DD2 - AGPI

D IRECTION E NVIRONNEMENT
Madame Louise Larivière
FORBO LINOLEUM INC.
8300, rue Pascal-Gagnon
Saint-Léonard (Québec) H1P 1Y4
G UY G ENEST , ING .
C ONSEILLER EN DÉVELOPPEMENT TECHNOLOGIQUE
M ICHEL C OMEAU , TECHNICIEN R-D M ARIE -J OSÉE H ARDY , MICROBIOLOGISTE
R ESPONSABLE TECHNIQUE D IRECTRICE ADJOINTE
D IRECTION E NVIRONNEMENT D IRECTION E NVIRONNEMENT
Q UÉBEC , LE 15 MARS 2006
DÉTERMINATION DE L’EFFICACITÉ
BACTÉRIOSTATIQUE ET BACTÉRICIDE D’UN
REVÊTEMENT DE SOL
Dossier CRIQ n
o
640-PE35964
Rapport technique

FORBO LINOLEUM INC. ii
D OSSIER CRIQ NO 640-PE35964 ( RAPPORT TECHNIQUE )
TABLE DES MATIÈRES
PAGE
1. INTRODUCTION..................................................................................................... 1
2. OBJECTIF DU PROJET ......................................................................................... 1
3. DESCRIPTION DES TRAVAUX ............................................................................. 1
3.1 P RÉPARATION DES ÉCHANTILLONS .................................................................... 2
3.2 É VALUATION QUALITATIVE DE L ’ EFFICACITÉ BACTÉRICIDE OU BACTÉRIOSTATIQUE
SELON TNO SEEDLAYER METHOD .................................................................... 2
3.3 É VALUATION QUANTITATIVE DE L ’ EFFICACITÉ BACTÉRICIDE SELON AATCC 100 ... 3
3.4 U NE ÉVALUATION DU TEMPS DE CONTACT NÉCESSAIRE DU REVÊTEMENT
M ARMOLEUM AVEC LA BACTÉRIE POUR LA DÉTERMINATION DE L ’ ACTIVITÉ
BACTÉRICIDE OU BACTÉRIOSTATIQUE ( MÉTHODE IN VIVO SIMULATIONS )................ 4
4. RÉSULTATS OBTENUS......................................................................................... 4
4.1 R ÉSULTAT DE L ’ ÉVALUATION QUALITATIVE DE L ’ EFFICACITÉ MESURÉE SELON TNO
SEEDLAYER METHOD ....................................................................................... 4
4.2 R ÉSULTAT DE L ’ ÉVALUATION QUANTITATIVE DE L ’ EFFICACITÉ BACTÉRICIDE SELON
AATCC 100.................................................................................................. 5
4.3 R ÉSULATS DE L ’ ÉVALUATION DU TEMPS DE CONTACT ( MÉTHODE IN VIVO
SIMULATIONS )................................................................................................. 6
5. CONCLUSION........................................................................................................ 7

FORBO LINOLEUM INC. iii
D OSSIER CRIQ NO 640-PE35964 ( RAPPORT TECHNIQUE )
LISTE DES TABLEAUX
PAGE
TABLEAU I : CROISSANCE OBSERVÉE APRÈS 72 HEURES D'INCUBATION
(TNO SEEDLAYED METHOD).......................................................... 5
TABLEAU II : EFFICACITÉ BACTÉRICIDE............................................................. 6
TABLEAU III : CROISSANCE OBSERVÉE EN FONCTION DU TEMPS DE
CONTACT......................................................................................... 7

