(Microsoft PowerPoint - UE 2.1-Master_IADE_3bis [Mode de

Approfondissement des
connaissances en biologie
moléculaire
nic[email protected]
Master IADE – Année 2013-2014

Plan du cours
•Rappels de biologie moléculaire et de biologie
cellulaire
–Les molécules du vivant
–Le support de l’information génétique et son
décodage
–L’organisation de la cellule animale
•Les outils et les approches expérimentales
utilisées par les chercheurs
•Les mécanismes qui permettent aux cellules
de communiquer entre elles

Les outils et approches
expérimentales utilisées par les
chercheurs
Master IADE – Année 2013-2014

Les outils et les approches
expérimentales
•Les méthodes de purification et d’analyse des
molécules présentes dans les cellules
•Les cultures bactériennes
•Clonage et manipulation de l’ADN dans des bactéries
•Les cultures de cellules eucaryotes
•Les techniques de biologie cellulaire
•Souris transgéniques et souris porteuses de
mutations génétiques ciblées

Les méthodes de purification et d’analyse des
molécules présentes dans les cellules (1)
•Lyse de cellules en absence ou en présence de
détergents
•Selon les cas :
–Purification des organelles, des membranes et du cytosol par
centrifugation
–Fractionnement par chromatographie d’exclusion,
chromatographie sur couche mince ou chromatographie en
phase gazeuse
–Purification des acides nucléiques par extraction
phénol/chloroforme et précipitation en présence d’éthanol