Licence

REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE
MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE
SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE KASDI MERBAH, OUARGLA
FACULTE DES SCIENCES DE LA NATURE ET DE LA VIE
DEPARTEMENT DES SCIENCES BIOLOGIQUES
Projet de Fin d’Etudes
En vue de l’obtention du diplôme de
Licence
Domaine : Sciences de la nature et de la vie
Filière : Biologie
Spécialité : Biochimie fondamentale et appliquée
Thème
Encadreur : Mme BAYOUCEF Z.
Présenté par :
HAMADA AMEL
Examinateur : M BOUAL Z.
BELLILI KHALED
BENSLIMENE NOURA
Méthode et protocole d’extraction de myoblastes
primaires de muscle squelettique de certains animaux
Année universitaire 2013/2014

Listes de figures
Figure N°
Titre
Page
Figure 1
Représentation des différents nivaux d’organisation du muscle
squelettique (D’aprésNSCA2000)
10
Figure 2
Représentation schématique simplifiée des sarcomères
(D’après ottenheijm, C.A., et al).
10
Figure 3
Rôle des différents facteurs dans la myogénèse des cellules musculaires
(D’après Hawke and Garry 2001 pour une revue).
14
Figure 4
Représentation schématique des facteurs impliqués dans la régénération
de muscle squelettique (d’après Hawke and Garry 2001 pour une revue).
18
Liste de tableaux
Tableau N°
Titre
page
Tableau 1
Représente la comparaison entre la méthode par dissection et méthode
par digestion enzymatique
22
Sommaire
Introduction
Chapitre I
I.1 Définition de culture cellulaire 2
I.2.Les applications de la culture cellulaire 2
I.3. cellule souche 3
I.3.1.Types de cellules souches 3
I.3.1.1Les cellules souches embryonnaires 4
I.3.1. 2 Les cellules souches fœtales 4
I.3.1.3 Les cellules souches adultes 4

I.4.Différenciation 5
I.5.Lignée cellulaire 6
I.6.Les Cellules primaires 6
Chapitre II
II.1. Le système musculaire squelettique 9
II.2. Structure du muscle squelettique 9
II.1.myogenèse 11
II.1.1. Du myoblaste présomptif au myoblaste 11
II.1.2. Des myoblastes aux myotube 11
II.1.3. Du myotube à la myofibre 11
II.1.4.Les voies moléculaires et engagement dans la voie myogénique 12
II.2.Myoblaste 14
II.2.1.Caractéristiques de myoblastes 15
II.2.2Application de myoblastes 15
II.2.2.1Culture cellulaire 15
II.2.2.2Expérimental 15
II.2.2.3Thérapie cellulaire 16
II.3.Pathologie du muscle squelettique 16
II.3.1.Définition de myopathie 16
II.3.2Types de myopathies 17
II.3.2.1.Myopathies Génétiques 17
II.3.2.1.1.La myopathie de Duchenne 17
II.3.2.1.2 les myopathies métaboliques d’origine génétique 17
II.3.2.2. les myopathies inflammatoires 17
II.3.3.La régénération de muscle squelettique 17
Chapitre III
III.1.Modèles animaux 20

III.1.1.La souris mdx 20
III.1.2.Le Chien GRMD (Golden Retriever Muscular Dystrophy) 20
III.1.3.Le Chie LRMD (Labrador Retriever Muscular Dystrophy) 20
III.1.4 .Le Chat HFMD (Hypertrophic Feline Muscular Dystrophy) 21
III.2 .Les techniques d'obtention des cellules 21
III.2. 1.La méthode par dissection 21
III.2.1.1. Méthode de Carrel 21
III.2.1.2. Méthode de dissection 21
III.2.1.3.Méthode Jensen 21
III.2.1.4. Méthode mécanique 21
III.2.2.La méthode par digestion enzymatique 22
III.3.Protocole 22
III.4. Discussion 27
Conclusion