/ . Embryol. exp. Morph. Vol. 32, 3, pp. 619-635, 1974 Printed in Great Britain Analyse experimentale de la regulation du nombre des cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet ParELIANE DIDIER, NOEL FARGEIX ET YVES BERGEAUD1 Laboratoire de Biologie Animale, Universite de Clermont E.R.A. no. 408 SUMMARY Experimental study of the regulation of the number of germ cells following gonadial deficiency in the chick Colonization of the genital ridges by germ cells was quantitatively studied in control chick embryos killed at stages 25-29, and in embryos in which a surgical excision of the gonad presumptive area was made previously on the second day. In operated embryos which show a more or less perfect agenesis of one gonad, the number of germ cells counted in genital ridges is lower than the number of germ cells estimated in the same stages of control embryos. The deficit is greater for left gonadic agenesis. The decrease in the total number of germ cells is essentially due to a reduction in the cells colonizing the deficient gonad. There is no excess of germ cells observed in the control gonad. Accordingly, a right side operation strengthens the asymmetry of germ cells distribution, whereas a left side one reduces it. Thus, in birds the regulation of the number of germ cells and the quantitative control of colonisation of the gonads is at the gonad level. INTRODUCTION Chez les Oiseaux, la segregation du materiel germinal dans l'aire extraembryonnaire aux jeunes stades du developpement permet d'aborder l'etude des regulations a l'aide de differentes methodes, en offrant la possibilite d'intervenir, soit au niveau des cellules germinales primordiales (CGP), soit au niveau du composant somatique de la gonade. Le premier procede a ete frequemment utilise, en particulier dans des experiences d'excision ou d'irradiation du croissant germinal qui aboutissent, dans la plupart des cas, a l'edification de gonades steriles (Benoit, 1930; Dantchakoff, 1933; Goldsmith, 1935; Willier, 1937; Salzgeber, 1950; Marin, 1959; Simon, 1960; Dubois, 1962; Mims & McKinell, 1971; Bruel, 1973). 1 Adresse des auteurs: Laboratoire de Biologie Animale. B.P. 45-63 170, Aubiere, France. 620 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD L'experience inverse, qui consiste a accroitre le stock initial de cellules germinales a ete pratiquee par Simon (1960) qui associe en culture 'in vitro' un blastoderme d'Oiseau de 24 a 48 heures d'incubation et deux croissants de Swift: malgre l'excedent de CGP, la colonisation de la region gonadique ne semble pas modifiee au 3eme jour d'incubation. Agissant par ailleurs au niveau du composant somatique de la gonade, Simon (1960) etudie le comportement des CGP chez des embryons tronques, c'est-a-dire prives d'une partie de leur territoire gonadique: le taux de colonisation de la partie restante est toujours plus bas que celui d'une gonade entiere. II semble done que le rudiment gonadique laisse en place ne puisse fixer qu'une certaine quantite de gonocytes, meme si un excedent de CGP est present dans la circulation. Les resultats obtenus par Fargeix (1968, 1970) a la suite d'experiences de fissuration de blastodermes de Canard vont dans le meme sens et conduisent a penser que la regulation du materiel germinal et la determination de l'importance du peuplement gonocytaire s'effectuent essentiellement au niveau du territoire genital. De nouvelles recherches ont ete entreprises, visant a faire varier l'etendue de ce territoire. Les premiers resultats obtenus (Didier & Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973) ont montre que dans le cas d'une legere deficience gonadique, obtenue chez des embryons d'Oiseau presentant une agenesie experimentale unilateral du mesonephros, se produisait une diminution significative (de l'ordre de 38 a 42 % chez le Canard et de 28 % chez le Poulet) du nombre