Analyse experimentale de la regulation du nombre

/ . Embryol. exp. Morph. Vol. 32, 3, pp. 619-635, 1974
Printed in Great Britain
Analyse experimentale de la
regulation du nombre des cellules germinales apres
deficience gonadique chez le poulet
ParELIANE DIDIER, NOEL FARGEIX
ET YVES BERGEAUD1
Laboratoire de Biologie Animale, Universite de
Clermont E.R.A. no. 408
SUMMARY
Experimental study of the regulation of the number of germ cells
following gonadial deficiency in the chick
Colonization of the genital ridges by germ cells was quantitatively studied in control
chick embryos killed at stages 25-29, and in embryos in which a surgical excision of the
gonad presumptive area was made previously on the second day.
In operated embryos which show a more or less perfect agenesis of one gonad, the
number of germ cells counted in genital ridges is lower than the number of germ cells
estimated in the same stages of control embryos. The deficit is greater for left gonadic
agenesis. The decrease in the total number of germ cells is essentially due to a reduction
in the cells colonizing the deficient gonad. There is no excess of germ cells observed in the
control gonad.
Accordingly, a right side operation strengthens the asymmetry of germ cells distribution,
whereas a left side one reduces it.
Thus, in birds the regulation of the number of germ cells and the quantitative control
of colonisation of the gonads is at the gonad level.
INTRODUCTION
Chez les Oiseaux, la segregation du materiel germinal dans l'aire extraembryonnaire aux jeunes stades du developpement permet d'aborder l'etude
des regulations a l'aide de differentes methodes, en offrant la possibilite
d'intervenir, soit au niveau des cellules germinales primordiales (CGP), soit
au niveau du composant somatique de la gonade.
Le premier procede a ete frequemment utilise, en particulier dans des
experiences d'excision ou d'irradiation du croissant germinal qui aboutissent,
dans la plupart des cas, a l'edification de gonades steriles (Benoit, 1930;
Dantchakoff, 1933; Goldsmith, 1935; Willier, 1937; Salzgeber, 1950; Marin,
1959; Simon, 1960; Dubois, 1962; Mims & McKinell, 1971; Bruel, 1973).
1
Adresse des auteurs: Laboratoire de Biologie Animale. B.P. 45-63 170, Aubiere, France.
620
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
L'experience inverse, qui consiste a accroitre le stock initial de cellules germinales a ete pratiquee par Simon (1960) qui associe en culture 'in vitro' un
blastoderme d'Oiseau de 24 a 48 heures d'incubation et deux croissants de
Swift: malgre l'excedent de CGP, la colonisation de la region gonadique ne
semble pas modifiee au 3eme jour d'incubation.
Agissant par ailleurs au niveau du composant somatique de la gonade,
Simon (1960) etudie le comportement des CGP chez des embryons tronques,
c'est-a-dire prives d'une partie de leur territoire gonadique: le taux de colonisation de la partie restante est toujours plus bas que celui d'une gonade entiere. II
semble done que le rudiment gonadique laisse en place ne puisse fixer qu'une
certaine quantite de gonocytes, meme si un excedent de CGP est present dans
la circulation.
Les resultats obtenus par Fargeix (1968, 1970) a la suite d'experiences de
fissuration de blastodermes de Canard vont dans le meme sens et conduisent
a penser que la regulation du materiel germinal et la determination de
l'importance du peuplement gonocytaire s'effectuent essentiellement au niveau
du territoire genital. De nouvelles recherches ont ete entreprises, visant a faire
varier l'etendue de ce territoire. Les premiers resultats obtenus (Didier &
Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973) ont montre que dans le cas d'une
legere deficience gonadique, obtenue chez des embryons d'Oiseau presentant
une agenesie experimentale unilateral du mesonephros, se produisait une
diminution significative (de l'ordre de 38 a 42 % chez le Canard et de 28 %
chez le Poulet) du nombre total de gonocytes colonisant les cretes genitales.
Cette perte est essentiellement due a une deficience du peuplement de la gonade
situee du cote opere; la colonisation de la gonade controlaterale reste inchangee;
celle-ci ne semble done pouvoir fixer l'excedent des gonocytes presents dans
la circulation.
