Lundi 27 août 2012, 9h00 Auditorium du St-Patrick, Hôtel

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Analyse spatiotemporelle des enzymes de déméthylation de
l’ADN et des histones dans l’embryon bovin
Florence Pagé-Larivière, MSc
Centre de recherche en biologie de la reproduction,
Département de biologie cellulaire et moléculaire, Faculté de médecine, Université Laval
Laboratoire Dr Marc-André Sirard
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Mise en contexte : La fécondation chez les bovins entraîne de profonds bouleversements au
niveau de l’épignome, tant à ce qui a trait aux méthylations de l’ADN qu’aux méthylations des
lysines des histones. Les enzymes impliquées dans ces changements sont toutefois peu
identifiées.
Résultats: L’hydroxylase Tet3 est présente dans les premiers stades embryonnaires,
contrairement à Tet1 et à la déaminase Aicda. Les déméthylases des lysines des histones
KDM3A, KDM4A et KDM4C sont exprimées avant et après l’activation du génome
embryonnaire alors que KDM5B est principalement exprimée au stade blastocyste.
Conclusion: La déméthylation de l’ADN suite à la fécondation chez le bovin n’est pas faite par
Aicda mais plutôt par Tet3. La déméthylation des histones se fait en partie par KDM3A,
KDM4A, KDM4C et KDM5B.
Impact: Nos recherches permettent d’identifier des protéines cibles sur lesquelles travailler pour
améliorer les techniques de reproduction assistée.
Résumé : Chez les mammifères, la déméthylation de l’ADN parternel ainsi que celle des lysines
des histones suite à la fécondation restent peu comprises. Des familles d’enzymes ont
récemment été associées à ces processus : les déaminases, notamment Aicda (activation-induced
cytosine deaminase), et les Tet (Ten-eleven translocation) hydroxylases, Tet1, Tet2 et Tet3. La
déméthylation des histones est relativement mieux caractérisée que celle de l’ADN. Plusieurs
déméthylases des lysines des histones (KDM) ont été identifiées au cours des dernières années
mais très peu d’informations sont disponibles à leur sujet dans l’embryon. Notre étude s’est
intéressée à ces familles d’enzymes lors des différents stades embryonnaires précoces chez la
vache et avait pour objectif de dresser un inventaire des protéines de déméthylation de l’ADN et
des lysisnes des histones à chacun de ces stades. Pour ce faire, nous avons quantifié leurs
transcrits respectifs, de l’ovocyte au blastocyste, en utilisant la méthode de RT-qPCR. En
parallèle, nous avons étudié la localisation de ces enzymes au cours du développement
embryonnaire grâce à l’immunofluorescence. Nos résultats indiquent qu’Aicda et Tet1 sont
absents pendant ces stades. Le profil exclusivement maternel des transcrits de Tet3 suggère son
rôle important dans la vague de déméthylation de l’ADN. Aussi, KDM3A, KDM4A et KDM4C
sont présents pendant les premiers stades embryonnaires alors que KDM5B est principalement
exprimé dans le blastocyste. Ces informations ouvrent la voie à de nouvelles recherches afin de
comprendre et de réduire les anomalies épigénétiques rencontrées chez les animaux issus de
certains protocoles de reproduction assistée.
Lundi 27 août 2012, 9h00
Auditorium du St-Patrick, Hôtel-Dieu de Québec