total de gonocytes colonisant les cretes genitales. Cette perte est essentiellement due a une deficience du peuplement de la gonade situee du cote opere; la colonisation de la gonade controlaterale reste inchangee; celle-ci ne semble done pouvoir fixer l'excedent des gonocytes presents dans la circulation. Parallelement a ces recherches, nous avons tente d'obtenir des deficiences gonadiques plus etendues, en excisant chirurgicalement l'un des territoires gonadiques presomptifs avant qu'il ne soit colonise par les CGP, c'est-a-dire avant le stade 15 de Hamburger et Hamilton (Meyer, 1964). Le resultat de ces experiences et les denombrements gonocytaires effectues chez les embryons operes font Pobjet du present travail. MATERIEL ET METHODES Les experiences ont ete effectuees chez des embryons de Poulet de race Hubbard. Les stades de developpement sont determines a l'aide de la table de Hamburger & Hamilton (1951). Apres ouverture prealable de l'ceuf (methode de Wolff, 1936), une bande d'ectoderme, de mesoderme lateral et d'endoderme est excisee chirurgicalement, soit du cote gauche, soit du cote droit, aux stades 9 a 14. Les oeufs sont ensuite Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 621 Tableau 1. Moyenne des denombrements des gonocytes chez les embryons temoins de Poulet de race Hubbard Stade de developpement 25 26 27 28 29 Gonade gauche 673 ± 66 809 ± 54 830 ±54 894 ±47 1124 ±105 Gonade droite 134±13 156±13 184±17 214±15 235 ±21 DxlOO* D+G 17,3 ±1,6 17,3 ±1,6 18±1 19,5±2,5 17,1 ±1,4 Nombre total de gonocytes 807 ± 72 965 ± 56 1014 ±66 1108 ±50 1359±115 Nombre de cas 17 42 49 22 23 * Pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite. remis en incubation jusqu'a 5 jours et les survivants sacrifies aux stades 25 a 29. A ces stades, ont ete egalement fixes des embryons temoins, ouverts au 2eme jour et non operes. Les denombrements des gonocytes sont effectues grace aux methodes deja decrites (Didier & Fargeix, 1973). L'analyse statistique des resultats repose sur les calculs classiques de la moyenne (m), de l'erreur standard (S.E.), de l'intervalle de confiance etabli pour un coefficient de securite de 95 %, et sur l'application de la loi du 'f' de Student. RESULTATS 1. Embryons temoins Les denombrements effectues par Meyer (1964), van Limborgh (1968), Reynaud (1973) et nous-memes (Didier & Fargeix, 1973) ont montre que la quantite de cellules germinales contenues dans les cretes genitales d'un lot d'embryons de Poulet constitue un caractere fluctuant, qui varie en particulier avec le stade de developpement considere. II etait done indispensable d'etablir prealablement le taux moyen de la population gonocytaire chez des embryons temoins sacrifies aux memes stades que nos embryons operes. 153 echantillons fixes aux stades 25 a 29 ont ete etudies dans ce but; la moyenne et l'erreur-standard des resultats obtenus sont consignees dans le Tableau 1 et representees graphiquement dans la Figure 1. Les chiffres montrent une augmentation irreguliere du nombre total des gonocytes: apres un leger accroissement entre les stades 25 et 26, la population gonocytaire se stabilise jusqu'au stade 27, puis augmente a nouveau jusqu'au stade 29. L'analyse statistique revele toutefois que 1'augmentation enregistree entre deux stades successifs n'est pas significative. Cette augmentation est pratiquement parallele a 1'accroissement du nombre des cellules germinales colonisant la gonade gauche; la population de la gonade droite grandit beaucoup plus faiblement et son accroissement, bien que regulier, intervient peu dans celui de la population gonocytaire totale. 