Empreinte génétique - Les Romanov : la mystérieuse histoire

10/1/2016 Empreintegénétique—Wikipédia
https://fr.wikipedia.org/wiki/Empreinte_g%C3%A9n%C3%A9tique 1/12
Les13locusCODISpermettantla
réalisationd'empreintesgénétiques
Empreintegénétique
Uneempreintegénétique,ouprofilgénétique,estlerésultat
d'uneanalysegénétique,rendantpossiblel'identificationd'une
personneàpartird'unepetitequantitédesestissusbiologiques
(bulbedecheveux,sang,salive,sperme).
L'empreintegénétiquereposesurlefaitsuivant:bienquedeux
humainsaientunelargemajoritédeleurpatrimoinegénétique
identique,uncertainensembledeséquencesdansleurADNreste
spécifiqueàchaqueindividu(enraisondupolymorphisme).Ce
sontcesséquencesspécifiquesd'unindividuquel'analyse
d'empreintegénétiquepermetdecomparer.Siunéchantillonde
cellulesprésentelamêmeempreintegénétiquequ'unindividu,on
peutsoutenirquecescellulesproviennentdecetindividu,oude
sonéventueljumeaumonozygote.
Danssonacceptioninitiale,l'expressionempreintegénétique,del'anglais«geneticfingerprint»,est
forméeparanalogieaveclesempreintesdigitalesutiliséesdanslecadredel'identificationdescriminels,
quisontréputéespropresàchaqueindividu.
Lesempreintesgénétiquessontutiliséesenmédecinelégalepouridentifierouinnocenterdessuspects
grâceàleursang,leursalive,leurspoilsouleursperme.Ellespermettentégalementd'identifierdes
resteshumains,defairedestestsdepaternité,d'organiserledond'organe,d'étudierdespopulations
d'animauxsauvagesoumêmedegénérerdeshypothèsessurladiasporahumainelorsdelapréhistoire
(BryanSykes,LesSeptFillesd'Ève).
Enraisonducaractèresensibledecetteinformation,lestestssontsoumisàdescontrainteslégales.En
France,leComitéconsultatifnationald'éthiqueaindiqué:«Enmatièrecivileetfamiliale,
l'indisponibilitédel'identitécivileetdelafiliation,dontl'établissementnerequiertpasdepreuve
biologiqueendehorsd'unprocès,lasécuritédulienparentaldansl'intérêtprimordialdel'enfant,
l'équilibreetlapaixdesfamilles,justifientquelapreuvebiologiquenepuisseêtrerapportéequesousle
contrôledujuge,danslecadred'uneactionenjusticerelativeàlafiliationetjuridiquementrecevable» .
1

10/1/2016 Empreintegénétique—Wikipédia
https://fr.wikipedia.org/wiki/Empreinte_g%C3%A9n%C3%A9tique 2/12
Sommaire
1 Historique
2 Principesgénéraux
2.1 Fiabilité
3 Différentestechniquesd'analyse
3.1 PCR
3.2 RFLP
3.3 AFLP
3.4 Analyseparamplificationaléatoired'ADNpolymorphe
3.5 Analysedel'ADNmitochondrial
3.5.1 Avantage
3.5.2 Technique
3.6 AnalyseduChromosomeY
3.6.1 Inconvénient
3.6.2 Avantages
4 Utilisationdansledomainejudiciaire
4.1 Aspectslégislatifsetjuridiques
4.1.1 Discussionautourdespreuvespartestd'ADN
4.2 Erreursduesauxanalysesd'ADN
4.2.1 Caractèrealéatoiredesanalysesd'ADN
4.3 Casremarquables
4.3.1 Disculpationd'accusésetdecondamnés
4.4 Testd'ADNetloifrançaisesurl'immigration
5 Notesetréférences
6 Voiraussi
6.1 Articlesconnexes
6.2 Liensexternes
Historique
En1985,LordAlecJeffreys(9janvier1950),docteurbritanniqueengénétique,découvrelaméthode
d'identificationparl'ADN .
Latechniqueestcommercialiséeen1987.
En1983,unejeunebritanniqueâgéede15ansfutretrouvéemorte.Oncruttoutd'abordàunmeurtrepar
asphyxie,puisondécelasursoncorpsdesmarquesdetorturesetdeviol.En1986,toutprèsdulieudu
premiermeurtre,aétéretrouvéunautrecorps.Lemodeopératoireétaitlemême.En1988,laméthode
d'identificationparl'ADNaétédémocratisée,cequipermitdedisculperlesuspect(quideviendraalors
lepremierhommesoumisàunedisculpationdansl'histoiredelajusticeetdelacriminalistique)etde
retrouverlevraicoupable,quifutcondamnéàlaprisonàvie,puissapeinefutréduite,pourbonne
conduite,à28ansdeprisonferme.Ilpourrademandersaremiseenlibertéconditionnelleen2015.
Principesgénéraux
L'ADNestconstituédeséquencesdenucléotidesparmilesquatresuivants:A(adénine),C(cytosine),T
(thymine),G(guanine).
2

