UE 605 : TD concepts de bases en immunologie

UE 605 : TD concepts de bases en immunologie
EXERCICE 1
Commentez les expériences du tableau suivant
Expériences Résultats
Greffe de peau de rat La peau n'est pas rejetée Ablation du thymus d'une
jeune souris Injection d'antigènes En général, pas d'anticorps
Greffe d'organe d'un autre
oiseau Rejet très rapide du greffon
Ablation de la bourse de
Fabricius d'un poussin Injection d'antigènes Jamais de production
d'anticorps
EXERCICE 2
Les GRM sont des globules rouges de
moutons, utilisés comme antigènes pour
induire une réponse immunitaire.
A : pourquoi y a-t-il agglutination ? que
provoque l'irradiation ?
B : interprétez les résultats.
B
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Donneur de
lymphocytes T et B
1-irradiation
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Lymphocytes T
uniquement
3-Uniquement
lymphocytes B
2-Injection
GRM
4- Sérum +GRM
B
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Donneur de
lymphocytes T et B
1-irradiation
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Lymphocytes T
uniquement
3-Uniquement
lymphocytes B
2-Injection
GRM
4- Sérum +GRM
2-Injection
GRM
1-irradiation
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Donneur de
lymphocytes T et B
1-irradiation
2-Injection
GRM
1-irradiation
2-Injection
GRM
1-irradiation
3-Lymphocytes T
uniquement
3-Uniquement
lymphocytes B
2-Injection
GRM
4- Sérum +GRM
EXERCICE 3
Commentez les expériences du tableau suivant
Expériences Résultats
souris sans thymus Inoculation du virus de la grippe Prolifération des virus
souris sans thymus injectée avec du
sérum d'une souris guérie de la grippe
Inoculation du virus de la grippe Pas de prolifération
mais les virus persistent
Souris ayant un thymus mais déplétée
en lymphocytes B Inoculation du virus de la grippe
Disparition des virus
Injection GRM
Injection
GRM
irradiation
ASérum +GRM
Injection GRMInjection GRM
Injection
GRM
irradiation
Injection
GRM
irradiation
ASérum +GRM

EXERCICE 4
Des lymphocytes T et B sont prélevés dans la rate d'une
souris sensibilisée contre l'antigène A soluble puis placés
dans une chambre de Marbrook (ci-contre). Le nombre de
plasmocyte obtenu est alors comptabilisé selon les
conditions du tableau
Chambre
supérieure Chambre inférieure Plasmocytes par 10
6
splénocytes
T +B 960
B 72
T B 1011
EXERCICE 5
Les lymphocytes sont isolés de la
rate d'une souris normale avant
ou après infection par un virus. Le
surnageant de culture est ajouté à
une suspension de lymphocytes
issus d'une souris CD4
-/-
puis on
ajoute de la thymidine tritiée.
Après 6h, la radioactivité
incorporée est mesurée.
Qu'est ce qui est testé par cette
méthode ?
Quelles conclusions peut-on tirer
?
138 ±84 207 ±10511568 ±2484138 ±84 207 ±10511568 ±2484
EXERCICE 6
Les splénocytes d'une souris normale sont prélévés et mis en culture 30min. dans une boite de
pétri en plastique. Les cellules adhérentes ou en suspension sont alors réparties dans des milieux
contenant des globules rouges de moutons (GRM). Quatre jours après, on recherche dans
chacunes des conditions la présence d'anticorps anti-GRM.
A quoi sert l'étape de culture dans du plastique? Que montre cette expérience ?