40 EMB 32 622 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD Intervalles de confiance Nombre total Gcnade gauche Gonade droite 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 25 26 27 28 29 Stade Fig. 1. Representation graphique des denombrements des gonocytes chez les embryons de Poulet temoins. Tableau 2. Resultats obtenus a la suite des experiences d? excision Nombre de cas obtenus Degre de reduction de la gonade Agenesie totale Agenesie sub-totale Agenesie partielle Gonade droite Gonade gauche 17 12 21 8 10 20 Les resultats numeriques font egalement ressortir rasymetrie de repartition signalee anterieurement (Fargeix & Didier, 1973; Didier & Fargeix, 1973) entre les cotes gauche et droit de l'embryon, puisque la gonade droite ne renferme que 17,1 a 19,5 % (soit en moyenne 18 %) seulement du nombre total des gonocytes (Fig. 2). Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 623 Temoins 81% 19% Agenesie partielle droite r»YvvvviL 90% 10% Agenesie sub-totale droite 98-3% |.7% $ Agenesie partielle gauche 74% 26% Agenesie sub-totale gauche 13-5','„ 86-5% I I Gonade gauche ...... Deficit gauche significatif „.._.. Deficit gauche non significatif Gonade droite Deficit droit significatif Deficit droit non significatif Fig. 2. Consequences de l'excision unilaterale du territoire gonadique sur le pourcentage de repartition des gonocytes entre les cotes droit et gauche. 2. Embryons operes L'effet de Fablation effectuee se manifeste sur la morphologie externe (agenesie du flanc, courbures vertebrates anormales; Fig. 3) et sur l'anatomie interne (deficiences locales du tube digestif et du mesonephros; Fig. 10 et 11). La vascularisation des organes presents est en general assez peu perturbee. Le Tableau 2 rassemble les resultats generaux observes au niveau du territoire genital: des inhibitions etendues du developpement de la gonade ont ete obtenues chez 88 embryons (50 operes a droite et 38 operes a gauche) que nous avons repartis en 3 classes, selon l'importance de l'effet de F operation. Chez 41 echantillons, une portion plus ou moins etendue de la gonade s'est developpee; dans ces cas, rassembles sous la rubrique 'agenesie partielle', la taille du fragment gonadique obtenu est d'importance variable. Chez 22 embryons, la gonade n'est representee que par un petit rudiment renfermant moins d'une centaine de gonocytes (agenesie sub-totale). Enfin dans 25 cas, la gonade est totalement absente du cote opere (agenesie totale). Les Tableaux 3 et 4 rassemblent le detail des denombrements effectues pour chaque stade du developpement. L'analyse statistique, dont les resultats sont 40-2 624 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD Tableau 3. Denombrements des cellules germinales dans les cas d'agenesie partielle de la gonade (G, gonade gauche; D, gonade droite; D x 100/D + G, pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite; T, nombre total de gonocytes; m, moyenne; S.E., erreur standard; en caracteres gras, moyennes variant de facon significative par rapport aux temoins.) Operes a gauche Operes a droite A DxlOO D +G Stade G D 25 26 348 487 459 463 469 8 640 517 781 29 82 3 m ±S.E. 27 m ±S.E. 28 646 77 957 1026 960 727 696 368 836 92 m ±S.E. 29 707 114 1393 1249 1245 1281 1169 424 m ±S.E. 1126 145 4 29 26 28 36 39 34 5 233 72 141 98 43 41 34 13 84 25 144 149 82 104 23 37 89 21 8 14 1 1 5 3,5 4 7 5 5,3 1 20 7 13 12 6 10 4 12,4 10,5 1,7 9 11 6 8 2 8,1 7,3 1,2 DxlOO T G D D +G 377 387 461 294 260 43 36 681 721 354 261 32 53 175 78 243 348 61 38 31 18 12,5 24,8 5,8 46 33 34 31 16 16 13 11,2 34 26 4 36 26 27 57 31 931 836 178 424 592 175 526 791 131 1537 1398 1327 1385 1192 577 575 146 371 417 100 283 722 116 209 653 493 939 240 369 447 91 437 697 711 187 448 1215 160 496 97 242 9 499 36 668 553 820 680 79 1190 1098 1101 825 739 409 870 105 95 129 94 145 30 189 148 32 248 240 266 249 206 35,4 6 T 1070 111 304 782 587 1084 270 558 595 109 685 937 977 436 654 738 98 representes graphiquement dans les figures 4 a 9, permet de comparer les chiffres obtenus a ceux etablis chez les temoins et groupes dans le Tableau 1; les moyennes qui different significativement de celles des temoins figurent en caracteres gras dans les Tableaux 3 et 4. Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 625 Fig. 3. Morphologie externe d'un embryon opere presentant une agenesie du flanc et de la patte posterieure gauches. (A) EJfets de ^operation sur le nombre total des gonocytes A la lecture des tableaux 1, 3 et 4, il apparait que les moyennes du nombre total de gonocytes (colonne T des tableaux) etablies chez les embryons operes sont dans tous les cas inferieures a celles calculees chez les temoins. L'analyse statistique permet toutefois de preciser que la diminution enregistree n'est pas toujours significative: c'est le cas pour la plupart des embryons presentant une agenesie partielle de la gonade droite (Tableau 3, Fig. 2 et 4), pour une serie d'echantillons fixes au stade 27 et montrant une agenesie partielle de la gonade gauche (Tableau 3, Fig. 4) et pour certaines agenesies totales droites (Tableau 4, stade 27 et Fig. 5). Ces resultats appellent deux remarques: (1) La quantite de gonocytes colonisant le fragment gonadique laisse en place a la suite de l'excision est proportionnelle a l'importance de ce dernier, puisque la diminution du peuplement est nettement plus forte dans les cas d'agenesie sub-totale. (2) L'operation a un effet plus grand lorsqu'elle est pratiquee du cote gauche. Nous avions deja signale un fait analogue a la suite d'experiences prealables (Fargeix & Didier, 1973). On peut l'expliquer par la forte asymetrie de repartition des gonocytes entre les deux ebauches gonadiques qui est de 626 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD Intervalles : I de confiance 6 i 1600 - Temoins - Agenesie droite " Agenesie gauche 1400 1200 S 1000 800 600 400 200 25 26 27 28 29 Stade Fig. 4. Variations du nombre total de gonocytes dans les cas d'agenesie gonadique partielle. regie chez les embryons de Poulet Hubbard; la gonade droite ne renferme en effet chez les temoins que 18 % du nombre total des gonocytes. Dans ces conditions, chez les operes a droite, la diminution du nombre de gonocytes colonisant la gonade reduite ne joue que sur un petit nombre de cellules, ce qui explique que la reduction du nombre total de cellules germinales ne soit pas significative, en particulier dans le cas d'une agenesie partielle droite. Ce resultat souligne a nouveau (Didier & Fargeix, 1973) l'inegalite primaire des territoires gonadiques presomptifs droit et gauche. (B) Repartition des gonocytes entre les deux gonades chez les embryons operes a droite (1) Peuplement de la gonade operee {droite). L'examen des chiffres contenus dans la moitie gauche des Tableaux 3 et 4 (colonne D) montre une reduction tres nette du peuplement de la gonade situee du cote opere; par exemple, au stade 28, on ne denombre que 84 ±25 gonocytes dans les cas d'agenesie partielle, 15+10 gonocytes dans les cas d'agenesie sub-totale, a dupprimer au Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 627 Intervalles de confiance 1600 •- Temoins •— Agenesic droite •~ Agcnesie gauche 1400 1200 1000 Si 800 _o E o Z 600 400 200 25 26 27 28 29 Stade Fig. 5. Variations du nombre total de gonocytes dans les cas d'agenesie gonadique subtotale. lieu de 214 ±15 chez les temoins. La diminution enregistree est toujours significative (Fig. 8 et 9). Dans 18 cas, la gonade droite est totalement absente et Ton ne trouve aucune cellule germinale du cote opere. (2) Peupkment de la gonade temoin {gauche). Le detail des denombrements effectues au niveau de la gonade temoin figure dans la colonne G de la partie gauche des Tableaux 3 et 4. Les moyennes calculees montrent qu'en general, la population de la gonade gauche est peu ou pas modifi.ee, apres l'excision du territoire gonadique droit (Fig. 6 et 7). Ces moyennes sont peu differentes de celles etablies chez les temoins: on a par exemple a gauche au stade 28, 839 ± 72 gonocytes pour