Parallelement a ces recherches, nous avons tente d'obtenir des deficiences
gonadiques plus etendues, en excisant chirurgicalement l'un des territoires
gonadiques presomptifs avant qu'il ne soit colonise par les CGP, c'est-a-dire
avant le stade 15 de Hamburger et Hamilton (Meyer, 1964). Le resultat de ces
experiences et les denombrements gonocytaires effectues chez les embryons
operes font Pobjet du present travail.
MATERIEL ET METHODES
Les experiences ont ete effectuees chez des embryons de Poulet de race
Hubbard. Les stades de developpement sont determines a l'aide de la table
de Hamburger & Hamilton (1951).
Apres ouverture prealable de l'ceuf (methode de Wolff, 1936), une bande
d'ectoderme, de mesoderme lateral et d'endoderme est excisee chirurgicalement,
soit du cote gauche, soit du cote droit, aux stades 9 a 14. Les oeufs sont ensuite
Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 621
Tableau 1. Moyenne des denombrements des gonocytes chez les
embryons temoins de Poulet de race Hubbard
Stade de
developpement
25
26
27
28
29
Gonade
gauche
673 ± 66
809 ± 54
830 ±54
894 ±47
1124 ±105
Gonade
droite
134±13
156±13
184±17
214±15
235 ±21
DxlOO*
D+G
17,3 ±1,6
17,3 ±1,6
18±1
19,5±2,5
17,1 ±1,4
Nombre total
de gonocytes
807 ± 72
965 ± 56
1014 ±66
1108 ±50
1359±115
Nombre
de cas
17
42
49
22
23
* Pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite.
remis en incubation jusqu'a 5 jours et les survivants sacrifies aux stades 25 a
29. A ces stades, ont ete egalement fixes des embryons temoins, ouverts au
2eme jour et non operes.
Les denombrements des gonocytes sont effectues grace aux methodes deja
decrites (Didier & Fargeix, 1973). L'analyse statistique des resultats repose sur
les calculs classiques de la moyenne (m), de l'erreur standard (S.E.), de l'intervalle de confiance etabli pour un coefficient de securite de 95 %, et sur l'application de la loi du 'f' de Student.
RESULTATS
1. Embryons temoins
Les denombrements effectues par Meyer (1964), van Limborgh (1968),
Reynaud (1973) et nous-memes (Didier & Fargeix, 1973) ont montre que la
quantite de cellules germinales contenues dans les cretes genitales d'un lot
d'embryons de Poulet constitue un caractere fluctuant, qui varie en particulier
avec le stade de developpement considere. II etait done indispensable d'etablir
prealablement le taux moyen de la population gonocytaire chez des embryons
temoins sacrifies aux memes stades que nos embryons operes.
153 echantillons fixes aux stades 25 a 29 ont ete etudies dans ce but; la
moyenne et l'erreur-standard des resultats obtenus sont consignees dans le
Tableau 1 et representees graphiquement dans la Figure 1. Les chiffres montrent
une augmentation irreguliere du nombre total des gonocytes: apres un leger
accroissement entre les stades 25 et 26, la population gonocytaire se stabilise
jusqu'au stade 27, puis augmente a nouveau jusqu'au stade 29. L'analyse
statistique revele toutefois que 1'augmentation enregistree entre deux stades
successifs n'est pas significative. Cette augmentation est pratiquement parallele
a 1'accroissement du nombre des cellules germinales colonisant la gonade
gauche; la population de la gonade droite grandit beaucoup plus faiblement
et son accroissement, bien que regulier, intervient peu dans celui de la population
gonocytaire totale.
40
EMB
32
622
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
Intervalles
de confiance
Nombre total
Gcnade gauche
Gonade droite
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
25
26
27
28
29
Stade
Fig. 1. Representation graphique des denombrements des gonocytes
chez les embryons de Poulet temoins.
Tableau 2. Resultats obtenus a la suite des experiences d? excision
Nombre de cas obtenus
Degre de reduction de
la gonade
Agenesie totale
Agenesie sub-totale
Agenesie partielle
Gonade droite Gonade gauche
17
12
21
8
10
20
Les resultats numeriques font egalement ressortir rasymetrie de repartition
signalee anterieurement (Fargeix & Didier, 1973; Didier & Fargeix, 1973)
entre les cotes gauche et droit de l'embryon, puisque la gonade droite ne
renferme que 17,1 a 19,5 % (soit en moyenne 18 %) seulement du nombre
total des gonocytes (Fig. 2).
Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 623
Temoins
81%
19%
Agenesie partielle droite
r»YvvvviL
90%
10%
Agenesie sub-totale droite
98-3%
|.7%
$
Agenesie partielle gauche
74% 26%
Agenesie sub-totale gauche
13-5','„ 86-5%
I
I Gonade gauche
...... Deficit gauche
significatif
„.._.. Deficit gauche
non significatif
Gonade droite
Deficit droit
significatif
Deficit droit
non significatif
Fig. 2. Consequences de l'excision unilaterale du territoire gonadique sur le
pourcentage de repartition des gonocytes entre les cotes droit et gauche.
2. Embryons operes
L'effet de Fablation effectuee se manifeste sur la morphologie externe
(agenesie du flanc, courbures vertebrates anormales; Fig. 3) et sur l'anatomie
interne (deficiences locales du tube digestif et du mesonephros; Fig. 10 et 11).
La vascularisation des organes presents est en general assez peu perturbee.
Le Tableau 2 rassemble les resultats generaux observes au niveau du territoire
genital: des inhibitions etendues du developpement de la gonade ont ete
obtenues chez 88 embryons (50 operes a droite et 38 operes a gauche) que
nous avons repartis en 3 classes, selon l'importance de l'effet de F operation.
Chez 41 echantillons, une portion plus ou moins etendue de la gonade s'est
developpee; dans ces cas, rassembles sous la rubrique 'agenesie partielle', la
taille du fragment gonadique obtenu est d'importance variable. Chez 22
embryons, la gonade n'est representee que par un petit rudiment renfermant
moins d'une centaine de gonocytes (agenesie sub-totale). Enfin dans 25 cas, la
gonade est totalement absente du cote opere (agenesie totale).
Les Tableaux 3 et 4 rassemblent le detail des denombrements effectues pour
chaque stade du developpement. L'analyse statistique, dont les resultats sont
40-2
624
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
Tableau 3. Denombrements des cellules germinales dans
les cas d'agenesie partielle de la gonade
(G, gonade gauche; D, gonade droite; D x 100/D + G, pourcentage de gonocytes
contenus dans la gonade droite; T, nombre total de gonocytes; m, moyenne;
S.E., erreur standard; en caracteres gras, moyennes variant de facon significative
par rapport aux temoins.)
Operes a gauche
Operes a droite
A
DxlOO
D +G
Stade
G
D
25
26
348
487
459
463
469
8
640
517
781
29
82
3
m
±S.E.
27
m
±S.E.
28
646
77
957
1026
960
727
696
368
836
92
m
±S.E.
29
707
114
1393
1249
1245
1281
1169
424
m
±S.E.
1126
145
4
29
26
28
36
39
34
5
233
72
141
98
43
41
34
13
84
25
144
149
82
104
23
37
89
21
8
14
1
1
5
3,5
4
7
5
5,3
1
20
7
13
12
6
10
4
12,4
10,5
1,7
9
11
6
8
2
8,1
7,3
1,2
DxlOO
T
G
D
D +G
377
387
461
294
260
43
36
681
721
354
261
32
53
175
78
243
348
61
38
31
18
12,5
24,8
5,8
46
33
34
31
16
16
13
11,2
34
26
4
36
26
27
57
31
931
836
178
424
592
175
526
791
131
1537
1398
1327
1385
1192
577
575
146
371
417
100
283
722
116
209
653
493
939
240
369
447
91
437
697
711
187
448
1215
160
496
97
242
9
499
36
668
553
820
680
79
1190
1098
1101
825
739
409
870
105
95
129
94
145
30
189
148
32
248
240
266
249
206
35,4
6
T
1070
111
304
782
587
1084
270
558
595
109
685
937
977
436
654
738
98
representes graphiquement dans les figures 4 a 9, permet de comparer les
chiffres obtenus a ceux etablis chez les temoins et groupes dans le Tableau 1;
les moyennes qui different significativement de celles des temoins figurent en
caracteres gras dans les Tableaux 3 et 4.
Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 625
Fig. 3. Morphologie externe d'un embryon opere presentant une agenesie du
flanc et de la patte posterieure gauches.
