Juin 2014 -Sujet de J.-M. Dura (sur 10 points, temps: 1 heure) Répondez de façon précise et concise. Ecrivez de façon lisible. If it is easier for you, you may write in english. Question n°1 (sur 2 points): Dans le système nerveux ventral de la drosophile certains neurones traversent la ligne médiane une seule fois au niveau d’une commissure et continuent leur route de l’autre coté (A). Chez les mutants commissureless (comm) les axones ne traversent pas (B). Chez les mutants roundabout (robo) les axones traversent plusieurs fois la ligne médiane (C). En considérant que ces mutants sont des pertes totales de fonction, proposez une hypothèse moléculaire d’abord pour le rôle de la protéine ROBO puis pour celui de COMM. Réponse en 5 lignes maximum. Question n°2 (sur 2 points): La lignée ap-GAL4 associée à UAS-tau-lacZ marque des neurones non commissuraux (qui ne traversent pas la ligne médiane, figure a). On exprime de façon artificielle le gène sauvage comm+ (UAS-comm en d) dans ces neurones ap-GAL4, qui maintenant traversent la ligne médiane, certains par la commissure antérieure (AC), d’autres par la commissure postérieure (PC). 1) Proposez une hypothèse moléculaire pour expliquer le phénotype en d. Réponse en 3 lignes maximum. Le récepteur membranaire drl est exprimé, sous le contrôle UAS, soit sous forme complète (UAS-comm +UAS-drl en e sur la photo) soit dépourvu de son domaine extra cellulaire (UAScomm+ UAS-drlΔE en f sur la photo). 2) Décrivez le phénotype que vous voyez en e et f et donnez une interprétation moléculaire. Réponse en 5 lignes maximum. Question n°3 (sur 2 points): Comment a été génétiquement identifié le ligand WNT5 du récepteur DRL ? Réponse en 5 lignes maximum. Question n°4 (sur 1 point): 1) Quelle construction, à partir de la protéine DRL, peut-on faire afin de localiser le ligand in situ ? NB : Il ne s’agit pas de produire un anticorps ! Réponse en 3 lignes maximum. 2) Que devient le marquage ainsi obtenu dans un embryon dépourvu génétiquement du ligand de DRL ? Réponse en 1 ligne maximum. Question n°5 (sur 3 points): Les neurones γ des corps pédonculés de la drosophile sont remodelés au cours de la métamorphose. La présence des récepteurs nucléaires ECR-B1, FTZ-F1 est nécessaire à ce remodelage neuronal alors que le récepteur nucléaire Hr39 doit être réprimé. La présence et la répression sont autonomes cellulaires. 1) Donnez un argument expérimental qui contredit l’hypothèse selon laquelle ECR-B1 régule positivement ftz-f1 et négativement Hr39. Réponse en 3 lignes maximum. 2) Donnez deux arguments expérimentaux qui confirment que FTZ-f1 régule positivement EcR-B1 et que HR39 régule négativement EcR-B1. Réponse en 6 lignes maximum.