Base de données Neurobiotec du Centre de Référence des
Syndromes Neurologiques Paranéoplasiques accréditée pour le
recueil des données cliniques et biologiques.
BIBIOGRAPHIE
1. Darnell RB, Posner JB. Paraneoplastic syndromes involving
the nervous system. N Engl J Med 2003;349(16):1543–54.
2. Dalmau J, Rosenfeld MR. Paraneoplastic syndromes of the
CNS. The Lancet Neurology 2008;7(4):327–40.
3. Cooper R, Khakoo Y, Matthay KK, et al. Opsoclonus-
myoclonus-ataxia syndrome in neuroblastoma:
histopathologic features-a report from the Children's Cancer
Group. Med Pediatr Oncol 2001;36(6):623–9.
4. Verschuuren J, Chuang L, Rosenblum MK, et al.
Inflammatory infiltrates and complete absence of Purkinje
cells in anti-Yo-associated paraneoplastic cerebellar
degeneration. Acta Neuropathol 1996;91(5):519–25.
5. Storstein A, Krossnes BK, Vedeler CA. Morphological and
immunohistochemical characterization of paraneoplastic
cerebellar degeneration associated with Yo antibodies. Acta
Neurologica Scandinavica 2009;120(1):64–7.
6. Sutton IJ, Steele J, Savage CO, Winer JB, Young LS. An
interferon-γ ELISPOT and immunohistochemical
investigation of cytotoxic T lymphocyte-mediated tumour
immunity in patients with paraneoplastic cerebellar
degeneration and anti-Yo antibodies. Journal of
Neuroimmunology 2004;150(1-2):98–106.
7. Cao Y, Abbas J, Wu X, Dooley J, van Amburg AL. Anti-Yo
positive paraneoplastic cerebellar degeneration associated
with ovarian carcinoma: case report and review of the
literature. Gynecologic Oncology 1999;75(1):178–83.
8. Peterson K, Rosenblum MK, Kotanides H, Posner JB.
Paraneoplastic cerebellar degeneration. I. A clinical analysis
of 55 anti-Yo antibody-positive patients. Neurology
1992;42(10):1931–7.
9. Darnell JC, Albert ML, Darnell RB. Cdr2, a target antigen of
naturally occuring human tumor immunity, is widely
expressed in gynecological tumors. Cancer Research

2000;60(8):2136–9.
10. Zaborowski MP, Spaczynski M, Nowak-Markwitz E,
Michalak S. Paraneoplastic neurological syndromes
associated with ovarian tumors. J Cancer Res Clin Oncol
2014;
11. Eichler TW, Totland C, Haugen M, et al. CDR2L
Antibodies: A New Player in Paraneoplastic Cerebellar
Degeneration. PLoS ONE 2013;8(6):e66002.
12. Schubert M, Panja D, Haugen M, Bramham CR, Vedeler
CA. Paraneoplastic CDR2 and CDR2L antibodies affect
Purkinje cell calcium homeostasis. Acta Neuropathol
2014;128(6):835–52.
13. Graus F. Recommended diagnostic criteria for paraneoplastic
neurological syndromes. Journal of Neurology,
Neurosurgery & Psychiatry 2004;75(8):1135–40.