(A) EJfets de ^operation sur le nombre total des gonocytes
A la lecture des tableaux 1, 3 et 4, il apparait que les moyennes du nombre
total de gonocytes (colonne T des tableaux) etablies chez les embryons operes
sont dans tous les cas inferieures a celles calculees chez les temoins. L'analyse
statistique permet toutefois de preciser que la diminution enregistree n'est pas
toujours significative: c'est le cas pour la plupart des embryons presentant une
agenesie partielle de la gonade droite (Tableau 3, Fig. 2 et 4), pour une serie
d'echantillons fixes au stade 27 et montrant une agenesie partielle de la gonade
gauche (Tableau 3, Fig. 4) et pour certaines agenesies totales droites (Tableau
4, stade 27 et Fig. 5). Ces resultats appellent deux remarques:
(1) La quantite de gonocytes colonisant le fragment gonadique laisse en
place a la suite de l'excision est proportionnelle a l'importance de ce dernier,
puisque la diminution du peuplement est nettement plus forte dans les cas
d'agenesie sub-totale.
(2) L'operation a un effet plus grand lorsqu'elle est pratiquee du cote
gauche. Nous avions deja signale un fait analogue a la suite d'experiences
prealables (Fargeix & Didier, 1973). On peut l'expliquer par la forte asymetrie
de repartition des gonocytes entre les deux ebauches gonadiques qui est de
626
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
Intervalles
: I
de confiance
6 i
1600
-
Temoins
-
Agenesie droite
"
Agenesie gauche
1400
1200
S 1000
800
600
400
200
25
26
27
28
29
Stade
Fig. 4. Variations du nombre total de gonocytes dans les cas
d'agenesie gonadique partielle.
regie chez les embryons de Poulet Hubbard; la gonade droite ne renferme en
effet chez les temoins que 18 % du nombre total des gonocytes. Dans ces
conditions, chez les operes a droite, la diminution du nombre de gonocytes
colonisant la gonade reduite ne joue que sur un petit nombre de cellules, ce
qui explique que la reduction du nombre total de cellules germinales ne soit
pas significative, en particulier dans le cas d'une agenesie partielle droite. Ce
resultat souligne a nouveau (Didier & Fargeix, 1973) l'inegalite primaire des
territoires gonadiques presomptifs droit et gauche.
(B) Repartition des gonocytes entre les deux gonades chez les embryons operes a
droite
(1) Peuplement de la gonade operee {droite). L'examen des chiffres contenus
dans la moitie gauche des Tableaux 3 et 4 (colonne D) montre une reduction
tres nette du peuplement de la gonade situee du cote opere; par exemple, au
stade 28, on ne denombre que 84 ±25 gonocytes dans les cas d'agenesie
partielle, 15+10 gonocytes dans les cas d'agenesie sub-totale, a dupprimer au
Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 627
Intervalles
de confiance
1600
•- Temoins
•— Agenesic droite
•~ Agcnesie gauche
1400
1200
1000
Si
800
_o
E
o
Z
600
400
200
25
26
27
28
29
Stade
Fig. 5. Variations du nombre total de gonocytes dans les cas
d'agenesie gonadique subtotale.
lieu de 214 ±15 chez les temoins. La diminution enregistree est toujours
significative (Fig. 8 et 9). Dans 18 cas, la gonade droite est totalement absente et
Ton ne trouve aucune cellule germinale du cote opere.
(2) Peupkment de la gonade temoin {gauche). Le detail des denombrements
effectues au niveau de la gonade temoin figure dans la colonne G de la partie
gauche des Tableaux 3 et 4. Les moyennes calculees montrent qu'en general, la
population de la gonade gauche est peu ou pas modifi.ee, apres l'excision du
territoire gonadique droit (Fig. 6 et 7). Ces moyennes sont peu differentes de
celles etablies chez les temoins: on a par exemple a gauche au stade 28,
839 ± 72 gonocytes pour les cas d'agenesie sub-totale droite, et 894 ± 47 gonocytes
chez les temoins.
Cependant, au stade 26, on remarque une diminution significative du peuplement de la gonade gauche, tant pour les agenesies partielles (Tableau 3 et
Fig. 6) que pour les agenesies to tales et sub-to tales droites (Tableau 4 et Fig. 7).