10/1/2016 Empreintegénétique—Wikipédia
https://fr.wikipedia.org/wiki/Empreinte_g%C3%A9n%C3%A9tique 3/12
Schémad'unfragmentd'ADN
Ilfautrappelerquelesgènespermettentlafabricationdes
protéines.Maisilexistesurl'ADNdesportionsquinecodent
aucuneprotéine.Cesontcertainesd'entreelles,appeléesles
microsatellitesetminisatellites,quisonttrèsvariablesselonles
individusetpermettentdoncd'établirlesempreintesgénétiques.
Lesmicrosatellitesetminisatellitessontdesséquencesde
nucléotidescomposéesderépétitionsdeséquencespluspetites.Il
ya:
lesséquencesrépétéesentandemcourtes,appeléesaussi
microsatellitesouSTR,pourShortTandemRepeats,en
anglais.Laplupartdesséquencesrépétéessontdesrépétions
dequatrenucléotides,maisleslongueursdedeuxàcinqbases
sontaussiétudiées.Exemple:
CTGGCTGGCTGGCTGGCTGGCTGG
lesminisatellites,ouVNTR,pour«VariableNumberTandem
Repeats».Lesséquencesrépétéessontdesrépétitionsde10à
100nucléotides.Onregroupeparfoiscesméthodessousle
nom«MultipleLociVNTRAnalysis»(Mlva).
Cesrégionsdel'ADNsonttrèspolymorphes:eneffet,lenombre
derépétitionsestvariablepourchaqueindividu.Parcequeles
gensn’ontpaslemêmenombrederépétitions,cesrégionsde
l'ADNpermettentd'identifierlesindividus.
Lesrégionsdeschromosomesoùsesituentcesséquences(leurslocus)doiventêtrerepérées,puis
amplifiéesparPCR:ils'agitdefabriquerdenombreusescopiesdecetADNpourqueceluicisoit
«visible»àlafindel'analyse.Lesfragmentsd'ADNobtenussontséparésetidentifiéspar
électrophorèse.Cecipermetdeconnaîtreleurlongueuretdoncd'endéduirelenombrederépétitions.
Lesdeuxméthodesdeséparationslespluscommunessontl’électrophorèsecapillaireetélectrophorèse
surgel.
Fiabilité
Lagrandeforcedessystèmesbaséssurlesmicrosatellitesestlafiabilitéstatistiquedel’identification.
Lepolymorphismedechaquemicrosatelliteestparluimêmetrèsvariable.Uneversiond'unmêmelocus
(etnonallèlepuisquelaséquenceestdansunezonenoncodantedel'ADN)peutavoirunefréquence
compriseentre5et20%desindividus.Unseullocusnepermetdoncpasdedésignerunindividuprécis.
Ilfaututiliserplusieurslocus.
EnFrance etauxÉtatsUnis,onutilisecourammenttreizelocus(régionsdeséquencerépétée)pourune
identification.Etcommechaquelocusestcomposéd’unecertaineséquencederépétition(microsatellite)
etquelenombrederépétitionsestparfaitementindépendant[réf.nécessaire]desrépétitionssurlesautres
locus,lesrèglesdestatistiquespeuventêtreappliquées.
3

10/1/2016 Empreintegénétique—Wikipédia
https://fr.wikipedia.org/wiki/Empreinte_g%C3%A9n%C3%A9tique 4/12
Parexemple,pourtroislocusA,BetC,indépendants,etpourlesquelsilexisteplusieursversions(A1,
A2,A3,etB1,B2,etc.),onpeutdirequeProbabilité(A1,B2,C1)=Probabilité(A1)xProbabilité(B2,)x
Probabilité(c1).Ainsi,pour13locus,laprobabilitéd’avoirdeuxséquencesidentiquespourdeux
individusdifférentsnonapparentésestestiméeà1chancesur1018,cequiestquasimentnégligeable
(trèsprochedezéro).Parconséquent,pluslenombredemicrosatellitesanalysésestimportant,plus
l’identificationestfiable.Toutefois,danslecasgénéral,sionnesaitpassiles2individussont
apparentés,laprobabilitémonteà1chancesur3x1012(parceque0,2%delapopulationmondialeest
constituéedejumeauxmonozygotes).
Selonlespays,différentssystèmesd'identificationdel'ADNbaséssurlarépétitiondesmicrosatellites
sontutilisés.EnAmériqueduNord(ÉtatsUnis,Canada),lanormeCODISestlaplusutilisée,alors
qu’enAngleterre,c’estleSGM+.Mais,detoutemanière,plusieurszonesdemicrosatellitessont
communesauxdifférentesnormesutilisées,cequipermetlacompatibilitéentreelles.
EnFrance,lesempreintesgénétiquessontrassembléesdansleFichiernationalautomatisédes
empreintesgénétiques(FNAEG),destinéàl'origineàrecueillirlesempreintesdespersonnes
condamnéespourinfractionsàcaractèresexuel,maisdontl'usages'estrapidementétenduàtoutessortes
dedélit,contenanten2008plusde700000profils(soitprèsde1%delapopulationfrançaise) .
Différentestechniquesd'analyse
Ilfautd'abordextrairel'ADNdeséchantillonsdecellules.Ceséchantillonspeuventêtredesang,de
salive,despermeoutoutautrefluideoutissucorporeladéquat.
Ilfautensuitecibleretanalyserlesséquencesrépétées.
PCR
LaméthodeparPCRestlaplusutiliséecarelleprésenteplusieursavantages:
ellenécessitepeud'ADN,1à2nanogrammes;
elleestrapide:unejournée.
Avecl’inventiondelaréactionenchaîneparpolymérase(appeléePCRenanglais),lestestsd'ADNont
faitunbondenavantdanslaprécisionetlespossibilitésd’analyseàpartird’untoutpetitéchantillonde
départ.
Laréactionenchaîneparpolymérasepermetdemultiplierdesséquencesspécifiquesd'ADNenjouant
surlespropriétésd’hybridationetdedénaturationdesbrinscomplémentairesd'ADNenfonctiondela
température.Cesélémentspermettentdecontrôlerl’activitéenzymatiquegrâceàdestransitionsde
températurerépétéesdemanièrecyclique(grâceàunthermocycleur)quiconduisentàunechainede
réplicationscycliques.
L’undesprincipauxreprochesfaitàlaméthodeRFLPétaitlagrandequantitéetlaqualitéde
l’échantillond'ADNnécessaire.
Ledéveloppementdeméthodesd’amplificationpermetl’analysed’échantillonspluspetitsoudégradés.
DesméthodescommeleHLADQalphareversesontdevenuestrèspopulairesparleurfacilitéetla
rapiditéd’obtentiondesrésultats,bienqu’ellessoientmoinsprécisesqueleRFLP.Parexemple,elles
étaientinappropriéespouridentifierdifférentsADNmélangésdansl’échantillondedépartcommepour
4
Articledétaillé:Réactionenchaîneparpolymérase.