FORBO LINOLEUM INC. 1
D OSSIER CRIQ NO 640-PE35964 ( RAPPORT TECHNIQUE )
1. INTRODUCTION
FORBO LINOLEUM INC. fabrique et distribue un revêtement de sol à base d’huile de
lin commercialisé sous le nom de Marmoleum. Ce revêtement a déjà été testé dans le
passé pour en démontrer l’efficacité bactéricide et bactériostatique sur différents
microorganismes.
2. OBJECTIF DU PROJET
L’objectif de ce projet consistait à déterminer l’efficacité bactéricide et bactériostatique
du revêtement Marmoleum sur la bactérie Clostridium difficile selon trois méthodes
d’essais différentes auxquelles le revêtement Marmoleum avait déjà été soumis soit :
 une évaluation qualitative de l’efficacité bactéricide ou bactériostatique (TNO
seedlayed method);
 une évaluation quantitative de l’efficacité bactéricide selon la norme AATCC 100;
 une évaluation du temps de contact nécessaire du revêtement Marmoleum avec la
bactérie pour la détermination de l’activité bactéricide ou bactériostatique
(méthode in vivo simulations).
3. DESCRIPTION DES TRAVAUX
Un échantillon de revêtement Marmoleum a été livré au CRIQ le 2 février 2006. Les
essais se sont déroulés entre le 20 février et le 10 mars 2006. Chacun des essais a
été réalisé sur un échantillon de revêtement tel qu’il a été reçu ainsi que sur un
échantillon ayant été soumis à une lixiviation d’une heure dans de l’eau du robinet et
séché ensuite à l’air ambiant.
Dans tous les cas, les essais ont été réalisés dans du bouillon ou sur une gélose
contenant le milieu de culture Reinforced Clostridium Medium et la souche utilisée fut
Clostridium difficile ATCC 9689.

FORBO LINOLEUM INC. 2
D OSSIER CRIQ NO 640-PE35964 ( RAPPORT TECHNIQUE )
3.1 PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS
Avant de procéder à chacun des essais, les échantillons ont d’abord été découpés
selon la forme et la dimension requises. Ils ont ensuite été désinfectés avec une
solution d’alcool éthylique à 70 %.
La moitié des échantillons ont, par la suite, été soumis à une lixiviation d’une heure
dans de l’eau du robinet. Pour ce faire, ils ont été placés dans un contenant peu
profond et une quantité d’eau suffisante pour les recouvrir y a été ajoutée. Les
contenants ont été placés sur une plaque agitante ajustée à une vitesse suffisamment
élevée pour permettre un faible déplacement de l’eau à la surface des pièces de
revêtement. Après une heure, ils ont été retirés de la solution, égouttés et mis à
sécher sur une grille en acier inoxydable pendant une heure à la température de la
pièce.
3.2 ÉVALUATION QUALITATIVE DE L’EFFICACITÉ BACTÉRICIDE OU
BACTÉRIOSTATIQUE SELON TNO SEEDLAYER METHOD
Le principe de cette évaluation consiste à mettre en contact une suspension de
bactéries en concentration connue dans une gélose liquéfiée et de transférer une
petite quantité de cette suspension à la surface du revêtement. Pendant la période
d’incubation, les échantillons sont inspectés périodiquement pour déterminer s’il y a
eu développement ou non de la bactérie.
Une culture de Clostridium difficile a été réalisée en inoculant 10 ml de bouillon
Reinforced Clostridium Medium et en l’incubant en condition anaérobie à 35 °C
pendant 48 heures. Cette culture a ensuite été diluée dans une gélose liquéfiée
contenant le même milieu de culture pour obtenir une concentration finale d’environ
10
5
UFC (unités formatrices de colonies) par millilitre.
Deux rondelles de téflon d’un diamètre de 1 cm et d’une épaisseur de 0,5 cm ont
ensuite été placées sur un échantillon de revêtement de 5 cm sur 5 cm et chacune a
été remplie avec 0,5 ml de gélose inoculée. Après solidification de la gélose, les
échantillons ont été déposés dans des plats de pétri de 100 x 15 mm et incubés
pendant 4 jours à 35 °C en condition anaérobie. Un échantillon témoin a également
été préparé en transférant la même quantité de gélose inoculée dans une rondelle
placée au fond d’un plat de pétri stérile et incubé dans les mêmes conditions, de
même qu’un contrôle de stérilité de la gélose avant son inoculation.