EXERCICE 7
On injecte à une souris normale soit des globules rouges de moutons (GRM) soit des globules
rouges de poules (GRP). Après 10 jours on collecte les lymphocytes et on les remets en contact
avec le même antigène, soit GRM, soit GRP. Des rosettes se forment qui sont eliminées par
centrifugation lente. On injecte les lymphocytes restant en suspension à des souris "nude" en
même temps qu'un mélange de GRM + GRP. On observe enfin quelle est la nature des anticorps
produits.
Que sont les rosettes qui se forment ? à quoi sert cette étape ? que montre cette expérience ?
EXERCICE 8
De l'ADN était isolé de trois sources : des cellules hépatiques, des cellules de lymphome pré-B et
des cellules de myélome sécrétrices d'anticorps. Chaque échantillon d'ADN était digéré
séparément avec les enzymes de restriction BamHI et EcoRI qui clivent l'ADN des chaînes lourdes
et des chaînes légères κ de la lignée germinale comme il est indiqué dans la partie (a) de la figure
d'accompagnement. Les échantillons digérés étaient analysés par Southern blotting en utilisant
une sonde Cµ1 radiomarquée avec les digestats de BamHI (blot #l) et une sonde Cκ
radiomarquée avec les digestats d'EcoRI (blot #2). Les profils des blots sont décrits dans la partie
(b) de la figure. En vous appuyant sur ces informations, quel échantillon d'ADN (appelé A, B ou C)
était isolé (a) des cellules du foie, (b) des cellules de lymphome pré-B et (c) des plasmocytes
sécréteurs d'IgM. Expliquez vos attributions.

EXERCICE 9
Ces expériences sont réalisées chez des souris de lignées pures où A et B correspondent à des
types H2 (molécules murines du CMH) différents. Interprétez ces expériences.
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Pas de destruction
Souris de souche A
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Destruction
Souris F1 (AxB)
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Pas de destruction
Souris de souche A
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Pas de destruction
Souris de souche A
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Destruction
Souris F1 (AxB)
Infection par un virus
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Destruction
Cellules de souche B infectées :
Destruction
Souris F1 (AxB)
EXERCICE 10
Le système immunitaire d'une souris (AxB) est détruit puis reconstitué avec des cellules souches
hématopoïétique (AxB) et un thymus B. Après reconstitution la souris est exposée à un virus puis
ses lymphocytes sont mis en contact in vitro avec différentes sortes de cellules cibles. Interprétez.
Infection par un virus
Souris F1 (AxB)
Irradiée
thymectomisée
Greffe de
moelle osseuse
(AxB)
Greffe de
Thymus B
Reconstitution
hématopoïétique
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Pas de destruction
Cellules de souche B infectées :
Destruction
Infection par un virus
Souris F1 (AxB)
Irradiée
thymectomisée
Greffe de
moelle osseuse
(AxB)
Greffe de
Thymus B
Reconstitution
hématopoïétique
Lymphocytes T
Cellules de souche A infectées :
Pas de destruction
Cellules de souche B infectées :
Destruction

EXERCICE 11
Commentez les expériences ci-dessous
J0 J15
survie
mort
J0 J15
survie
mort
A
survie
J0 J30
survie
J0 J30
B
survie
mort
survie
mort
survie
mort
survie
mort
survie
mort
survie
mort
EXERCICE 12
Les lymphocytes de la rate d'un cobaye immunisé par le BCG sont prélevés et séparés sur une
colonne contenant des billes de verre greffées avec des anticorps "anti-anticorps". On injecte à
deux autres cobayes non immunisés soit les lymphocytes B soit les lymphocytes T avant de les
exposer au bacille de Koch.
Commentez cette expérience.
EXERCICE 13
Vous travaillez dans un laboratoire d’analyse et vous disposez de 4 échantillons sanguins à
analyser. Vous réalisez un frottis à partir de chaque échantillon pour établir la NFS de chacun des
individus. Sachant que l’un de ces individus est sain et vous sert de référence, identifier cette
personne ; commentez les résultats des 3 autres en identifiant si possible leur sexe et suggérez un
diagnostic pour chacun d’entre eux.
1er individu : Globules rouges : 4 106 /mm3 2ème individu : Globules rouges : 5.7 106 /mm3
Globules blancs : 5 103 /mm3 Globules blancs : 4.5 103 /mm3
Neutrophiles 56.5 % Neutrophiles 59 %
Basophiles 0.5% Basophiles 0.4%
Eosinophiles 7% Eosinophiles 2%
Lymphocytes 28% Lymphocytes 31%
Monocytes 8% Monocytes 7.5%