les cas d'agenesie sub-totale droite, et 894 ± 47 gonocytes chez les temoins. Cependant, au stade 26, on remarque une diminution significative du peuplement de la gonade gauche, tant pour les agenesies partielles (Tableau 3 et Fig. 6) que pour les agenesies to tales et sub-to tales droites (Tableau 4 et Fig. 7). La signification de cette deficience est peu claire, d'autant qu'on ne la retrouve 628 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD Tableau 4. Denombrements des cellules germinates dans les cas d'agenesie totale ou sub-totale de la gonade (G, gonade gauche; D, gonade droite; D x 100/D + G, pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite; T, nombre total de gonocytes; m: moyenne; S.E., erreur standard; en caracteres gras, moyennes variant de facon significative par rapport aux temoins.) Operes a droite Operes a gauche A A G D 156 0 1 0 0 8 1,7 1,2 1 0 368 114 236 136 341 461 747 415 463 459 481 145 908 786 55 6 0 0 101 14 0 22 13 118 8 0 0 35 0 0 11 0 0 12 0 15 10 0 0 0 11 2 0 2,5 1,4 12 3 0 0 3 0 0 1 0 0 1 0 1,7 1 0 G D 25 368 114 236 136 0 0 0 336 5 0 10 0 m 26 m ±S.E. 27 m ±S.E. 28 m ±S.E. 29 m ±S.E. 461 737 415 463 423 472 57 900 786 850 414 576 786 695 148 644 92 898 303 864 1181 1132 952 745 791 562 111 1108 751 839 72 1506 DxlOO T Stade ±S.E. DxlOO D +G 0 36 8,5 6 8 0 0 0 0 1 D+G T 74 32 230 41 82 67 123 42 0 179 158 79 100 228 158 905 0 295 100 295 414 576 887 709 148 667 98 115 0 49 12 134 74 262 109 54 100 84 90 249 74 311 121 32 17 0 19 16 0 0 34 173 31 161 26 49 248 382 488 87 5,8 100 58 75 100 100 85,8 205 35 161 45 65 248 382 522 11 5 0 191 0 64 64 225 75 370 2C8 363 314 53 86,5 7 100 52 100 84 16,4 236 77 370 399 363 377 16 1016 311 864 1181 1167 952 745 802 562 111 1120 751 854 74 1506 Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 629 Intervalles de confiance 1600 1400 Temoins Agenesie droite Agenesie gauche 1200 g 1000 o 800 600 400 200 25 26 27 28 29 Stade Fig. 6. Variations du peuplement de la gonade gauche dans les cas d'agenesie gonadique partielle. pas aux stades ulterieurs; il est possible qu'elle soit liee au fait que le passage du stade 26 au stade 27 constitue une periode critique marquee dans les conditions normales par un net ralentissement de la colonisation des gonades. Elle pourrait egalement etre due a un retard general de la colonisation en liaison avec la diminution de 1'efTet attractif global exerce sur les CGP par les cretes genitales. Dans aucun des cas d'agenesie droite, la gonade temoin ne renferme un nombre accru de cellules germinales. Ainsi que nous l'avions deja signale (Didier & Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973), elle ne semble pas pouvoir fixer l'excedent du a la deficience du cote operee des gonocytes presents dans la circulation. (3) Repercussion sur le pourcentage de repartition des gonocytes entre les cotes droit et gauche. Les moyennes calculees chez les temoins (Tableau 1) montrent que le pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite constitue un caractere constant, quel que soit le stade de developpement considere; il est de l'ordre de 18 % chez l'embryon de Poulet Hubbard. L'examen des chiffres rassembles dans la colonne DxlOO/D + G des Tableaux 3 et 4 (partie gauche) montre que ce pourcentage est tres reduit chez les embryons operes a droite; il varie selon les cas entre 1,7 et 10,5% et la diminution 630 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD 1600 ?? l Intervalles ! de confiance Temoins Agenesie droite Agenesie gauche 1400 1200 1000 800 600 400 200 25 26 27 28 29 Stade Fig. 7. Variations du peuplement de la gonade gauche dans les cas d'agenesie gonadique subtotale. enregistree est nettement significative. Le fait que la reduction de la population gonocytaire totale soit essentiellement due a la deficience de la gonade droite, et qu'il n'y ait pas de colonisation compensatrice de