La signification de cette deficience est peu claire, d'autant qu'on ne la retrouve
628
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
Tableau 4. Denombrements des cellules germinates dans les
cas d'agenesie totale ou sub-totale de la gonade
(G, gonade gauche; D, gonade droite; D x 100/D + G, pourcentage de gonocytes
contenus dans la gonade droite; T, nombre total de gonocytes; m: moyenne;
S.E., erreur standard; en caracteres gras, moyennes variant de facon significative
par rapport aux temoins.)
Operes
a droite
Operes a gauche
A
A
G
D
156
0
1
0
0
8
1,7
1,2
1
0
368
114
236
136
341
461
747
415
463
459
481
145
908
786
55
6
0
0
101
14
0
22
13
118
8
0
0
35
0
0
11
0
0
12
0
15
10
0
0
0
11
2
0
2,5
1,4
12
3
0
0
3
0
0
1
0
0
1
0
1,7
1
0
G
D
25
368
114
236
136
0
0
0
336
5
0
10
0
m
26
m
±S.E.
27
m
±S.E.
28
m
±S.E.
29
m
±S.E.
461
737
415
463
423
472
57
900
786
850
414
576
786
695
148
644
92
898
303
864
1181
1132
952
745
791
562
111
1108
751
839
72
1506
DxlOO
T
Stade
±S.E.
DxlOO
D +G
0
36
8,5
6
8
0
0
0
0
1
D+G
T
74
32
230
41
82
67
123
42
0
179
158
79
100
228
158
905
0
295
100
295
414
576
887
709
148
667
98
115
0
49
12
134
74
262
109
54
100
84
90
249
74
311
121
32
17
0
19
16
0
0
34
173
31
161
26
49
248
382
488
87
5,8
100
58
75
100
100
85,8
205
35
161
45
65
248
382
522
11
5
0
191
0
64
64
225
75
370
2C8
363
314
53
86,5
7
100
52
100
84
16,4
236
77
370
399
363
377
16
1016
311
864
1181
1167
952
745
802
562
111
1120
751
854
74
1506
Cellules germinates apres deficience gonadique chez le poulet 629
Intervalles
de confiance
1600
1400
Temoins
Agenesie droite
Agenesie gauche
1200
g 1000
o
800
600
400
200
25
26
27
28
29
Stade
Fig. 6. Variations du peuplement de la gonade gauche dans les cas
d'agenesie gonadique partielle.
pas aux stades ulterieurs; il est possible qu'elle soit liee au fait que le passage
du stade 26 au stade 27 constitue une periode critique marquee dans les
conditions normales par un net ralentissement de la colonisation des gonades.
Elle pourrait egalement etre due a un retard general de la colonisation en
liaison avec la diminution de 1'efTet attractif global exerce sur les CGP par les
cretes genitales. Dans aucun des cas d'agenesie droite, la gonade temoin ne
renferme un nombre accru de cellules germinales. Ainsi que nous l'avions
deja signale (Didier & Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973), elle ne semble
pas pouvoir fixer l'excedent du a la deficience du cote operee des gonocytes
presents dans la circulation.
(3) Repercussion sur le pourcentage de repartition des gonocytes entre les
cotes droit et gauche. Les moyennes calculees chez les temoins (Tableau 1)
montrent que le pourcentage de gonocytes contenus dans la gonade droite
constitue un caractere constant, quel que soit le stade de developpement
considere; il est de l'ordre de 18 % chez l'embryon de Poulet Hubbard. L'examen
des chiffres rassembles dans la colonne DxlOO/D + G des Tableaux 3 et 4
(partie gauche) montre que ce pourcentage est tres reduit chez les embryons
operes a droite; il varie selon les cas entre 1,7 et 10,5% et la diminution
630
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
1600
??
l Intervalles
! de confiance
Temoins
Agenesie droite
Agenesie gauche
1400
1200
1000
800
600
400
200
25
26
27
28
29
Stade
Fig. 7. Variations du peuplement de la gonade gauche dans les cas
d'agenesie gonadique subtotale.
enregistree est nettement significative. Le fait que la reduction de la population
gonocytaire totale soit essentiellement due a la deficience de la gonade droite,
et qu'il n'y ait pas de colonisation compensatrice de la gonade gauche explique
aisement cette chute significative du pourcentage droit. La encore, l'operation
a droite renforce Fasymetrie de repartition des gonocytes en inhibant la colonisation de la gonade normalement moins peuplee (Fig. 2).