10/1/2016 Empreintegénétique—Wikipédia
https://fr.wikipedia.org/wiki/Empreinte_g%C3%A9n%C3%A9tique 5/12
ceuxdesfluidesvaginauxdesvictimesdeviols.
RFLP
LaPolymorphismedelongueurdesfragmentsderestriction(RFLP)étaituneméthodelongueet
laborieuse(1semaine)quinécessiteunegrandequantitéd'ADNdebonnequalitépourêtreutilisée.Elle
aétésupplantéeparlaméthodePCR.
L’analyseRFLP(«restrictionfragmentlengthpolymorphism»:analysedupolymorphismedelongueur
desfragmentsderestriction)estunedestoutespremièrestechniquesd'analysed'ADN.Elleaétédepuis
complètementremplacéepardestechniquesplusrécentescommeleSéquençagedel'ADN.
L’analyseRFLPutiliseuneenzymederestrictionpourdécouperl'ADNenfragmentsquisontensuite
séparésenbandesparélectrophorèseengeld'agarose.
Ensuite,lesbandesd'ADNsonttransféréesdugeld’électrophorèsesurunemembranenylonparune
techniqueappeléeSouthernblot.
Lamembranenylonrecouvertedesbandesdefragmentd'ADNsubituneirradiationquifixedes
séquencesd'ADNspécifiquessurlamembrane.l'ADNnonfixéparlesradiationsestéliminéenlavantla
membrane.
Lamembranenylonaveclesséquencesd'ADNirradiésestalorsplacéesurunfilmsensibleauxrayons
X.Cefilmestalorsdéveloppépourobteniruneimagedesbandes.L’imageobtenueestappelécarte
génétiqueou«cartederestriction»d'unemoléculed'ADN.
Lacartederestrictiondonnel'ordredessitesderestrictionlelongdecettemolécule,etlatailledes
fragmentsproduits.
Enfaisantplusieursanalysessurdifférentsmorphismes,onarriveàunniveaudediscrimination
exploitable.
L'inconvénientprincipaldelaméthodeRFLPestquelestaillesexactesdesbandessontinconnuesetla
comparaisonàuneéchelledepoidsmoléculaireestpurementqualitative.
Beaucoupdelaboratoiresontdéveloppédesmodèlesdécrivantcequ'ilsconsidéraientcommecartede
restrictionderéférence,maisilsn'ontpasétéstandardisésetlaprisedesempreintesparRFLPasubides
attaquesjudiciaires(USA:PartieCivilevs.Castro545N.Y.S.2e.985(Sup.Ct.1989)).
AFLP
Uneautretechnique,AFLPouamplifiedfragmentlengthpolymorphismaétéutiliséeaudébutdes
années1990.Cettetechniqueestplusrapidequel’analyseRFLPetutiliselatechniquedelaréactionen
chaîneparpolymérasepourrépliquerleséchantillonsd'ADN.
OndistinguelesdifférentsallèlesparlepolymorphismedesRépétitionenTandemPolymorphe
(variablenumbertandemrepeatVNTRenanglais)séparésparélectrophorèsesurgelpolyacrylamide
utilisantuneéchelledemesured’allèles(paroppositionauxéchellesdepoidsmoléculaires).
Articledétaillé:Polymorphismedelongueurdesfragmentsderestriction.
Articledétaillé:Amplifiedfragmentlengthpolymorphism.