la gonade gauche explique aisement cette chute significative du pourcentage droit. La encore, l'operation a droite renforce Fasymetrie de repartition des gonocytes en inhibant la colonisation de la gonade normalement moins peuplee (Fig. 2). (C) Repartition des gonocytes entre les deux gonades chez les embryons operes a gauche Les chiffres sont rassembles dans la partie droite des Tableaux 3 et 4. (1) Peuplement de la gonade operee {gauche). L'excision de tout ou partie du territoire genital gauche est marquee par le developpement d'une gonade gauche fortement deficiente et colonisee par un nombre de gonocytes tres reduit par rapport a la normale (Fig. 6 et 7). Dans un seul groupe (agenesie partielle au stade 27), la variation observee n'est pas significative. Dans tous les autres groupes, la perte de gonocytes dans la gonade operee est notable dans les cas d'agenesie partielle, et tres importante dans les cas d'agenesie totale ou sub-totale: 8 embryons ne presentent aucun gonocyte du cote gauche, ce qui equivaut a la perte d'un millier de ces cellules au stade 29. Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 631 Intervalles de confiance i— Temoins — Agenesie droite ' Agenesie gauche 400 200 25 26 28 27 29 Stade Fig. 8. Variations du peuplement de la gonade droite dans les cas d'agenesie gonadique partielle. 600 _ •? 7 ? bio o 400 Intervalles de confiance Temoins Agenesie gauche Agenesie droite 200 Si o Z 25 26 27 28 29 Stadc Fig. 9. Variations du peuplement de la gonade droite dans les cas d'agenesie gonadique subtotale. (2) Peuplement de la gonade temoin (droite). Les chiffres contenus dans les colonnes D montrent qu'aucune des moyennes calculees pour la gonade droite ne difTere significativement de celles etablies chez les temoins (Tableau 1 et Fig. 8 et 9). 11 est clair que la colonisation de la gonade droite n'est absolument pas modifiee par la deficience de la gonade gauche excisee et que l'important excedent de CGP consecutif a l'operation ne peut se fixer en surnombre dans la gonade temoin. (3) Repercussion sur le pourcentage de repartition droite-gauche. Les faits exposes ci-dessus expliquent aisement l'augmentation importante du pourcentage de gonocytes repartis dans la gonade droite, bien que celle-ci ne renferme qu'un nombre de gonocytes egal, en valeur absolue, a celui des temoins. Dans 2 groupes (agenesie partielle aux stades 27 et 28), l'augmentation du pourcentage droit, qui atteint la valeur de 25 %, n'est pas significative. Dans tous les autres cas, et en particulier pour les agenesies sub-totales, D x 100/D + G 632 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD 10 - Fig. 10. Coupe transversale d'un embryon presentant une agenesie de la gonade gauche (GD = gonade droite temoin). Fig. 11. Coupe transversale d'un embryon presentant une agenesie de la gonade droite (GG = gonade gauche temoin). atteint des valeurs tres elevees comme par exemple 86,5 % au stade 28 (Tableau 4 et Fig. 2). A l'inverse de ce qui se passe chez les embryons operes a droite, l'excision gonadique gauche attenue et meme inverse l'asymetrie de repartition gauche-droite des cellules germinales. Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 633 CONCLUSIONS Les resultats obtenus chez l'embryon de Poulet a la suite de nos experiences d'excision de l'un des territories gonadiques confirment en tous points ceux exposes anterieurement (Didier & Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973). L'operation, qui a pour eflfet le developpement deficient ou nul de l'une des gonades, se traduit par une deficience plus ou moins accentuee de la colonisation des cretes genitales; les principaux faits constates sont les suivants: (1) Diminution tres importante du nombre des gonocytes dans la gonade deficiente. (2) Colonisation normale de la gonade temoin qui ne peut fixer l'exces de gonocytes laisses disponibles par