(C) Repartition des gonocytes entre les deux gonades chez les embryons operes
a gauche
Les chiffres sont rassembles dans la partie droite des Tableaux 3 et 4.
(1) Peuplement de la gonade operee {gauche). L'excision de tout ou partie
du territoire genital gauche est marquee par le developpement d'une gonade
gauche fortement deficiente et colonisee par un nombre de gonocytes tres
reduit par rapport a la normale (Fig. 6 et 7). Dans un seul groupe (agenesie
partielle au stade 27), la variation observee n'est pas significative. Dans tous
les autres groupes, la perte de gonocytes dans la gonade operee est notable dans
les cas d'agenesie partielle, et tres importante dans les cas d'agenesie totale ou
sub-totale: 8 embryons ne presentent aucun gonocyte du cote gauche, ce qui
equivaut a la perte d'un millier de ces cellules au stade 29.
Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 631
Intervalles
de confiance
i— Temoins
— Agenesie droite
'
Agenesie gauche
400
200
25
26
28
27
29
Stade
Fig. 8. Variations du peuplement de la gonade droite dans les cas
d'agenesie gonadique partielle.
600 _ •? 7 ?
bio
o 400
Intervalles
de confiance
Temoins
Agenesie gauche
Agenesie droite
200
Si
o
Z
25
26
27
28
29
Stadc
Fig. 9. Variations du peuplement de la gonade droite dans les cas
d'agenesie gonadique subtotale.
(2) Peuplement de la gonade temoin (droite). Les chiffres contenus dans les
colonnes D montrent qu'aucune des moyennes calculees pour la gonade droite
ne difTere significativement de celles etablies chez les temoins (Tableau 1 et
Fig. 8 et 9). 11 est clair que la colonisation de la gonade droite n'est absolument
pas modifiee par la deficience de la gonade gauche excisee et que l'important
excedent de CGP consecutif a l'operation ne peut se fixer en surnombre dans
la gonade temoin.
(3) Repercussion sur le pourcentage de repartition droite-gauche. Les faits
exposes ci-dessus expliquent aisement l'augmentation importante du pourcentage de gonocytes repartis dans la gonade droite, bien que celle-ci ne
renferme qu'un nombre de gonocytes egal, en valeur absolue, a celui des
temoins.
Dans 2 groupes (agenesie partielle aux stades 27 et 28), l'augmentation du
pourcentage droit, qui atteint la valeur de 25 %, n'est pas significative. Dans tous
les autres cas, et en particulier pour les agenesies sub-totales, D x 100/D + G
632
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
10 -
Fig. 10. Coupe transversale d'un embryon presentant une agenesie de la gonade
gauche (GD = gonade droite temoin).
Fig. 11. Coupe transversale d'un embryon presentant une agenesie de la gonade
droite (GG = gonade gauche temoin).
atteint des valeurs tres elevees comme par exemple 86,5 % au stade 28
(Tableau 4 et Fig. 2). A l'inverse de ce qui se passe chez les embryons operes
a droite, l'excision gonadique gauche attenue et meme inverse l'asymetrie de
repartition gauche-droite des cellules germinales.
Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 633
CONCLUSIONS
Les resultats obtenus chez l'embryon de Poulet a la suite de nos experiences
d'excision de l'un des territories gonadiques confirment en tous points ceux
exposes anterieurement (Didier & Fargeix, 1973; Fargeix & Didier, 1973).
L'operation, qui a pour eflfet le developpement deficient ou nul de l'une des
gonades, se traduit par une deficience plus ou moins accentuee de la colonisation
des cretes genitales; les principaux faits constates sont les suivants:
(1) Diminution tres importante du nombre des gonocytes dans la gonade
deficiente.
(2) Colonisation normale de la gonade temoin qui ne peut fixer l'exces de
gonocytes laisses disponibles par la deficience de la gonade operee.
(3) Diminution du nombre total de gonocytes chez les embryons operes.
Cette diminution globale du nombre de gonocytes est generalement significative dans les cas d'agenesie gauche, alors qu'elle ne Test pas dans les cas
d'agenesie droite. Ce resultat s'explique aisement par la forte asymetrie de
repartition des gonocytes entre les deux gonades qui est de regie chez les
embryons de Poulet de race Hubbard; de ce fait, chez les embryons operes a
droite, la reduction de la population gonocytaire ne porte que sur un faible
nombre de CGP et ne peut avoir que peu d'incidence sur le peuplement total.
