Sujet du stage (sous forme de titre court) : Structure et fonction du système de transformation naturelle de Streptococcus pneumoniae Laboratoire Nom du Responsable : Rémi Fronzes CNRS UMR3528 institut Pasteur Affiliation administrative (CNRS, INSERM...) et n° l'Unité : Adresse précise Laboratoire : du 25 rue du Dr Roux, 75015 Patur Équipe d'accueil des Doctorants Nom de l'équipe: Nom du Responsable : Biologie structurale de la sécrétion bactérienne Rémi Fronzes École Doctorale de rattachement : Complexité du vivant Responsable du Stage Nom : Rémi Fronzes Numéro de téléphone : 0145688864 Numéro de télécopie : Adresse électronique : [email protected] Profil de l'étudiant(e) souhaité : Renseignements complémentaires X Perspectiv oui es de poursuite de thèse : Avec une bourse spécifique : oui Non X Non 4 dans l'équipe d'accueil) si oui précisez : Laboratoire d'accueil (Unité CNRS, INSERM, etc..) : Nombre de chercheur 4 (dont s: Nombre d'enseign antschercheur s: 0 (dont 0 dans l'équipe d'accueil) Nombre de "HDR" : 1 (dont 1 dans l'équipe d'accueil) Nombre d'ITA : 1 (dont 1 dans l'équipe d'accueil) Nombre de "post-docs ": 3 (dont 3 dans l'équipe d'accueil) 0 0 Nombre (dont dans de l'équipe visiteurs d'accueil) étrangers : Sujet de stage (et principales techniques) : Notre laboratoire s’intéresse aux systèmes permettant aux macromolécules de traverser l’enveloppe cellulaire bactérienne. Ces systèmes de sécrétion sont essentiels à la survie et à la virulence des bactéries pathogènes. Nous nous intéressons tout particulièrement aux systèmes qui permettent à l’ADN d’entrer ou de sortir de la bactérie. Grâce à ces systèmes, les bactéries ont la capacité d’échanger de l’information génétique et d’acquérir de nouvelles compétences comme la résistance à un antibiotique ou la capacité à survivre dans un environnement qui leur est hostile. Dans le laboratoire, nous intéressons à l’architecture moléculaire des systèmes de transfert d’ADN responsables de la transformation bactérienne. Au cours de ce processus, de l’ADN est importé dans la bactérie depuis le milieu extérieur. Une machinerie moléculaire composée de plusieurs protéines et située au niveau de l’enveloppe cellulaire permet cet import. Les différents composants de cette machinerie d’import ont été identifiés mais leur structure ainsi que leur agencement au sein du complexe sont inconnus. Nous utilisons la microscopie électronique à haute résolution et la cristallographie afin comprendre comment la machinerie d’import est bâtie et comment elle fonctionne. Au cours de son stage, l’étudiant de M2 réalisera l’étude biochimique et structurale de sous-unités du système de transformation de Streptococcus pneumoniae. Elle/il utilisera des techniques de biologie moléculaire (clonage de gènes, électrophorèse, Western blot, expression de protéine recombinantes), de biochimie (Chromatographie) et de biophysique (Microscopie électronique et/ou cristallographie de protéines) afin de purifier ces protéines et d’en caractériser la structure.