la deficience de la gonade operee. (3) Diminution du nombre total de gonocytes chez les embryons operes. Cette diminution globale du nombre de gonocytes est generalement significative dans les cas d'agenesie gauche, alors qu'elle ne Test pas dans les cas d'agenesie droite. Ce resultat s'explique aisement par la forte asymetrie de repartition des gonocytes entre les deux gonades qui est de regie chez les embryons de Poulet de race Hubbard; de ce fait, chez les embryons operes a droite, la reduction de la population gonocytaire ne porte que sur un faible nombre de CGP et ne peut avoir que peu d'incidence sur le peuplement total. Cette observation renforce l'idee d'une inegalite precoce des territoires gonadiques droit et gauche exprimee par van Limborgh (1962) et par nous-memes (Didier & Fargeix, 1973). Elle explique en outre qu'avec la methode utilisee l'agenesie totale droite soit plus frequemment obtenue que l'agenesie totale gauche. Les experiences rapportees montrent done que, chez les Oiseaux, la regulation de la population germinale s'effectue essentiellement au niveau de la gonade. L'efFet attractif exerce sur les CGP (Dubois, 1968), serait proportionnel au degre d'extension du territoire gonadique, et determinerait l'importance quantitative de la colonisation. Chez les Amphibiens, des faits voisins ont pu etre mis en evidence par Gipouloux (1972, 1973) bien que la regulation s'accomplisse par l'intermediaire d'un processus fort different; en effet, elle ne survient pas des la colonisation des cretes genitales: chez le Pleurodele, la population gonocytaire est deficitaire pour chacune des 4 cretes genitales d'un couple obtenu par l'induction d'un axe embryonnaire supplementary apres greffe d'une levre blastoporale sur une jeune gastrula (Capuron, 1968). A l'inverse, elle est d'abord excedentaire dans le cas d'un apport experimentalement accru de CGP (Gipouloux, 1972). La regulation germinale survient beaucoup plus tardivement, au moment de la differenciation sexuelle (Gipouloux, 1972). C'est a ce moment qu'elle devient dependante de la gonade et en particulier du nombre des cellules medullaires qui entrent dans la constitution de la glande genitale (Gipouloux, 1973). 634 E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD II apparait done que les phenomenes qui president a la regulation du peuplement des gonades en elements germinaux soient beaucoup plus etales dans le temps chez les Amphibiens que chez les Oiseaux, mais qu'ils doivent etre dans les deux cas recherches au niveau du composant somatique de la gonade. RESUME La colonisation des cretes genitales par les cellules germinales a ete etudiee du point de vue quantitatif chez des embryons temoins de Poulet sacrifies aux stades 25 a 29, et chez des embryons ayant prealablement subi au 2eme jour, l'excision chirurgicale du territoire presomptif de l'une des gonades. Chez les embryons operes qui presentent une agenesie plus ou moins parfaite de l'une des gonades, la somme des gonocytes denombres dans les cretes genitales est inferieure au nombre de cellules germinales determine au meme stade chez les temoins. La deficience observee est plus importante dans les cas d'agenesie gonadique gauche. La diminution du nombre total de gonocytes est essentiellement due a la reduction du peuplement de la gonade deficiente. II n'y a pas de report de gonocytes excedentaires dans la gonade temoin. En consequence, l'operation a droite renforce l'asymetrie de distribution des gonocytes entre les gonades, alors que l'operation a gauche l'attenue. C'est done au niveau des gonades elles-memes que s'exerce chez les Oiseaux, le controle de la regulation du nombre des cellules germinales et de l'importance quantitative de la colonisation. TRAVAUX CITES J. (1930). Contribution a l'etude de la lignee germinale chez le Poulet. 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