Cette observation renforce l'idee d'une inegalite precoce des territoires gonadiques droit et gauche exprimee par van Limborgh (1962) et par nous-memes
(Didier & Fargeix, 1973). Elle explique en outre qu'avec la methode utilisee
l'agenesie totale droite soit plus frequemment obtenue que l'agenesie totale
gauche.
Les experiences rapportees montrent done que, chez les Oiseaux, la regulation
de la population germinale s'effectue essentiellement au niveau de la gonade.
L'efFet attractif exerce sur les CGP (Dubois, 1968), serait proportionnel au
degre d'extension du territoire gonadique, et determinerait l'importance
quantitative de la colonisation.
Chez les Amphibiens, des faits voisins ont pu etre mis en evidence par
Gipouloux (1972, 1973) bien que la regulation s'accomplisse par l'intermediaire
d'un processus fort different; en effet, elle ne survient pas des la colonisation
des cretes genitales: chez le Pleurodele, la population gonocytaire est deficitaire
pour chacune des 4 cretes genitales d'un couple obtenu par l'induction d'un
axe embryonnaire supplementary apres greffe d'une levre blastoporale sur une
jeune gastrula (Capuron, 1968).
A l'inverse, elle est d'abord excedentaire dans le cas d'un apport experimentalement accru de CGP (Gipouloux, 1972). La regulation germinale
survient beaucoup plus tardivement, au moment de la differenciation sexuelle
(Gipouloux, 1972). C'est a ce moment qu'elle devient dependante de la gonade
et en particulier du nombre des cellules medullaires qui entrent dans la
constitution de la glande genitale (Gipouloux, 1973).
634
E. DIDIER, N. FARGEIX ET Y. BERGEAUD
II apparait done que les phenomenes qui president a la regulation du
peuplement des gonades en elements germinaux soient beaucoup plus etales
dans le temps chez les Amphibiens que chez les Oiseaux, mais qu'ils doivent
etre dans les deux cas recherches au niveau du composant somatique de la
gonade.
RESUME
La colonisation des cretes genitales par les cellules germinales a ete etudiee du point
de vue quantitatif chez des embryons temoins de Poulet sacrifies aux stades 25 a 29, et chez
des embryons ayant prealablement subi au 2eme jour, l'excision chirurgicale du territoire
presomptif de l'une des gonades.
Chez les embryons operes qui presentent une agenesie plus ou moins parfaite de l'une
des gonades, la somme des gonocytes denombres dans les cretes genitales est inferieure au
nombre de cellules germinales determine au meme stade chez les temoins. La deficience
observee est plus importante dans les cas d'agenesie gonadique gauche. La diminution du
nombre total de gonocytes est essentiellement due a la reduction du peuplement de la
gonade deficiente. II n'y a pas de report de gonocytes excedentaires dans la gonade temoin.
En consequence, l'operation a droite renforce l'asymetrie de distribution des gonocytes
entre les gonades, alors que l'operation a gauche l'attenue.
C'est done au niveau des gonades elles-memes que s'exerce chez les Oiseaux, le controle
de la regulation du nombre des cellules germinales et de l'importance quantitative de la
colonisation.
TRAVAUX CITES
J. (1930). Contribution a l'etude de la lignee germinale chez le Poulet. Destruction
precoce des gonocytes primaires par les rayons ultra-violets. C. r. Seanc. Soc. Biol. 104,
1329-1331.
BRUEL, M. T. (1973). Preuve experimentale de la localisation dispersee des gonocytes
primordiaux chez l'embryon de Poulet hybride Rhode-Wyandotte. C. r. Seanc. Soc. Biol.
167, 276-279.
CAPURON, A. (1968). Analyse experimentale de l'organogenese uro-genitale d'embryons
induits par la greffe de la levre dorsale du blastopore chez l'Amphibien Urodele Pleurodeles
waltlii Michah. Annls Embryol. Morph. 1, 3-27.
DANTCHAKOFF, V. (1933). Formation d'ebauches gonadiques steriles determinees par des
cellules germinales alterees ou mortes. C. r. Seanc. Soc. Biol. 113, 874.
DIDIER, E. & FARGEIX, N. (1973). Etude comparee de la colonisation des gonades par les
cellules germinales au cours du developpement normal et apres reduction experimentale
du territoire gonadique. Archs Anat. Histol. Embryol 56, 33-50.
DUBOIS, R. (1962). Sur la sterilisation de l'embryon de Poulet par irradiation aux rayons X
du croissant germinal extraembryonnaire. Archs Anat. microsc. Morph. exp. 51, 85-94.
DUBOIS, R. (1968). UOrigine et la Migration des Cellules Germinales de VEmbryon de Poulet,
d'apres les Resultats d'Experiences 'in vitro'. These. Doct. Sci. Nat. Paris. A.O. CNRS
no. 2774.
FARGEIX, N. (1968). Etude Comparee de la Lignee Germinale d'Embryons Normaux de Canard
et d'Embryons de Regulation. These. Doct. Sci. Nat. Univ. Clermont-Fd. A.O. CNRS.
2920.
FARGEIX, N. (1970). La colonisation des gonades par les cellules germinales chez des
embryons de regulation. Etude chez le Canard. Annls Embryol. Morph. 3, 107-131.
FARGEIX, N. & DIDIER, E. (1973). Colonisation des ebauches gonadiques de l'embryon de
Poulet par les cellules germinales apres agenesie unilaterale du mesonephros. C. r. hebd.
Seanc. Acad. Sci., Paris 276, 2067-2070.
GIPOULOUX, J. D. (1972). Regulation du nombre des cellules germinales apres un exces
initial de celles-ci dans la gonade larvaire des Amphibiens Anoures. C r. hebd. Seanc.
Acad. Sci., Paris 274, 2229-2231.
BENOIT,
Cellules germinales apres deficience gonadique chez le poulet 635
GIPOULOUX, J. D. (1973). Consequences de l'augmentation experimentale du nombre des
cellules medullaires sur l'organogenese precoce de la gonade embryonnaire du Crapaud
commun Bufo bufo L. (Amphibien Anoure). C. r. hebd. Seanc. Acad. Sci., Paris 277,
1217-1219.
GOLDSMITH, J. B. (1935). The primordial germ cells of the chick. I. The effect on the gonad
of complete and partial removal of the 'germinal crescent' and of removal of other parts
of blastodisc. /. Morph. 58, 537-553.
HAMBURGER, V. & HAMILTON, H. L. (1951). A series of normal stages in the development
of the chick embryo. /. Morph. 88, 49-92.
LIMBORGH, J. VAN (1962). Transplantation of gonadal primordia in 26 to 38 somite stage
duck embryos. Ada morph. neerl.-scand. 5, 167-181.
LIMBORGH, J. VAN (1968). Le premier indice de la differentiation sexuelle des gonades chez
l'embryon de Poulet. Archs Anat. microsc. Morph. exp. 57, 79-90.
MARIN, G. (1959). Sviluppo e differenziamento sessuale di embrioni di polio irradiati con
raggi gamma. Boll. Zool. 24, 165-172.
MEYER, D. B. (1964). The migration of primordial germ cells in the chick embryo. Devi
Biol. 10, 154-190.
MIMS, M. F. & MCKINNELL, R. G. (1971). Laser irradiation of the chick embryo germinal
crescent. /. Embryol exp. Morph. 26, 31-36.
REYNAUD, G. (1973). Contribution a Vetude des Relations entre Soma et Germen chez le
Poulet au moyen d'une Technique de Transfert des Gonocytes Primordiaux. These. Doct.
Univ. de Provence. A.O. du CNRS no. 8251.
SALZGEBER, B. (1950). Sterilisation et intersexualite obtenues chez l'embryon de poulet
par irradiation aux rayons X. Bull. Biol. Fr. Belg. 84, 225-233.
SIMON, D. (1960). Contribution a l'etude de la circulation et du transport des gonocytes
primaires dans les blastodermes d'Oiseau cultives 'in vitro'. Archs Anat. microsc. Morph.
exp. 49, 93-176.
WILLIER, B. H. (1937). Experimentally produced sterile gonads and the problem of the
origin of germ cells in the chick embryo. Anat. Rec. 70, 89-112.
WOLFF, ET. (1936). Les bases de la teratogenese experimentale des Vertebres Amniotes,
d'apres les resultats des methodes directes. Archs Anat. Histol. Embryol. 22, 1-382.
{Received 18 February 1974)